диагностика 406 двигателя

код	Описание
13	Низкий уровень сигнала датчика расхода воздуха
14	Высокий уровень сигнала датчика расхода воздуха
15	Низкий уровень сигнала датчика абсолютного давления
16	Высокий уровень сигнала датчика абсолютного давления
17	Низкий уровень сигнала датчика температуры воздуха
18	Высокий уровень сигнала датчика температуры воздуха
21	Низкий уровень сигнала датчика температуры охлаждающей жидкости
22	Высокий уровень сигнала датчика температуры охлаждающей жидкости
23	Низкий уровень сигнала датчика положения дросселя
24	Высокий уровень сигнала датчика положения дросселя
25	Низкий уровень напряжения бортовой сети
26	Высокий уровень напряжения бортовой сети
27	Неисправность датчика угловой синхронизации
28	Неисправность датчика угловой синхронизации
29	Неисправность датчика угловой синхронизации
31	Низкий уровень сигнала первого корректора CO
32	Высокий уровень сигнала первого корректора CO
33	Низкий уровень сигнала второго корректора CO
34	Высокий уровень сигнала второго корректора CO
35	Низкий уровень сигнала первого LAMBDA — зонда
36	Высокий уровень сигнала первого LAMBDA — зонда
37	Низкий уровень сигнала второго LAMBDA — зонда
38	Высокий уровень сигнала второго LAMBDA — зонда
41	Неисправность цепи первого датчика детонации
42	Неисправность цепи второго датчика детонации
43	Низкий уровень сигнала ОС клапана рециркуляции
44	Высокий уровень сигнала ОС клапана рециркуляции
45	Низкий уровень сигнала ОС клапана адсорбера
46	Высокий уровень сигнала ОС клапана адсорбера
47	Низкий уровень сигнала усилителя рулевого управления
48	Высокий уровень сигнала усилителя рулевого управления
51	Неисправность блока управления 1
52	Неисправность блока управления 2
53	Неисправность датчика угловой синхронизации
54	Неисправность датчика положения распредвала
55	Неисправность датчика скорости автомобиля
61	Cброс блока управления
62	Неисправность ОЗУ блока управления
63	Неисправность ПЗУ блока управления
64	Неисправность чтения энергонезависимой памяти ЭБУ
65	Неисправность записи энергонезависимой памяти ЭБУ
66	Неисправность при чтении кода идентификации БУ
67	Ошибка иммобилизатора
68	Ошибка иммобилизатора
69	Ошибка иммобилизатора
71	Низкая частота вращения коленчатого вала на ХХ
72	Высокая частота вращения коленчатого вала на ХХ
73	Богатая смесь при регулировке по первому LAMBDA-зонду
74	Бедная смесь при регулировке по первому LAMBDA-зонду
75	Богатая смесь при регулировке по второму LAMBDA-зонду
76	Бедная смесь при регулировке по второму LAMBDA-зонду
79	Неисправность при управлении EGR по SEGR
81-88	Максимальное смещение УОЗ регулировки по детонации в 1…. 8 цилиндре
91-98	Неисправность в цепи зажигания 1….8 (КЗ)
99	Неисправность формирователя высокого напряжения
131	Неисправность форсунки 1 (КЗ)
132	Неисправность форсунки 1 (Обрыв)
133	Неисправность форсунки 1 (КЗ на землю)
134	Неисправность форсунки 2 (КЗ)
135	Неисправность форсунки 2 (Обрыв)
136	Неисправность форсунки 2 (КЗ на землю)
137	Неисправность форсунки 3 (КЗ)
138	Неисправность форсунки 3 (Обрыв)
139	Неисправность форсунки 3 (КЗ на землю)
141	Неисправность форсунки 4 (КЗ)
142	Неисправность форсунки 4 (Обрыв)
143	Неисправность форсунки 4 (КЗ на землю)
144	Неисправность форсунки 5 (КЗ)
145	Неисправность форсунки 5 (Обрыв)
146	Неисправность форсунки 5 (КЗ на землю)
147	Неисправность форсунки 6 (КЗ)
148	Неисправность форсунки 6 (Обрыв)
149	Неисправность форсунки 6 (КЗ на землю)
151	Неисправность форсунки 7 (КЗ)
152	Неисправность форсунки 7 (Обрыв)
153	Неисправность форсунки 7 (КЗ на землю)
154	Неисправность форсунки 8 (КЗ)
155	Неисправность форсунки 8 (Обрыв)
156	Неисправность форсунки 8 (КЗ на землю)
157	Неисправность пусковой форсунки (КЗ)
158	Неисправность пусковой форсунки (Обрыв)
159	Неисправность пусковой форсунки (КЗ на землю)
161	Неисправность обмотки 1 РДВ (КЗ)
162	Неисправность обмотки 1 РДВ (Обрыв)
163	Неисправность обмотки 1 РДВ (КЗ на землю)
164	Неисправность обмотки 2 РДВ (КЗ)
165	Неисправность обмотки 2 РДВ (Обрыв)
166	Неисправность обмотки 2 РДВ (КЗ на землю)
167	Неисправность цепи реле бензонасоса (КЗ)
168	Неисправность цепи реле бензонасоса (Обрыв)
169	Неисправность цепи реле бензонасоса (КЗ на землю)
171	Неисправность цепи клапана рециркул (КЗ)
172	Неисправность цепи клапана рециркул (Обрыв)
173	Неисправность цепи клапана рециркул (КЗ на землю)
174	Неисправность цепи клапана адсорбера (КЗ)
175	Неисправность цепи клапана адсорбера (Обрыв)
176	Неисправность цепи клапана адсорбера (КЗ на землю)
177	Неисправность цепи главного реле (КЗ)
178	Неисправность цепи главного реле (Обрыв)
179	Неисправность цепи главного реле (КЗ на землю)
181	Неисправность цепи лампы диагностики (КЗ)
182	Неисправность цепи лампы диагностики (Обрыв)
183	Неисправность цепи лампы диагностики (КЗ на землю)
184	Неисправность цепи тахометра (КЗ)
185	Неисправность цепи тахометра (Обрыв)
186	Неисправность цепи тахометра (КЗ на землю)
187	Неисправность цепи расходомера топлива (КЗ)
188	Неисправность цепи расходомера топл (Обрыв)
189	Неисправность цепи расходомера топл (КЗ на землю)
191	Неисправность цепи реле кондиционера (КЗ)
192	Неисправность цепи релекондиционера (Обрыв)
193	Неисправность цепи релекондиционера (КЗ на землю)
194	Неисправность цепи реле вентилятора (КЗ)
195	Неисправность цепи реле вентилятора (Обрыв)
196	Неисправность цепи реле вентилятора (КЗ на землю)
197	Неисправность цепи клапана ЭПХХ (КЗ)
198	Неисправность цепи клапана ЭПХХ (Обрыв)
199	Неисправность цепи клапана ЭПХХ (КЗ на землю)
201-238	Неисправность в цепи зажигания 1….8 (Обрыв)
241-248	Неисправность в цепи зажигания 1 (КЗ на землю)
251	Неисправность цепи прожига датчика МРВ (КЗ)
252	Неисправность цепи прожига датчика МРВ (Обрыв)
253	Неисправность цепи прожига датчика МРВ (КЗ на землю)

Диагностика системы управления двигателем ЗМЗ-406

При включении зажигания лампа сигнализатора загорается (на 0,5 с) и гаснет, если система самодиагностики не обнаружила неисправность

Тем самым проверяется исправность самой лампы сигнализатора.

Если система диагностики определит неисправность, то в зависимости от ее характера лампа может гореть (при включенном зажигании) либо постоянно, либо только при работающем двигателе.

И в первом и во втором случае необходимо провести техническое обслуживание системы управления двигателем.

Для перевода блока управления в режим вывода кодов неисправностей включаем зажигание и снимаем крышку диагностического разъема, расположенного под капотом.

Перемычкой из медной проволоки соединяем выводы «10» и «12» разъема.

Сначала система диагностики выдаст три раза подряд код (12) свидетельствующий об исправности диагностической цепи, цепи управления и работоспособности системы диагностики.

Следующими будут отображаться коды обнаруженных неисправностей.

Код каждой неисправности будет повторен трижды

После показа всех зафиксированных кодов неисправностей цикл вывода информации повторится. Если в памяти блока нет кодов неисправностей, то появится только код (12).

Код обнаруженной неисправности хранится в памяти блока примерно два часа.

По количеству включений сигнализатора определяем коды неисправностей.

При отсоединении батареи будут потеряны другие данные настроек, выработанные электронным блоком для адаптации системы управления двигателя к условиям эксплуатации.

После подключения «массы» запустите двигатель и дайте ему поработать на холостом ходу (не касаясь педали «газа») не менее 1 мин с целью адаптации системы зажигания к двигателю.

Чтобы адаптировать всю систему управления, нужно прогреть двигатель до рабочей температуры и проехать на автомобиле около 1 км с частичным открытием дроссельной заслонки и без резких ускорений.

Для очистки памяти выключаем зажигание и снимаем «минусовую» клемму аккумуляторной батареи на 15 сек.

Подключать клемму «массы» к аккумуляторной батарее во избежание повреждения электронного блока можно только при выключенном зажигании.

Неисправность Код

Режим начала диагностики (работоспособность самодиагностики) 12

Низкий уровень сигнала с датчика массового расхода воздуха 13

Высокий уровень сигнала с датчика массового расхода воздуха 14

Низкий уровень сигнала с датчика температуры воздуха (короткое замыкание) 17

Высокий уровень сигнала с датчика температуры воздуха (обрыв в цепи) 18

Низкий уровень сигнала с датчика охлаждающей жидкости (короткое замыкание в цепи) 21

Высокий уровень сигнала с датчика охлаждающей жидкости (обрыв, плохой контакт в цепи) 22

Низкий уровень сигнала с датчика положения дроссельной заслонки (короткое замыкание в цепи) 23

Высокий уровень сигнала с датчика положения дроссельной заслонки (обрыв, плохой контакт в цепи) 24

Низкое напряжение бортовой сети автомобиля (менее 10 В) 25

Высокое напряжение бортовой сети автомобиля (более 18 В) 26

Низкий уровень сигнала с корректора (потенциометра) СО  31

Высокий уровень сигнала с корректора (потенциометра) СО 32

Неисправность в цепи датчика детонации 41

Неисправность блока управления 51

Неисправность блока управления 52

Неисправность датчика положения коленчатого вала (синхронизации) 53

Неисправность датчика положения распределительного вала 54

Неисправность блока управления 61

Неисправность оперативной памяти (ОЗУ. RAM) блока управления 62

Неисправность постоянной памяти (ПЗУ, ROM) блока управления 63

Неисправность при чтении энергонезависимой памяти блока 64

Неисправность при записи в энергонезависимую память 65

Низкая частота вращения коленчатого вала на холостом ходу 71

Высокая частота вращения коленчатого вала на холостом ходу 72

Максимальное смещение УОЗ* при регулировании по детонации в 1-м цилиндре 81

Максимальное смещение УОЗ* при регулировании по детонации во 2-м цилиндре 82

Максимальное смещение УОЗ* при регулировании по детонации в 3-м цилиндре 83

Максимальное смещение УОЗ* при регулировании по детонации в 4-м цилиндре 84

Неисправность в цепи зажигания 1-го цилиндра 91

Неисправность в цепи зажигания 2-го цилиндра 92

Неисправность в цепи зажигания 3-го цилиндра 93

Неисправность в цепи зажигания 4-го цилиндра 94

Неисправность форсунки 1 -го цилиндра (короткое замыкание в цепи) 131

Неисправность форсунки 1-го цилиндра (обрыв в цепи) 132

Неисправность форсунки 1-го цилиндра (короткое замыкание на корпус) 133

Неисправность форсунки 2-го цилиндра (короткое замыкание в цепи) 134

Неисправность форсунки 2-го цилиндра (обрыв в цепи) 135

Неисправность форсунки 2-го цилиндра (короткое замыкание на корпус) 136

Неисправность форсунки 3-го цилиндра (короткое замыкание в цепи) 137

Неисправность форсунки 3-го цилиндра (обрыв в цепи) 138

Неисправность форсунки 3-го цилиндра (короткое замыкание на корпус) 139

Неисправность форсунки 4-го цилиндра (короткое замыкание в цепи) 141

Неисправность форсунки 4-го цилиндра (обрыв в цепи) 142

Неисправность форсунки 4-го цилиндра (короткое замыкание на корпус) 143

Неисправность обмотки 1 РДВ** (короткое замыкание в цепи) 161

Неисправность обмотки 1 РДВ** (обрыв) 162

Неисправность обмотки 1 РДВ** (короткое замыкание на корпус) 163

Неисправность обмотки 2 РДВ“ (короткое замыкание в цепи) 164

Неисправность обмотки 2 РДВ** (обрыв) 165

Неисправность обмотки 2 РДВ** (короткое замыкание на корпус) 166

Неисправность цепи реле топливного насоса (короткое замыкание в цепи) 167

Неисправность цепи реле топливного насоса (обрыв) 168

Неисправность цепи реле бензонасоса (короткое замыкание на корпус) 169

Неисправность цепи разгрузочного реле (короткое замыкание в цепи)*** 177

Неисправность цепи разгрузочного реле (обрыв)*** 178

Неисправность цепи разгрузочного реле (короткое замыкание на корпус)*** 179

Короткое замыкание в цепи лампы сигнализатора*** 181

Обрыв цепи лампы сигнализатора*** 182

Короткое замыкание на корпус в цепи лампы сигнализатора*** 183

* УОЗ — угол опережения зажигания.

** РДВ — регулятор дополнительного воздуха.

*** Проверяется внешним диагностическим оборудованием.

Диагностика двигателя ЗМЗ 406. 2 на неустановившихся режимах работы Текст научной статьи по специальности «Механика и машиностроение»

УДК 621.431

ДИАГНОСТИКА ДВИГАТЕЛЯ ЗМЗ — 406.2 НА НЕУСТАНОВИВШИХСЯ РЕЖИМАХ РАБОТЫ

А.А.Сивов1

Санкт-Петербургский государственный университет сервиса и экономики (СПбГСЭ),

191015, Санкт-Петербург, ул. Кавалергардская,7

Аннотация — На базе автомобильного двигателя ЗМЗ 406.2 и мощностного тормоза LPHY разработана установка для исследований показателей работы нейтрализатора оксидов азота и двигателя на переходных процессах. Определены три области режимов работы двигателя: малых нагрузок, средних нагрузок. Исследованы показатели токсичности двигателя ЗМЗ-406.2 на установленных режимах работы.

Ключевые слова: Двигатель, неустановившиеся режимы, токсичность выброса

ENGINE ZMZ — 406.2 DIAGNOSTICS ON UNSTEADY OPERATING MODES

A.A.Sivov

St. -Petersburg state university of service and economy (SPbSUSE), 191015, St.-Petersburg, street Kavalergardsky, 7;

The summary — On the basis of automobile engine ZMZ 406.2 and brakes LPHY the installation for researches indicators of work for neutralizer oxides nitrogen and the engine on transients was designed. Three areas of operating modes dvi-gatelja are defined: small loadings, average loadings. Indicators of toxicity of engine ZMZ-406.2 on the established operating modes are investigated.

Keywords: the Engine; unsteady modes; toxicity of emission

При движении автомобиля, особенно в городе, режимы работы двигателя постоянно изменяются, при этом постоянно изменяется частота вращения коленчатого вала двигателя и нагрузка, подача топливовоздушной смеси в цилиндры. Таким образом, нестационарные режимы являются преобладающими при эксплуатации автомобилей и составляют от всего времени движения [ 1]:

— при интенсивном городском движении примерно 95 %;

— при движении по грунтовым дорогам около 85.. .90 %;

— на загородных усовершенствованных автомобильных дорогах 30.35 %.

По статистике, в зависимости от условий эксплуатации на каждые 1000 км пробега приходится 50 пусков и остановок двигателя. При движении автомобилей по дорогам различного качества их двигатели наибольшее время работают при открытой на 5 — 70 % дроссельной заслонке карбюратора и развиваемой мощности от 13 до 78% от номинальной.

В городских условиях продолжительность работы автомобиля в режимах

ускорения достигает 67 %. Протяженность участков разгона и замедления, существенным образом влияющих на среднюю техническую скорость движения, составляет 70 — 80 % от общего пути, пройденного автомобилем.

Во время разгона расход топлива в 1,35 — 1,45 раза больше, чем при равномерном движении автомобиля на этом же участке, так как значительная часть топлива, расходуемая на приобретение автомобилем кинетической энергии, при замедлении может быть обращена в полезную работу лишь частично. Расход топлива на режимах разгона, прежде всего, зависит от средней величины ускорения автомобиля, производительности ускорительного насоса, частоты и качества выполнения приемов переключения передач, а также от суммарного числа оборотов коленчатого вала, приходящихся на единицу пути.

К наиболее характерным переходным процессам при движении в городе относятся процессы пуска, разгона и на-брос нагрузки [2].

В процессе пуска двигателя наблюдаются весьма резкие изменения параметров рабочего процесса и в значительных пределах. Для пуска характерны следующие фазы: раскрутка двигателя до появления первых вспышек топлива в цилиндрах х*; разгон двигателя до вступления в действие регулятора частоты вращения х2; разгон двигателя с одновременным уменьшением цикловой подачи топлива соответствующей подаче на холостом ходу, т3; прогрев двигателя с относительно малым изменением скоростного режима и цикловой подачи х3. Общая длительность процесса пуска составляет

Тх = т1+т2+т3+ т4. (1)

Продолжительность первой фазы зависит в основном от наличия и состояния смазки на трущихся поверхностях деталей. Во второй фазе интенсивно увеличивается частота вращения двигателя при неблагоприятных характеристиках топливоподачи и низкой температуре деталей цилиндра, что обусловливает большой период задержки воспламенения топлива Xj и в последующих циклах повышенные значения максимального давления цикла pz и скорости нарастания давления газов в цилиндре (dp/d.<p)max. Период задержки воспламенения топлива х, существенно зависит от температуры стенок камеры сгорания. После первых вспышек возрастает частота вращения, улучшаются характеристики топливопо-дачи и смесеобразование, повышаются температура стенок камеры сгорания, давление и температура в конце сжатия рс и Тс. При этом сокращаются х и потери теплоты через стенки цилиндра. В начале второй фазы может наблюдаться снижение коэффициента наполнения T]v связи с большими ускорениями вращения коленчатого вала.

Третья фаза определяется вступлением в действие регулятора частоты вращения. При этом цикловая подача топлива AgH снижается до значений, соответствующих режиму холостого хода. Четвертая фаза характеризуется монотонным изменением всех параметров рабочего процесса до стабилизации темпе-

ратурного состояния деталей двигателя. Изучение параметров рабочего процесса при пуске двигателей представляет интерес в связи с разработкой и реализацией мероприятий по снижению температурного предела холодного пуска и пусковых износов.

Из большого многообразия процессов разгона двигателя наиболее характерными являются два типа: за счет увеличения цикловой подачи топлива; за счет уменьшения момента сопротивления при подаче топлива.

Процесс разгона за счет увеличения цикловой подачи топлива включает три фазы: первая фаза соответствует времени изменения воздействующего фактора, т.е. цикловой подачи рабочего процесса, и длится до момента достижения номинальной частоты вращения коленчатого вала. Первая фаза протекает при плавном монотонном изменении всех показателей в сравнительно малых пределах при дальнейшем незначительном росте п и прогреве деталей двигателя до достижения ими в конце фазы значений, соответствующих новому установившемуся режиму. Вторая фаза разгона длится от нескольких секунд до минут в зависимости от типа двигателя и влияния перечисленных выше факторов. Продолжительность третьей фазы разгона составляет для автотранспортных двигателей от 4 до 6 минут, а для крупногабаритных дизелей до 25 — 30 минут и определяется временем, необходимым для прогрева двигателя.

При набросе нагрузки, так же как и при разгоне, наблюдаются три фазы переходного процесса. Длительность первой фазы определяется характером на-броса нагрузки; для второй сравнительно кратковременной фазы характерны резкие и значительные изменения показателей рабочего процесса; третья фаза характеризуется монотонным их изменением в малых пределах до завершения прогрева двигателя и выхода его на новый установившийся режим работы. Сброс нагрузки. Этот переходный процесс характеризуется резким уменьшением момента сопротивления и относительно ма-

лым изменением частоты вращения коленчатого вала в пределах степени неравномерности регулятора частоты вращения. При этом можно выделить две фазы процесса: первая характеризуется значительными резкими изменениями показателей и сравнительно небольшой продолжительностью; вторая — плавными изменениями показателей в малых пределах при достижении в конце процесса значений, характерных для конечного установившегося режима.

В исследованиях используется опытный образец нейтрализатора оксидов азота (рис. 1).

10 8 9 7 5 б 4 11

Рисунок 1 — Схема нейтрализатора

Поток отработавших газов поступает по выхлопной трубе к входному патрубку 2 нейтрализатора [3]. Проходя суживающееся сопло 8, отработавшие газы создают пониженное давление в начале смесительной камеры 5, вследствие чего по кольцевому каналу 7 часть отработавших газов поступает на рециркуляцию через кольцевое отверстие 9. За счет разности давлений на входе и выходе смесительной камеры засасывается также газ-восстановитель по трубке 10 подачи газа-восстановителя в смесительную камеру 5, где затем идет процесс интенсивного перемешивания с основным потоком отработавших газов, проходящим через суживающееся сопло.

Экспериментальные исследования проводились в лабораториях «Санкт -Петербургского университета сервиса и экономики» и «Автотранспортного и

электромеханического колледжа администрации Санкт-Петербурга».

Установка для исследований показателей работы нейтрализатора оксидов азота и двигателя создана на базе автомобильного двигателя ЗМЗ 406.2[4] Заволжского автомобильного завода. Стенд оснащен системами, обеспечивающими его функционирование на всех режимах исследований, а также контрольноизмерительной и регистрирующей аппаратурой, позволяющей контролировать и регистрировать все необходимые для работы и проведения исследований параметры двигателя и системы очистки ОГ. Комплектация двигателя соответствовала требованиям ГОСТ 14846-81. Двигатель обкатан в соответствии с техническими условиями завода-изготовителя. В качестве нагрузочного устройства используется мощностной тормоз LPHY (рис. 2).

Рисунок 2 — Мощностной тормоз LPHY

Агрегат смонтирован на мобильной раме и пристыковывается к испытуемому двигателю с помощью быстроразъёмных соединений. Мощностной тормоз охлаждается водопроводной водой с помощью системы охлаждения. Специальный карданный вал передаёт вращательное движение двигателя на насос высокого давления, который затормаживает двигатель (рис. 3).

Имеющийся в составе комплекса блок индицирования позволяет отображать и снимать характеристики протекания процессов в камере сгорания двига-

теля. Процесс снятия показаний осуществляется при использовании свечи инди-цирования, встроенного датчика давле-

ния, усилителя заряда и программной оболочки.

Рисунок 3 — Схема экспериментальной установки: ЗМЗ 406.2 — двигатель; ЭБМ — электрическая балансирная машина; ЭНУ — электрическое нагрузочное устройство; ВМ — весовой механизм для замера часового расхода топлива; РВ — расходомер воздуха; ЭТ — электронный тахометр; НОГ — нейтрализатор ОГ; РА — емкость с раствором аммиака; МП — механизм подачи аммиачного раствора; ИТП — измеритель температуры потенциометрический; Т1 — термопара; BOSCH ESA 3.250 — газоанализатор; Д\,Д2,ДЪ-датчики для замера давления; Я.VI, ПУ2 -пульт управления; УВО — управляющее воздействие оператора

Программа располагает как файлами получаемых данных измерений, так и файлами для демонстрации функционирования системы. Так же мощностной тормоз оснащён ШВ-интерфейсом.

Методикой предусматривалось проведение сравнительных исследований работы двигателя на режимах номинальной мощности (п=5200 мин-1), максимального крутящего момента (п=4500 мин-1) без подачи газа (рис., (2)

1е 0Д05-гк ’ 4 ’

где: V — скорость текущей фазы разгона,

1в

м/с; и — передаточное число ступени коробки передач; и — передаточное чис-

гп

ло главной передачи; г — радиус качения

к

колеса, м.

п=3000 об/мин ——§е ——ОТ

Частота вращения об/мин

О} <п

Ые, кВт

14

12

10

8 с а т к

6 т 1Э

4

2

0

Рисунок 4 — Характеристики двигателя ЗМЗ 406.2

Определяем значение мощности и крутящего момента, соответствующее для 1-ой фазы разгона.

ЛГ —

Пдг

п Г: і-«і [

3-4а1

Пдг

_ 955СЬІУе1-теі ~ „

<-;©] , (3)

(4)

где щ — частота вращения КВ, соответствующая /-ой фазе разгона, (мин ).

После преобразований уравнений параметры для нагрузочного устройства соответствующие /-ой фазе разгона, определяются по формуле (5).

Рееы = 7? . (5)

Типичные режимы движения автомобиля задаются ездовым циклом (ЕЦ), состоящим из этапов холостого хода, разгона, установившегося движения, замедления и торможения. Количество эквивалентных режимов определяется исходя из анализа графика ЕЦ. Каждый этап разгона в ЕЦ представляется числом точек, соответствующих числу используемых при разгоне ступеней коробки передач. Каждый этап равномерного

движения представляется одной точкой, а этапы холостого хода и замедления -точкой холостого хода [5]. Городской ездовой цикл по ГОСТ Р 41.83-2004 (рис. 5) в соответствии с предлагаемой методикой представляется 12-ю режимами (табл. 1).

Рисунок 5 — Г ородской ездовой цикл по ГОСТ Р 41.83-2004

Поскольку режимы разгона на

2

первой передаче с ускорением 0,83 м/с повторяются в ЕЦ дважды, то в табл. 1 они представлены одной строкой с их суммарной продолжительностью. Четыре этапа холостого хода, а также три этапа выбега автомобиля представлены одним режимом холостого хода с минимальны-

ми оборотами коленчатого вала двигателя п . Три этапа принудительного холо-

min

стого хода во время замедления автомобиля представлены режимом холостого хода с повышенными оборотами коленчатого вала двигателя.

Методика определения эквивалентных режимов базируется на следующих допущениях, связанных со спецификой испытательного оборудования:

Таблица 1 — Этапы городского цикла по ГОСТ Р 41.83-2004

Наименование этапа Скорость, км/ч 2 Ускорение, м/с Длительность, с Ступень КП

Разгон 0-15 1,04 4 1

Равномерное движение 15 — 8 1

Разгон 0-15 0,83 5+5=10 1

Разгон 15-32 0,94 5 2

Равномерное движение 32 — 24 2

Разгон 15-35 0,62 9 2

Разгон 35-50 0,52 8 3

Равномерное движение 50 — 12 3

Равномерное движение 35 — 13 3

Холостой ход, п шт — — 77 —

Холостой ход, п пов — — 25 —

— неустановившиеся режимы разгонов автомобиля заменяются установившимися режимами испытаний на нагрузочном стенде;

-режимы принудительного холостого хода заменяются режимом холостого хода с повышенными оборотами коленчатого вала двигателя.

Каждый эквивалентный режим определялся совокупностью двух показателей: скоростью движения автомобиля и мощностью сопротивления движению автомобиля. Скорость задавалась согласно частоте вращения двигателя, мощность сопротивления движению определялась нагрузкой, создаваемой стендом (табл. 2). Минимизируя число режимов исследований, режимы работы двигателя условно разделяются на три области: малых нагрузок, средних нагрузок, больших нагрузок (таб. 3).

На режимах малых нагрузок основным требованием является обеспечение устойчивой работы двигателя. Для этого топливно-воздушную смесь приходится обогащать, используя систему холостого хода карбюратора. Это приводит к существенному увеличению выбросов СО и СН вследствие неполного сгорания

смеси. На режимах средних нагрузок главное — это достижение максимальной топливной экономичности. Для этого топливно-воздушную смесь обедняют, насколько это возможно для данного двигателя.

При этом выбросы углеводородов (СН) и оксида углерода (СО) снижаются. Однако, вместе с тем растут выбросы оксидов азота (NO), особенно на повышенных частотах вращения коленчатого вала, так как именно на этих режимах в полной мере реализуются два основных условия образования этих веществ — высокая температура и наличие свободного кислорода. На режимах больших нагрузок рабочий процесс формируют таким образом, чтобы обеспечить наивысшую энергоотдачу от сжигаемого топлива. С этой целью топливно-воздушную смесь опять приходится обогащать, используя систе-

му экономайзера и/или эконостата кар- оборот снижаются из-за недостатка сво-

бюратора. Соответственно, выбросы СО бодного кислорода.

и СН увеличиваются по сравнению с частичными нагрузками, а выбросы N0 на-

Таблица 2 — Представление режимов разгона АТС

№ режима V , м/с ie U КП 5 вр N , кВт ів N , кВт іи N , кВт ie

1 2,08 1 1,612 0,006 5,52 5,526

2 4,17 1 1,612 0,046 — 0,046

3 2,08 1 1,612 0,006 4,406 4,412

4 6,53 2 1,231 0,175 11,935 12,11

5 8,9 2 1,231 0,442 — 0,442

6 6,95 2 1,231 0,211 8,38 8,591

7 11,81 3 1,108 1,035 10,74 11,782

8 13,89 3 1,108 1,685 — 1,685

9 9,72 3 1,108 0,578 — 0,578

Таблица 3 — Точки работы двигателя на эквивалентных режимах

№ режима N ik n ie M ie k ie Область

1 0,66 768 109 0,022 высоких нагрузок

2 1,29 1535 9,22 0,044 малых нагрузок

3 0,66 768 69,7 0,055 средних нагрузок

4 2,02 1393 107,4 0,027 высоких нагрузок

5 2,28 1896 17,85 0,131 малых нагрузок

6 2,15 1482 76,71 0,049 средних нагрузок

7 3,66 1501 108,88 0,044 высоких нагрузок

8 4,31 1766 35,9 0,066 малых нагрузок

9 3 1236 30,75 0,071 малых нагрузок

10 — 750 — 0,42 холостого хода

11 — 1200 — 0,137 холостого хода

Литература

1. Кузьмин Н.А. Процессы и закономерности изменения технического состояния автомобилей в эксплуатации. Нижний Новгород, 2002.

2. Николаенко А.В., Шкрабак В.С. Энергетические установки и машины. Двигатели внутреннего сгорания: Учеб. пособие. СПб.: СПбГАУ, 2005.

3. Николаенко А.В., Салова Т.Ю. Способ и устройство для снижения выбросов оксидов азота с отработавшими газами дизелей //«Экология и

сельскохозяйственная техника». Тез. докл. на-учн.- практ. конф. ВНИПТИМЭСХ. СПб, 1998. С. 214-216.

4. Двигатель ЗМЗ 4062. Руководство по эксплуатации, техническому обслуживанию и ремонту ОАО «Заволжский моторный завод». — Заволжье. 2002.

5. Безопасность транспортных средств (автомобили) / В. А. Гудков, Ю. Я. Комаров, А. И. Ряб-чинский, В. Н. Федотов. Учебное пособие для вузов. — М.: Горячая линия-Телеком, 2010. — 431 с.

1 Сивов Александр Александров, аспирант СПбГУСЭ тел.: +7(911)981-99-96; e-mail: mr. sivoff@gmail. com

Коды ошибок змз 406 карбюратор

Книга не всегда под рукой. Часто я и так понимаю в чём дело. Но список кодов ошибок должен быть в быстром доступе.

Самодиагностика ошибок
Для включения режима диагностики на змз 406 необходимо установить перемычку в диагностический разъем, включить зажигание. Далее считать все коды неисправностей. Для правильного понимания как ЭБУ отображает коды нужно немного потренироваться. Мигать будет лампа Проверьте Двигатель. Начало диагностики всегда начинается с кода 12 по нему и следует сориентироваться, запомнив длину вспышки и паузы. Между блоками следует длинная пауза. После отображения всех неисправностей цикл повторяется снова с кода 12.
Таблица предназначена для определения неисправности в пути, если вдруг рядом не оказалось книги с кодами. Не нужно паниковать, а попытаться определить и устранить поломку самостоятельно, тем более, что сложности никакой в этом нет. Иногда можно просто отключить датчик и продолжить движение.

Список кодов ошибок (таблица):
12 Начало диагностики
13 Низкий уровень с ДМРВ
14 Высокий уровень с ДМРВ
17 Низкий уровень датчика Т (замыкание)
18 Высокий уровень датчика Т (обрыв)
21 Низкий уровень датчика ОЖ (замыкание)
22 Высокий уровень датчика ОЖ (обрыв)
23 Низкий уровень с датчика ПДЗ (замыкание)
24 Высокий уровень с датчика ПДЗ (обрыв)
25 Низкое напряжение бортовой сети
26 Высокое напряжение бортовой цепи
41 Неисправна цепь датчика детонации
51 Неисправность ЭБУ
52 Неисправность ЭБУ
53 Неисправность датчика синхронизации (КВ) (Ехать нельзя — устранить неисправность)
54 Неисправность датчика положения РВ
61 Неисправность ЭБУ
62 Неисправность ОЗУ
63 Неисправность ПЗУ
64 Неисправность при чтении памяти
65 Неисправность при записи в память
71 Низкая частота вращения на ХХ
72 Высокая частота вращения на ХХ
81 Максимальное смещение УОЗ в 1 цилиндре
82 Максимальное смещение УОЗ в 2 цилиндре
83 Максимальное смещение УОЗ в 3 цилиндре
84 Максимальное смещение УОЗ в 4 цилиндре
91 Неисправность в цепи зажигания 1 цилиндра
92 Неисправность в цепи зажигания 2 цилиндра
93 Неисправность в цепи зажигания 3 цилиндра
94 Неисправность в цепи зажигания 4 цилиндра
131 Неисправность форсунки 1 цилиндра (замыкание в цепи)
132 Неисправность форсунки 1 цилиндра (обрыв)
133 Неисправность форсунки 1 цилиндра (замыкание на массу)
134 Неисправность форсунки 2 цилиндра (замыкание в цепи)
135 Неисправность форсунки 2 цилиндра (обрыв)
136 Неисправность форсунки 2 цилиндра (замыкание на массу)
137 Неисправность форсунки 3 цилиндра (замыкание в цепи)
138 Неисправность форсунки 3 цилиндра (обрыв)
139 Неисправность форсунки 3 цилиндра (замыкание на массу)
141 Неисправность форсунки 4 цилиндра (замыкание в цепи)
142 Неисправность форсунки 4 цилиндра (обрыв)
143 Неисправность форсунки 4 цилиндра (замыкание на массу)
161 Неисправность 1 обмотки РХХ (замыкание в цепи)
162 Неисправность 1 обмотки РХХ (обрыв)
163 Неисправность 1 обмотки РХХ (замыкание на массу)
164 Неисправность 2 обмотки РХХ (замыкание в цепи)
165 Неисправность 2 обмотки РХХ (обрыв)
166 Неисправность 2 обмотки РХХ (замыкание на массу)
167 Неисправность цепи реле ТН (замыкание в цепи) (Ехать нельзя — устранить неисправность)
168 Неисправность цепи реле ТН (обрыв) (Ехать нельзя — устранить неисправность)
169 Неисправность цепи реле ТН (замыкание на массу) (Ехать нельзя — устранить неисправность)
177 Неисправность цепи главного реле (замыкание в цепи) (Ехать нельзя — устранить неисправность)
178 Неисправность цепи главного реле (обрыв) (Ехать нельзя — устранить неисправность)
179 Неисправность цепи главного реле (замыкание на массу) (Ехать нельзя — устранить неисправность)
181 Замыкание в цепи контрольной лампы СУД
182 Обрыв в цепи контрольной лампы СУД
183 Замыкание на массу в цепи контрольной лампы СУД

Сокращения
ДМРВ — датчик массового расхода воздуха
Т — температура
ОЖ — охлаждающая жидкость
ПДЗ — положение дроссельной заслонки
КВ — коленчатый вал
ОЗУ — оперативное запоминающее устройство
РХХ — регулятор холостого хода
ТН — топливный насос
РВ — рапределительный вал
УОЗ — угол опережения зажигания
СУД — система управления двигателем
ЭБУ — электронный блок управления

Данные взяты:
1) Руководство по ремонту, эксплуатации и техническому обслуживанию автомобиля Волга Газ 3110. ISBN 5-8115-0011-4
2) ГАЗ-3110, -3102 «Волга»: Руководство по эксплуатации, техническому обслуживанию и ремонту. ISBN 978-5-88924-171-3

На автомобиле Соболь с двигателем ЗМЗ-40522 установлен блок МИКАС 7.1 или МИКАС 7.2. Это микропроцессор, который обрабатывает информацию от датчиков и вырабатывает управляющие сигналы для исполнительных устройств, по программе введенной в память блока управления ПЗУ.

Программа имеет функцию подстройки системы к различным условиям эксплуатации и нагрузки на двигатель. Информация о настройках хранится в ОЗУ блока системы управления двигателем. При отключении аккумулятора эта информация стирается.

Блок управления диагностирует цепи датчиков и исправность собственнй схемы, при выявлении включает сигнальную лампочку и записывает в память код ошибки. Сигнализатор системы управления включается также при временных сбоях в работе датчиков и перегреве двигателя. В этом случае он сразу гаснет после того как неисправность исчезает.

При включении зажигания лампа сигнализатора загорается (на 0,5с) и гаснет, если система самодиагностики не обнаружила неисправность.

Если система диагностики определит неисправность, то контрольная лампа может гореть либо постоянно, либо только при работающем двигателе. В обоих случаях необходимо провести диагностику системы управления двигателем.

Для перевода блока управления в режим вывода кодов неисправностей нужно:

• включить зажигание
• снять крышку колодки диагностического разъема, расположенного под капотом справа
• пермычкой из медной проволоки соединить выводы «10» и «12» колодки
• по количеству включений лампочки сигнализатора определить код неисправности (каждой цифре кода соответствует короткая (по 0,5с) серия вспышек, между сериями идет пауза на 1,5с, после того как все 2 или 3 цифры переданы следует длинная пауза на 4 с).
• сначала система диагностики выдаст три раза подряд код»12″, свидетельствующий о исправности системы
• следующими будут отображаться коды обнаруженных ошибок, код каждой неисправности повторяется трижды
• после показа всех кодов неисправностей цикл повторится
• ели кодов неисправностей нет то будет показан только код «12»

Код обнаруженной неисправности хранится в памяти блока около 2 часов. Для очистки памяти нужно ВЫКЛЮЧИТЬ зажигание и снять клемму с аккумулятора. Вместе с кодами ошибок будут потеряны и данные адаптации к управлению двигателем.

Коды неисправностей системы управления двигателем ЗМЗ-40522 (Соболь с 2003 года)

запчасти на двигатель камминз газель

Москва, ул. Коминтерна, д. 20/2. Тел.: +7 800 500-72-83, 8 (495) 134-81-15

При загорании лампы неисправности двигателя автомобилей марки ГАЗ оборудованных контроллером МИКАС 5.4(7.1) не всегда надо сразу ехать в сервис, где проводиться диагностика двигателя. Диагностика 406 двигателя может быть осуществлена своими силами. Если Вы ознакомились с материалами сайта и поняли принцип работы датчиков, то возможно сможете справиться с этой задачей самостоятельно.
Для этого надо, первым делом осмотреть состояние проводов подходящим к датчикам, надёжность соединения колодок и провести диагностику систем двигателя, то есть поверить наличие кодов неисправности в памяти компьютера. При возникновении неисправности в электрических цепях датчиков и исполнительных механизмов, а так же в самих приборах, в память компьютера заносится соответствующий код, который сохраняется там до удаления его с помощью диагностического оборудования или снятия питания с контроллера. В контроллерах МИКАС есть функция самодиагностики. При включении этой функции контрольная лампа исправности двигателя выдаёт трёхзначный световой код, который определяется по числу раз загорания лампы и интервалу времени между включений.

Например цифре один соответствует одно включение длительностью 0,5 сек., двойке два и т.д., после этого следует пауза 1,5 сек. с последующим аналогичным включением, что соответствует одному коду. Интервал между кодами равен 4 сек. Чтобы перевести блок управления в режим самодиагностики надо при выключенном зажигании соединить отдельным проводом выводы 10 и 12 колодки диагностики, после чего при включении зажигания лампа контроля двигателя должна выдать код 12 , что свидетельствует о работе контроллера в режиме самодиагностики. При наличии кодов неисправности они последуют после этого. После передачи всех сохранённых в памяти компьютера кодов, так же последует код 12, что соответствует окончанию. После проведения данных мероприятий следует снять клемму с АБ не менее чем на 12 сек., что приведёт к сбросу всех ошибок. После этого следует надеть клемму, запустить двигатель, дать ему поработать на холстом ходу и повторить процедуру диагностики 406 двигателя повторно. При повторении ошибок приступать к их устранению.

Неисправность	Код
Режим начала диагностики (работоспособность самой диагностики)	12
Низкий уровень сигнала с датчика массового расхода воздуха	13
Высокий уровень сигнала с датчика массового расхода воздуха	14
Низкий уровень сигнала с датчика температуры воздуха (короткое замыкание)	17
Высокий уровень сигнала с датчика температуры воздуха (обрыв цепи)	18
Низкий уровень сигнала с датчика температуры охлаждающей жидкости (короткое замыкание в цепи)	21
Высокий уровень сигнала с датчика температуры охлаждающей жидкости (обрыв, плохой контакт цепи)	22
Низкий уровень сигнала с датчика положения дроссельной заслонки (короткое замыкание цепи)	23
Высокий уровень сигнала с датчика положения дроссельной заслонки (обрыв, плохой контакт цепи)	24
Низкое напряжение бортовой цепи автомобиля	25
Высокое напряжение бортовой цепи автомобиля	26
Неисправность в цепи датчика детонации	41
Неисправность блока управления	51
Неисправность блока управления	52
Неисправность датчика синхронизации	53
Неисправность датчика положения распределительного вала	54
Неисправность блока управления	61
Неисправность оперативной памяти блока управления ОЗУ, RAM	62
Неисправность постоянной памяти блока управления ПЗУ, RОM	63
Неисправность при чтении энергонезависимой памяти блока	64
Неисправность при записи в энергонезависимую память блока	65
Низкая частота вращения коленчатого вала на холостом ходу	71
Высокая частота вращения коленчатого вала на холостом ходу	72
Максимальное смещение УОЗ (угол опережения зажигания) при регулировании по детонации в 1-м цилиндре	81
Максимальное смещение УОЗ () при регулировании по детонации в 2-м цилиндре	82
Максимальное смещение УОЗ () при регулировании по детонации в 3-м цилиндре	83
Максимальное смещение УОЗ () при регулировании по детонации в 4-м цилиндре	84
Неисправность в цепи зажигания 1-го цилиндра	91
Неисправность в цепи зажигания 2-го цилиндра	92
Неисправность в цепи зажигания 3-го цилиндра	93
Неисправность в цепи зажигания 4-го цилиндра	94
Неисправность форсунки 1-го цилиндра (короткое замыкание в цепи)	131
Неисправность форсунки 1-го цилиндра (обрыв цепи)	132
Неисправность форсунки 1-го цилиндра (короткое замыкание на корпус)	133
Неисправность форсунки 2-го цилиндра (короткое замыкание в цепи)	134
Неисправность форсунки 2-го цилиндра (обрыв цепи)	135
Неисправность форсунки 2-го цилиндра (короткое замыкание на корпус)	136
Неисправность форсунки 3-го цилиндра (короткое замыкание в цепи)	137
Неисправность форсунки 3-го цилиндра (обрыв цепи)	138
Неисправность форсунки 3-го цилиндра (короткое замыкание на корпус)	139
Неисправность форсунки 4-го цилиндра (короткое замыкание в цепи)	141
Неисправность форсунки 4-го цилиндра (обрыв цепи)	142
Неисправность форсунки 4-го цилиндра (короткое замыкание на корпус)	143
Неисправность обмотки 1 РДВ (регулятор дополнительного воздуха) (короткое замыкание в цепи)	161
Неисправность обмотки 1 РДВ (обрыв)	162
Неисправность обмотки 1 РДВ (регулятор дополнительного воздуха) (короткое замыкание на корпус)	163
Неисправность обмотки 2 РДВ (регулятор дополнительного воздуха) (короткое замыкание в цепи)	164
Неисправность обмотки 2 РДВ (обрыв)	165
Неисправность обмотки 2 РДВ (регулятор дополнительного воздуха) (короткое замыкание на корпус)	166
Неисправность цепи реле топливного насоса (короткое замыкание в цепи)	167
Неисправность цепи реле топливного насоса (обрыв)	168
Неисправность цепи реле топливного насоса (короткое замыкание на корпус)	169
Неисправность цепи главного реле (короткое замыкание в цепи)	177
Неисправность цепи главного реле (обрыв)	178
Неисправность цепи главного реле (короткое замыкание на корпус)	179
Короткое замыкание в цепи лампы сигнализатора (проверяется с помощью внешнего оборудования)	181
Обрыв цепи лампы сигнализатора (проверяется с помощью внешнего оборудования)	182
Короткое замыкание на корпус в цепи лампы сигнализатора (проверяется с помощью внешнего оборудования)	183

Диагностика ГАЗ 3110 своими руками

Каждый владелец ГАЗ 31 105 знаком с ситуацией, когда на панели приборов загорается сообщение о неисправности автомобиля — «Чек». В основном это сообщение не дает полной информации о поломке, такая возможность есть только у владельцев автомобилей с продвинутым бортовым компьютером, но даже в этом случае без нормальной диагностики не обойтись. Полную картину о работе систем и датчиков можно получить использование компьютера со специальным программным обеспечением. А для согласования ЭБУ и ПК необходим адаптер. Какой сканер – адаптер подойдет владельцу ГАЗ 31 105? Вопрос достаточно сложный, ведь адаптеров для диагностики выпускается большое количество.

Выбираем адаптер для диагностики ГАЗ 31 105

Прежде чем выбрать и купить адаптер необходимо определиться, для каких целей он вам нужен, есть ли необходимость диагностики других автомобилей или «Волга» ваше единственное транспортное средство, какие работы вы планируете выполнять. От ответа на эти вопросы будет зависеть оправданный выбор, и вы сможете сэкономить средства на приобретение подходящего оборудования.

Современный рынок предлагает самые разнообразные средства для диагностики. Это может быть достаточно примитивны прибор с раздельными соединительными проводами, или сложный диагностический комплекс с массой разъемов и возможностью прямой диагностики датчиков. Но это оборудование для тех, кто профессионально занимается ремонтом.

Нас интересует вариант, который станет «золотой серединой» — не дорогой, но при этом функциональный. Для диагностики ГАЗ 31 105 оптимальный вариант – адаптер VAG-COM 409.1. У этого адаптера есть и другие названия — KKL-USB, KKL 409.1. Независимо от маркировки – это один и тот же сканер.

Почему именно этот адаптер? По нескольким причинам:

• Этот адаптер очень распространенный;

•   Поддерживает большое количество автомобилей

• Для него есть большое количество программного обеспечения, в том числе и бесплатного;

• Стоимость этого устройства небольшая — доступная любому автолюбителю.

Важно и то, что этот сканер поддерживает обмен данных по К-линии, что обеспечивает полноценное согласование ЭБУ Волги и компьютера.

Если вы обратили внимание – на адаптере VAG-COM 409 установлен разъем не такой как на вашем автомобиле. Адаптер предназначен для подключения к стандартному разъему автомобилей группы VAG — OBD2. Проблему подключения можно решить очень просто – купить Переходник ГАЗ (Газель, Соболь, Волга, УАЗ) 12 pin на 16 pin OBD 2.

У вас теперь есть набор оборудования для подключения ПК к системе диагностики автомобиля. Остается выбрать программное обеспечение.

Подключение оборудования для диагностики

Отметим что программы, которые мы описываем, подходят для совместного использования с любым адаптером с К-линией.

Вас, наверное, интересует вопрос, какой нужен компьютер для диагностики. Лучшим вариантом будет ноутбук. Основные требования к нему – наличие разъема USB и операционная система Windows. Программное обеспечение не требовательное к ресурсам и для работы можно использовать даже нетбук.

Преимущества от использования ноутбука – мобильность, возможность оперативной диагностики даже во время движения.

Первое что необходимо сделать – это подключить адаптер к компьютеру. Дальше необходимо установить драйвера для корректной работы диагностического адаптера и выполнить некоторые настройки.

Где взять драйвер? Обычно он есть на диске, который вы получите в комплекте со сканером, да и в интернет его найти не составит труда.

Настройку выполняем, используя следующий алгоритм:

1. Наводим курсор на иконку «мой компьютер» и нажимаем правую кнопу мыши, в меню выбираем пункт свойства. Открывается окно «свойства системы». Переходим на вкладку — «оборудование»;

2. В открывшемся окне выбираем «диспетчер устройств»;

3. В списке выбираем пункт «Порты (COM и LPT)»;

4. Если драйвер установился корректно, то мы увидим виртуальный COM-порт. Теперь ему необходимо присвоить номер;

5. Наводим курсор на порт и используем правую кнопку мыши, в меню выбираем «свойства»;

6. В окне переходим на вкладку «Параметры порта» и жмем кнопку «дополнительно»;

7. В новом окне назначаем номер порта, для нашего устройства необходимо выбрать порт COM1.

8. Сохраняем настройку – жмем кнопу «ОК».

Следующий этап подключение адаптера к сервисному разъему автомобиля.

Где находится разъем для диагностики на автомобиле ГАЗ.

Расположение интерфейса для подключения к ЭБУ на ГАЗ 31105, ЗМЗ 406 может находиться в одном из двух мест:

• В подкапотном пространстве, на перегородке рядом с бачком омывателя;

• В салоне под торпедой, около блока предохранителей.

Выполняем подключение адаптера. В отличие от многих автомобилей на диагностическом разъеме «Волги» присутствует напряжение даже при отключенном зажигании. После того как вы подключите адаптер, зажжется индикатор питания.

Подготовительная работа для диагностике почти закончена. Можно установить софтдля диагностики на ваш ПК.

Какое ПО можно использовать для диагностики автомобилей ГАЗ

Для диагностики можно воспользоваться программным обеспечением, которое есть на диске входящем в комплект адаптера:

Заключение.

Следует понимать, что диагностика – это то средство, которое поможет выявить причины неисправностей, но не служит лекарством. Зато получив доступ к контролю работы ЭБУ автомобиля, у вас появляется возможность контролировать работу систем автомобиля, собирать статистику и своевременно реагировать на изменения в работе своего автомобиля, выявлять «виновников» нарушений работы систем.

Диагностика системы управления зажиганием и двигателя а/м «Газель» |

Автомобили марки «Газель» самый популярный и доступный в России грузовик, предназначенный для перевозки небольших грузов. Так как количество таких автомобилей становится все большим и большим, нам стоит рассмотреть некоторые нюансы различных систем «Газели», например микропроцессорной системы зажигания, которая устанавливается на 406 модификацию. В данном случае мы рассмотрим диагностику автомобиля, хозяин которого жалуется на рывки, хлопки и потерю мощности.

Проверке подвернутся система питания, двигатель и зажигание. С помощью газового анализатора был проверен карбюратор, но не в работе первой и второй камер, отсечке, холостом ходе, а также обогащении на холостом режиме неполадок не было обнаружено. Далее двигатель. Проверка компрессии не выявила нарушений, показатели 9,6 кг/см² для 406 двигателя совпали с нормой, однако небольшое отклонение на 10% было выявлено при повторной проверке, поэтому при очередной проверке подверглись фазы газораспределения. Оказалось, что хлопки и рывки были следствием того, что на два зуба перескочила верхняя цепь.

%rtb-4%

Система газораспределения.

В 406й модификации, двигатель выглядит следующим образом: на каждый из двух выпускных и двух впускных цилиндров установлено по четыре клапана, правым распределительным валом (вид спереди) приводятся в действие выпускные, а левым — впускные. Гидрокомпенсаторы зазоров привода клапанов от кулачков распределительных валов позволяют не заниматься обслуживанием и регулировкой. Распределительные валы приводятся в движение от коленчатого вала двумя втулочными цепями.

Вид правильной сборки в ВМТ такта сжатия при положении поршня первого цилиндра привода распредвалов:

1. Выступ на крышке цепи (М1) должен совпадать с риской на звездочке коленчатого вала (2), горизонтально расположенные метки (9) на звездочках распредвалов (10, 12) должны совпасть с верхней плоскостью головки цилиндров.

2. Установочная метка (М2) на блоке цилиндров должна соответствовать риске на звездочке промежуточного вала.

Центр двадцатого зуба синхронизационного диска (3) должен находиться при данном положении валов строго напротив центра сердечника датчика положения коленвала (4). Синхронизационный диск (1) — это зубчатое колесо, на котором на расстоянии 6 градусов друг от друга расположены впадины в количестве 58 штук, две из которых отсутствуют для синхронизации. Две пропущенные впадины являются местом начала отсчета номеров зубов (15), причем нумерация идет в направлении обратного хода часовой стрелки. Однако регулировка системы газораспределения не привела к возврату былой мощности двигателя.

Теперь возьмемся за диагностику системы зажигания. Управление клапаном экономайзера принудительно холостого хода в шестнадцатиклапанном карбюраторном двигателе ЗМЗ — 4063 и зажиганием обеспечивается микропроцессорной системой МИКАС 5.4. Данная система, позволяющая в зависимости от условий эксплуатации и работы двигателя реализовать максимально оптимальный УОЗ, она состоит из проводов с соединителями, блока управления, комплекта исполнительных узлов и датчиков. Высокие удельные показания двигателя без опасения случаев калильного зажигания и детонации, обеспечены за счет эффективной идентификации блока управления детонационного сгорания каждого из цилиндров и датчика детонации. При повреждении датчиков, блоком мгновенно реализуется режим аварийного управления. Датчик положения коленвала — исключение, так как функционирование двигателя без него невозможно.

Электронный блок управления (ЭБУ) Микас 5.4

На моторном щите а/м установлен ДАД — датчик абсолютного воздушного давления на впускном трубопроводе (модель 0261230004 фирмы Бош), и соединен с задроссельным пространством во впускном трубопроводе двигателя. Количество воздуха, которое поступает в цилиндры двигателя, вычисляется блоком управления по измеренному значению. Этот датчик выглядит как электронное выносное интегральное устройство с рабочей камерой из кремния и специального порошка, которая имеет внутри образцовое давление. Проводимость чувствительных полупроводниковых элементов, расположенных внутри рабочей камеры меняется в прямой зависимости от ее механического расположения. Питание датчика обеспечивается стабилизированным напряжением в 5 В, а выходное напряжение величиной 0,4….4,65 В и линейно зависит от измеряемого давления, составляющего от 0,2 до 1,05 атмосфер и подключается с помощью трехконтактной вилки к жгуту проводов. Изменение баланса тензомоста вызывается смещением мембраны (т.е. рабочей камеры), поскольку резисторы включаются по мостовой схеме. Электронная схема обработки сигнала, размещенная на одной плате с чувствительным элементом, связана с этими резисторами.

Датчик абсолютного давления (ДАД)

Чтобы определить температуру двигателя, автомобиль оснащается ДТохл (датчиком температуры охлаждающей жидкости) моделей 19.328, либо 40.5226, произведенными в России. Блок управляет клапаном экономайзера принудительно-холостого хода и также корректирует (УОЗ) в соответствии с измеренным температурным значением. Система управления состоит из катушки зажигания, электромагнитного клапана экономайзера принудительно-холостого хода и датчика детонации. ДТохл, установленный на внешней оболочке термостата системы охлаждения при помощи двухконтактного соединителя подключен к жгуту.

Датчик температуры охлаждающей жидкости (ДTохл)

Напротив венца зубчатого диска шкива коленвала в приливе крышки цепи механизма распределения газа, установлен, индукционного типа датчик положения коленвала (ДПКВ) модели 23.3847 пр-ва России, либо модели 0261210113 немецкой фирмы Бош, который соединяется гибким кабелем с трехконтактной электровилкой. Данный датчик имеет вид катушки с магнитным сердечником, с сопротивлением обмотки равном от 880 до 900 Ом. Чтобы обеспечить оптимальную работу системы управления, необходим зазор между зубьями диска и датчиком размером от 0,5 до 1 миллиметра. Для того чтобы избежать повреждения кабеля датчика вращающимися деталями генератора или двигателя, он должен быть закреплен максимально надежно, поскольку неисправность работы ДПКВ приводит к остановке работы двигателя.

%rtb-4%

Принципы работы.

С помощью сигнала датчика положения коленвала блок управления осуществляет вычисление частоты вращения, а определение величины циклового наполнения воздухом каждого из четырех цилиндров двигателя происходит за счет измерения абсолютного давления. Угол значения опережения зажигания, которые зависят от циклового наполнения и частоты вращения, и соответствующие частоте работы двигателя, хранятся в запоминающем устройстве блока. Данные угловые значения имеют дополнительную корректировку, зависящую от температуры охлаждающей жидкости. Обеспечение хороших тяговых свойств в данных условиях достигается увеличением угловых значений опережения зажигания в холодном двигателе. Также при обнаружении детонационного возгорания, обусловленного некоторыми факторами, например изменениями условий окружающей среды или применением низкооктанового топлива, блок управления скорректирует УОЗ. При повреждении датчиков абсолютного давления или температуры внешней среды блок управления активизирует аварийные программы и включает лампы диагностики. Снижение мощности, ухудшение динамических свойств, увеличение расхода топлива — все это результаты эксплуатации двигателя автомобиля с данными неисправностями. К тому же, кроме управления зажиганием в функции блока входит управление электромагнитным клапаном экономайзера принудительно — холостого хода, что при торможении а/м двигателем обеспечивает отключение топливной подачи. Значение вращений коленвала для отключения подачи топлива — 1860 оборотов в минуту, а для возобновления подачи — 1560 оборотов в минуту.

Общие рекомендации при потере мощности а/м «Газель».

Во-первых, необходимо проверить работу диагностической цепи и бортовую систему диагностики, поскольку при активации режима отображения хода должен выдаваться код неисправности 12. Для начала считывания кодов должны быть замкнуты десятый и двенадцатый контакты диагностической колодки.

Во-вторых, с помощью диагностического тестера произвести замеры параметров датчиков двигателя для сравнения их с типовыми значениями, установленными для «среднего» двигателя.

При условии наличия у мастера определенного опыта и точных параметров сигналов в вольтах для измерений может быть достаточно обычного осциллографа и мультиметра, но все же при наличии диагностического тестера будет возможным задать поправку УОЗ и проверить исполнительные устройства.

Двигатель ЗМЗ 406

Проверка тестируемой «Газели» на абсолютное давление выдала значение в 50 мбар при норме в 400-480, а повышение оборотов не вызвало повышения давления и его показания практически не изменялись.

Измерив, все показания, и протестировав все, что могло привести к тем жалобам, предъявленным хозяином «Газели», была установлена причина «недомогания» автомобиля, которая оказалась довольно таки банальной — трубка, соединяющая датчик давления и впускной коллектор была загрязнена. Неисправность была устранена, и автомобиль вернулся к хозяину почти в том же состоянии, что и при сходе с конвейера.

Однако на диагностику автомобиля может уходить гораздо больше времени, иногда даже целый день, поскольку неисправности могут быть не только фиксированными, но и «плавающими».

Диагностика и капитальный ремонт двигателя ЗМЗ 406

Для пассажирских и грузовых перевозок широко используются автомобили ГАЗ. Они оснащаются 406 двигателем, который выпускается в трех вариантах. Два из них принадлежат к карбюраторному типу, один ― к инжекторному. Причем, последний тип устанавливается в микроавтобусы и в обычные легковые модели.

Основные достоинства этого агрегата ― высокая мощность и экономичное потребление. Водители отметили его надежность, но во время эксплуатации для него необходимо полноценное обслуживание. Вполне может потребоваться ремонт 406 двигателя в случае возникновения неисправностей.

Среди недостатков этой модели ― придирчивость к свечам и к качеству масла. Во время проектирования инженеры не смогли создать эффективную систему охлаждения. Нередко вентилятор радиатора выходит из строя, в результате возникает перегрев.

Но существует и ряд преимуществ. Инжекторная модификация имеет большую мощность и крутящий момент. За счет этого улучшается динамика, автомобиль уверенно чувствует себя на дороге, легко преодолевает резкие подъемы.

Ремонт 406 двигателя от профессионалов

Ремонт 406 двигателя в любом случае потребуется через определенное время. Для этого необходимо диагностическое оборудование, многое зависит от опыта специалистов. Поэтому процесс восстановления можно доверить только профессионалам, которые давно трудятся в этой сфере.

В нашем сервисе мастера готовы выполнить ремонт двигателя 406. Они проведут осмотр агрегата, определят причину неисправности. Будут подобраны требующиеся детали для этой модели, они широко доступны в нашей стране. Все работы проводятся в максимально короткие сроки, специалисты справятся с любыми поломками. Вы сможете продолжить эксплуатацию автомобиля, при правильном обслуживании агрегат прослужит в течение еще многих лет!

Диагностика 406 двигателя

Для комплексной диагностики двигателя 406 вам потребуется специальное ПО, адаптер и подключенный к машине ноутбук. Такая возможность есть не всегда, времени уходит немало. Доверьте данную задачу специалистам СТО «Лакон» – и вы узнаете точную причину поломки в рекордно короткие сроки.

Ремонт головки блока цилиндров 406 на Газели

Неисправность головки блока цилиндров – распространенная проблема многих автомобилей ГАЗ. Отремонтировать головку – не колесо поменять, необходим комплексный ремонт, аккуратная разборка и сборка механизмов. Обратившись к сотрудникам СТО «Лакон», вы можете рассчитывать на квалифицированную помощь и качественный ремонт этой и любых других поломок.

Выполняем все виды работ. Обращайтесь!

ЗМЗ 406 технические характеристики жидкости. Моторы с разными символами

Марка автомобилей ГАЗ известна во всем мире. В последние десятилетия двигатель 406 Заволжского моторного завода устанавливается в качестве силовой установки на основную продукцию этого автомобильного гиганта. Конструкция этого силового агрегата совершенствовалась в течение нескольких лет. Фундамент был заложен в конце прошлого века, именно тогда была сформулирована основная концепция ЗМЗ 406.Сегодня это перспективный силовой агрегат, способный развивать мощность до 150 литров. с участием. (110 кВт).

Технические характеристики двигателя ЗМЗ-406

ПАРАМЕТР	ЗНАЧЕНИЕ
Тип конфигурации	рядный
Объем, м куб. М	2,28
Диаметр цилиндра, мм	92
Количество цилиндров	4
Клапаны на цилиндр	4
Ход поршня, мм	86
Материал блока цилиндров	чугун
Степень сжатия, атмосферы	9.3
Материал головки блока цилиндров	алюминий
Топливная система	инжектор или карбюратор
Блок управления	Mikas
Вид топлива	Бензин
Система смазки	комбинированная, с автоматом. контроль температуры
Мощность, л.с. / об / мин	145/5200
Крутящий момент, Нм / об / мин	200,9 / 4500
Топливо	92
Экологические стандарты	Euro 3
Расход топлива на 100 км, л
— город	13.5
— колея	—
— смешанный	—
Расход масла на 1000 км, г	до 100
Масса, кг	192

Четырехцилиндровый рядный двигатель выполнен по классической схеме, характерной для силовых установок Заволжского моторного завода, так можно запустить характеристику двигателя 406. Рабочий объем 2.28 литров.

В камере сгорания установлена ​​свеча зажигания, расположенная по центру. Ремень ГРМ ЗМЗ 406 выполнен достаточно оригинально, что позволило компактно расположить основные элементы системы питания.

Частота вращения коленчатого вала на максимальной мощности составляет 5200 об / мин, а максимальный крутящий момент наблюдается при значительно более низких оборотах, что составляет 4000 об / мин. в мин. Двигатель поддерживает минимальные обороты в районе 750-800 об / мин 406 на холостом ходу.

Конструктивные особенности двигателя 406 производства ЗМЗ

За прототип для проекта был взят двигатель от спорткара Saab-900.Первые бензиновые двигатели ЗМЗ-406 появились в начале восьмидесятых годов прошлого века.

ЗМЗ-406 имеет некоторые особенности:

1. Блок отлит из чугуна. Он, конечно, тяжелее алюминия, но использование этого металла избавляет от необходимости заменять гильзы (цилиндры). В связи с этим увеличилась жесткость конструкции.
2. В верхней части расположены две цепи ГРМ ЗМЗ 406 (газораспределительные валы впускно-выпускной системы). Каждый из валов отвечает либо за прием свежего заряда рабочей смеси, либо за выход выхлопных газов.
3. В головке каждого цилиндра четыре клапана. То есть на весь четырехцилиндровый двигатель установлено шестнадцать клапанов. Это количество увеличивает эффективность продувки цилиндров при отводе отработавших газов и увеличивает степень заполнения цилиндров свежей рабочей смесью.
4. На данном силовом агрегате впервые применена особая инновация — гидравлический натяжитель цепи. Это позволяло поддерживать оптимальное натяжение в приводе ГРМ ЗМЗ 406.Это техническое решение затем было повторено в десятках других конструкций. А вот ремень ГРМ ЗМЗ 406 был первенцем в отечественном двигателестроении, где и применялся.
5. Для этого двигателя были продуманы варианты уменьшения хода поршня, который составляет всего 86 мм, при диаметре цилиндра 92 мм. Такой подход увеличил степень сжатия до 9,3. Это очень высокая стоимость. Но теоретически утверждается, что с увеличением степени сжатия растет и КПД силовой установки.Короткий ход поршня способствует лучшему наполнению.
6. ЗМЗ 406 решался по традиционной схеме. Подача теплоносителя насосом ЗМЗ 406 через блок, головку блока и радиатор.
7. Еще есть особенность — используется плоский поликлиновой ремень, исключающий возможность неожиданного обрыва.
8. Термостат ЗМЗ 406 позволяет организовать циркуляцию по малому кругу в период прогрева двигателя, а при достижении температуры прогрева термостат открывается, пропуская охлаждающую жидкость по большому кругу.
9. Шкив коленвала ЗМЗ 406 передает крутящий момент на вал насоса ЗМЗ 406, который подает охлаждающую жидкость в печку автомобиля, поддерживая оптимальный микроклимат в кабине в холодное время года.
10. Датчик температуры охлаждающей жидкости помогает водителю постоянно следить за температурой.
11. Двигатель 406 также имеет систему смазки. Шестеренчатый насос перемещает моторное масло из масляного поддона, подается под давлением для очистки, при этом загрязнения размером более 40 микрон удаляются в масляном фильтре ЗМЗ 406.Очищенное масло принудительно подается в каналы коленчатого вала ЗМЗ 406, перемещаясь внутри коренной и шатунной шейки, обеспечивая стабильную смазку в этих узлах, испытывающих огромные знакопеременные нагрузки. Часть масла движется дальше под давлением, смазывая поршневой палец. Тогда масло тоже попадает на поверхность поршня. Поршень взаимодействует с зеркалом цилиндра двигателя ЗМЗ 406 посредством масляной пленки, образующейся в зоне контакта.

Разница между топливной системой впрыска и карбюратора

В течение первого десятилетия выпуска ЗМЗ 406 карбюраторный двигатель отвечал за приготовление рабочей смеси.Сейчас производится инжекторная модификация этого мотора.

Использование инжектора облегчило запуск, улучшило реакцию дроссельной заслонки и снизило расход топлива. В чем тут причина?

Из теории двигателей внутреннего сгорания известно, что увеличение производительности карбюратора зависит от частоты вращения коленчатого вала. Расход горючей смеси увеличивается по мере роста этого показателя. Резкое нажатие на педаль акселератора приводит к тому, что относительное содержание паров бензина в карбюраторе ЗМЗ 406 увеличивается.Коэффициент избытка воздуха немного снижается, что приводит к увеличению крутящего момента и увеличению частоты вращения коленчатого вала.

Форсунка двигателя ЗМЗ 406 работает немного иначе. Тут помогает микропроцессор, который четко реагирует на положение педали управления. Если необходимо увеличить скорость и слегка нажать на педаль, в цилиндр впрыскивается больше топлива. Временной интервал между нагрузкой и ее коррекцией в любом инжекторном двигателе сокращается в несколько раз.Это увеличивает реакцию дроссельной заслонки, улучшает динамику Газели или Волги (в зависимости от того, на какой машине установлен инжектор ЗМЗ 406).

Основная причина высокой производительности системы впрыска по сравнению с карбюраторной системой — отсутствие жиклеров, которые регулярно забиваются.

Это привело к необходимости периодической продувки, а часто и механической очистки отверстий малого диаметра. Конечно, если в дороге выйдет из строя система впрыска, то не каждый водитель сможет исправить это самостоятельно.

Тюнинг двигателя

Тюнинг ЗМЗ 406 — способ изменить выход. Многие водители ищут способы улучшить характеристики своих автомобилей.

Кого-то не устраивает имеющаяся мощность, кого-то смущает прожорливость мотора, третьи просто хотят отличиться, выбирая тот или иной вариант, который они хотят оптимизировать.

Первым делом специалисты по силовой установке увеличивают мощность:

1. Можно просто растачивать цилиндр и использовать поршни большего размера.Но такой путь чреват снижением прочности блока.
2. Чаще идут другим путем — форсируют, увеличивая подачу воздуха с помощью турбин с механическим приводом или с помощью турбонаддува.

Первый способ проще, но следует учитывать, что требуется создать механизм с большим передаточным числом — частота вращения турбины находится на уровне 10-15 тысяч оборотов в минуту. Такой привод, нагнетающий двигатель, создающий тюнинг ЗМЗ 406, выполнить сложно.Чаще идут по пути использования турбокомпрессора.

Турбокомпрессор для работы использует энергию выхлопных газов. ЗМЗ 406 турбо, на выхлопной части установлен вход газа в систему турбонаддува. На одном валу с турбиной находится также компрессор, нагнетающий чистый заряд воздуха в цилиндры двигателя ЗМЗ 406. Начинка растет. Циклическая подача топлива пропорционально увеличивается, что приводит к увеличению количества рабочей смеси в цилиндре, и, соответственно, увеличивается и давление газа, что приводит к увеличению крутящего момента.Далее емкость тоже растет.

В теории двигателей внутреннего сгорания утверждается, что увеличение мощности при турбонаддуве сопровождается уменьшением удельного расхода топлива. Тюнинг ЗМЗ 406 таким образом позволяет улучшить не только динамику автомобиля, но и повысить его экономичность.

В восьмидесятых годах прошлого века проработано еще одно направление наддува — это динамический наддув, суть которого заключалась в подборе параметров системы впуска таким образом, чтобы частота пульсаций воздушного потока на впуске соответствовала резонансная частота самой системы.

Предложены математические модели для расчета оптимальных диаметров и длин всасывающей системы. Ряд специалистов также установили механические резонаторы, которые через специальные мембраны передавали импульсы от выхлопной системы к впускной. Такой способ позволяет не менять двигатель 406 кардинально, но при этом добиться увеличения мощности и снижения удельного расхода топлива.

Двигатель ЗМЗ 406 можно доработать и попроще.Достаточно отшлифовать впускной и выпускной патрубки в топливной системе. Такая оптимизация в сочетании с двигателем ГАЗель 406 позволяет добиться улучшения динамики. Комбинация ЗМЗ 406 на УАЗе с полированными швеллерами приятно удивит пользователя, машина будет приятно напоминать энергоемкую легковую машину.

Популярные ошибки автомобилистов

Погоня за прибавкой мощности у некоторых автолюбителей сводится только к переделке двигателя ЗМЗ 406.Но не все переделки хороши. А некоторые вредны, это реверсивный тюнинг или анти-тюнинг:

1. В Интернете ходят слухи, что можно увеличить мощность двигателя за счет уменьшения веса маховика. При этом авторы подчеркивают, что маховик забирает мощность и увеличивает вес двигателя. Фактически, маховик накапливает энергию, которую этот двигатель получает в цикле «рабочего хода» для остальных циклов четырехтактного двигателя. С увеличением количества цилиндров относительная масса маховика уменьшается, но это связано с изменением количества ходов на один оборот коленчатого вала, так как в работу вовлекается больше поршней.В идеале, если довести количество рабочих цилиндров до бесконечности, то маховик вообще не понадобится.
2. Есть специалисты, которые рекомендуют устанавливать в систему забора воздуха завихрители. Но такие специалисты не понимают, что при движении воздушного потока наблюдается турбулентный режим течения. Турбулентность, по определению, — это движение с вихревым потоком, как доказал Бернулли более 150 лет назад. Чрезмерные помехи только уменьшат количество воздушного заряда и уменьшат мощность, что повлияет на эффективность двигателя.
3. В последнее время появились идеи прогреть воздух на впуске — мол двигатель 406 прибавит мощности инжектору. Но это не так. Плотность заряда воздуха уменьшается при нагревании и постоянном давлении. Следовательно, уменьшается и его общее количество. А это приводит к тому, что при горении смеси давление падает, мощность падает вместо роста.
4. Есть и авторы, которые уже более сорока лет повторяют, что инжектор нужно подавать каплями воды во впускной тракт ЗМЗ 406.Но помните, что дизайнеры ищут способы разделить топливо и воду, чтобы сделать процесс сгорания более интенсивным. Вода, попадающая в цилиндр при высокой температуре, начнет вызывать сильную коррозию. При сжигании топлива выхлопные газы содержат окись углерода и водяной пар. Те, кто давно пользуется моторами, знают, что к двигателю ЗМЗ 406 не нужно использовать способы, ухудшающие его надежность.
5. Также была группа «экспертов», которые рекомендовали оптимизировать двигатель, заменив гидравлический натяжитель цепи.Они ратуют за установку электрического натяжителя, а схему порочного устройства у них нужно выкупать за большие деньги. Платить за разрушение электростанции уже абсурдно.

Поэтому, прислушиваясь к советам разных специалистов, следует помнить, что дизайнеры разбираются в своем деле не намного лучше обычных людей. Не зря отказываются от многих идей, которые загубят двигатель.

На каких машинах используется двигатель ЗМЗ-406

Современный двигатель Заволжского моторного завода 406-й модели устанавливается на легковые автомобили ГАЗ-3110 Волга и 3302 грузовые автомобили.

Моторный и автомобильный заводы Нижегородской области постоянно проводят мониторинг своей продукции, собирают информацию о работе выпускаемого оборудования.

Конечно, иногда возникают определенные конфликтные ситуации.

Связаны с тем, что водители обращаются с вопросами:

• троит двигатель Газель;
• метки синхронизации не видны;
• форсунок вышли из строя;
• выходит из строя помпа;
• поршень ЗМЗ;
• негерметичен масляный фильтр;
• термостат нестабилен;
• основные технические характеристики и др. Не сохранены.

Производители всегда стараются оказать помощь через свои сервисные центры, которые разбросаны по всей России и СНГ.

Автомобиль сложно назвать предметом первой необходимости в жизни человека, но это самый распространенный вид транспорта. А без чего люди не могут жить? Без сердца. Этот кузов автомобиля можно назвать силовым агрегатом.

Что это такое? Автомобильный двигатель — это устройство, способное преобразовывать один вид энергии в другой. Именно благодаря этому осуществляется движение любого транспортного средства.

Как правило, на станке устанавливается поршневой станок. Он делится на два типа: карбюраторный и инжекторный. От этого фактора напрямую зависят технические характеристики двигателя. Все агрегаты (в зависимости от типа) работают на разных видах топлива. К ним относятся бензин, сжатый природный газ или сжиженный углеводород, дизельное топливо, более известное как дизельное топливо.

ЗМЗ-406

Кто может поспорить с тем, что большая часть перевозок осуществляется автомобилями ГАЗ? Чаще всего устанавливаются «Газели».Силовой агрегат карбюратора выпускается в двух модификациях. Инъекция — только в одном. Какие преимущества у этого двигателя? Он потребляет мало топлива при своей высокой мощности. А также агрегат прослужит достаточно долго, но только при правильном уходе. Из минусов особенно остро стоит то, что двигатель подвержен качеству моторного масла. Если он уже работает на определенном типе, то лучше не слишком экспериментировать. Возникает проблема остановки работы вентилятора, приводящей к перегреву.Система, которая должна регулировать температуру, немного нестабильна. А поскольку перегрев может привести к взрыву, за этим следует внимательно следить. Данная модель двигателя выпускается с 1996 года и по сей день известна как прочный и надежный агрегат.

Характеристика

Стоит отметить, что данный агрегат по некоторым критериям обходит двигатель предыдущей 402-й серии. Силовая установка 406 работает на 4-х поршнях. Его мощность составляет 110 «лошадей». Точно сказать о перегреве этого двигателя сложно, потому что одни водители заявляют о постоянном повышении температуры, а другие говорят, что система охлаждения лишняя — агрегат не нагревается.

Если вы хотите перевести свой двигатель 406 (карбюраторный или инжекторный) на газовое оборудование, то следует отметить, что он «хорошо уживается» с пропаном и метаном.

С расходом топлива выделить момент сложно — он напрямую зависит от условий движения и времени года. По заявленным производителем характеристикам расход в среднем составляет 13,5 л на 100 км. Объем двигателя 2,28 л.

Во внешней среде следует отметить компактное расположение всех элементов.Особенностью станет расположение свечи зажигания — по центру. Максимальная мощность вращения коленчатого вала — 5200 об / мин.

История создания ЗМЗ-406

Данная модель двигателя разработана на базе спортивного агрегата Saab 900. Завершение проекта на бумаге — 1990 год. А спустя три года появились первые прототипы этого двигателя. Производство средней серии было запущено в 1996 году, но с главного конвейера она начала сходить уже в 1997 году.Окончание производства — 2003 год.

Сначала двигатель 406 (карбюраторный) устанавливался на небольшие лодки, которые использовались государственными структурами. Чуть позже им заинтересовались сотрудники Горьковского завода, и со временем его приобрели Волга и Газель. Спустя какое-то время его стали включать в базовый набор «Соболя». Производители ЗМЗ и ГАЗ разрешили установку «неродных» двигателей на многие модели автомобилей по собственному желанию, поэтому агрегат 406 можно увидеть и на некоторых Волгах, в состав которых этот агрегат не входил.

Конструкция и особенности

Двигатель 406 (карбюраторный) работает на бензине. Имеет 16 клапанов и 4 поршня. Впрыск регулируется встроенной электронной системой.

При создании этого силового агрегата производитель решил выделить его и добавить функции. Это можно считать расположением валов вверху блока цилиндров. Свечи зажигания отцентрированы. За счет использования новой системы впрыска и камеры сгорания компрессия увеличена до 9.3. Также заменили систему питания карбюраторного типа.

Из-за некоторых манипуляций уменьшено. Однако ходили слухи, что мощность одной модели автомобиля Волга (на ней был установлен двигатель 406) была намеренно и искусственно завышена.

Отличие инжектора от карбюратора

Долгое время выпускались только карбюраторные модели. Со временем появились инъекционные. Благодаря этому удалось добиться некоторых характеристик, например, снизить количество потребляемого топлива.Если следовать теории ДВС, то карбюраторный двигатель Газель 406 начинает работать мощнее с соответствующим увеличением уровня вращения коленчатого вала. Как этого добиться? Механизм выполнен таким образом, что при резком нажатии на педаль количество паров бензина увеличивается. Это, в свою очередь, способствует увеличению частоты вращения коленчатого вала.

406 (ГАЗ использовал часто) работает с микропроцессором. Благодаря ему даже при легком нажатии на педаль улучшится динамика езды на автомобиле.

Настройка двигателя

Для того, чтобы немного изменить мощность двигателя, можно провести настройку, чтобы улучшить производительность. Некоторым не нравится низкая мощность, другим не нравится количество потребляемого топлива, а иногда водитель хочет выделиться среди других, оптимизируя определенные характеристики.

Первое, что можно сделать в мастерской — это улучшить двигатель 406 (карбюратор) по мощности. Как правило, в этом случае либо повышаются технические характеристики агрегата за счет увеличения поршней, либо (либо отдельно турбины).Второй способ будет более надежным, но первый потребует гораздо меньше усилий, денег и времени.

Для улучшения общей динамики достаточно отполировать входные и выходные каналы.

Ошибки водителя

Из-за вечного желания улучшить свой агрегат многие слишком стараются и в итоге просто заглушают двигатель. Какие ошибки нельзя допускать при работе с силовым аппаратом серии 406? Двигатель, цена которого колеблется в пределах 100 тысяч рублей, лучше лишний раз не оптимизировать.

Не прислушивайтесь к советам неопытных водителей, которые предлагают уменьшить вес маховика. Это приведет только к ненужным проблемам, а не к увеличению мощности. Завихрители воздуха излишни. Нет необходимости слушать специалистов, которые предлагают их установить. Если их использовать, то мощность будет пропорционально уменьшена. Скорость автомобиля не увеличивается при нагревании всасываемого воздуха. Надежность двигателя снизится, если во впускной тракт каплями добавлять воду.Конструкторы наоборот стараются максимально отделить жидкость от топлива, ведь, попадая в нее, она способствует возникновению коррозии. Некоторые рекомендуют установить электрический натяжитель, чтобы изменить характеристики двигателя. Однако это не только стоит больших денег, но и полностью убивает силовой агрегат. И это еще не все (но самые частые) ошибки водителей.

Использование в автомобилях

Теперь этот двигатель можно устанавливать на любую модель «Газели» и «Волги».Причем официально он есть на некоторых легковых и грузовых автомобилях. Однако из-за того, что многие склонны использовать его на других моделях, могут возникнуть небольшие проблемы. Как правило, это приводит к быстрой поломке помпы или просто перестают работать форсунки, запускается масло или течет. Могут возникнуть проблемы с производительностью. В этом случае нужно обратиться на СТО. Если проблема еще серьезнее, то в специализированные центры завода. Они разбросаны по России и некоторым странам СНГ. Двигатель 406 (тоже помогает исправить проблемы ГАЗ, причем не хуже ЗМЗ) настолько популярен, что качественный ремонт больших проблем не доставит.Эти манипуляции не займут много времени, а главное, не потребуют глобальных финансовых затрат.

Автомобили ГАЗель

комплектуются двигателями ЮМЗ и ЗМЗ, однако в последние годы наибольшее предпочтение отдается силовым агрегатам серии ЗМЗ-406. Одним из самых современных двигателей этой линейки является ЗМЗ-40630А — его конструкция, характеристики, особенности и обслуживание описаны в статье.

Общий вид двигателя ЗМЗ-40630А

Линейка двигателей ЗМЗ-406 производится Заволжским моторным заводом с 1997 года, за это время силовой агрегат получил наибольшее распространение (выпущено более полутора миллионов единиц), известность и популярность среди автолюбителей.Нынешние модификации двигателей далеко ушли от оригинального двигателя 406, они обладают отличными характеристиками, высокой надежностью и качеством, благодаря чему завоевали значительную долю рынка.

ЗМЗ-40630А — одна из последних модификаций двигателя с улучшенными характеристиками. Это карбюраторный четырехцилиндровый рядный двигатель рабочим объемом 2,3 л и мощностью 98 л.с., разработанный для использования бензина А-92 (АИ-93). Газораспределительный механизм мотора — двухвальный 16-клапанный, оба вала расположены в верхней части ГБЦ.Мотор оснащен современной микропроцессорной системой зажигания. Силовой агрегат комплектуется карбюратором К-151Д, пришедшим на смену ранним Солексам.

Характеристики двигателя ЗМЗ-406

Производство	ЗМЗ
Марка двигателя	ЗМЗ-406
Годы выпуска	1997-2008 гг.
Материал блока цилиндров	чугун
Система снабжения	инжектор / карбюратор
Тип	рядный
Количество цилиндров	4
Клапаны на цилиндр	4
Ход поршня, мм	86
Диаметр цилиндра, мм	92
Степень сжатия	9.3 8 *
Объем двигателя, куб. См	2286
Мощность двигателя, л.с. / об / мин	100/4500 * 110/4500 ** 145/5200
Крутящий момент, Нм / об / мин	177/3500 * 186/3500 ** 201/4000
Топливо	92 76 *
Экологические стандарты	Евро 3
Масса двигателя, кг	185 * 185 ** 187
Расход топлива, л / 100 км — город — трасса — смешанный.	13,5 — —
Расход масла, гр. / 1000 км	до 100
Моторное масло	5W-30 5W-40 10W-30 10W-40 15W-40 20W-40
Сколько масла в двигателе	6
При замене заливка, л	5,4
Произведена замена масла, км	7000
Температура эксплуатации двигателя, град.	~ 90
Ресурс двигателя, тыс. Км — по данным завода — по практике	150 300+
Тюнинг — потенциал — без потери ресурса	600 + до 200
Установлен двигатель	ГАЗ 3102 ГАЗ 31029 ГАЗ 3110 ГАЗ 31105 ГАЗ ГАЗ ГАЗ Соболь

* — для ЗМЗ 4061.10 двигатель
** — для двигателя ЗМЗ 4063.10

Неисправности и ремонт двигателя Волга / Газель ЗМЗ-406

Двигатель ЗМЗ-406 является преемником классического ЗМЗ-402, совершенно нового двигателя (хотя и сделанного с оглядкой на Saab B-234) в новом чугунном блоке с верхним распредвалом, последний теперь имеет двух и, соответственно, 16 клапанного двигателя. На 406-м появились гидроподъемники и возиться с постоянной регулировкой клапана вам не грозит. В приводе ГРМ используется цепь, которая требует замены каждые 100000 км, на самом деле она пробегает более 200 тысяч, а иногда и не дотягивает до 100, поэтому каждые 50 тысяч км нужно контролировать состояние цепи, демпферов и гидронатяжителей. Натяжители, как правило, очень низкого качества.
Несмотря на то, что двигатель простой, без изменения фаз газораспределения и других современных технологий, для ГАЗа это большой прогресс по отношению к двигателю 402.

Модификации двигателя ЗМЗ 406

1. ЗМЗ 4061.10 — двигатель карбюраторный, СЖ 8 на 76 бензин. Используется на Газелях.
2. ЗМЗ 4062.10 — инжекторный. Основная модификация используется на Волгах и Газелях.
3. ЗМЗ 4063.10 — двигатель карбюраторный, СЖ 9.3 на 92 бензин. Используется на Газелях.

Неисправности двигателей ЗМЗ 406

1.Гидравлические натяжители цепи ГРМ. Имеет тенденцию к заклиниванию, в результате чего не обеспечивается отсутствие колебаний, возникает шум цепи с последующим разрушением башмака, подскакиванием цепи и, возможно, даже ее разрушением. В этом случае у ЗМЗ-406 есть преимущество, он не гнет клапан.
2. Перегрев ЗМЗ-406. Распространенная проблема, обычно виной всему термостат и забитый радиатор, проверьте количество охлаждающей жидкости, если все в порядке, то ищите воздушные пробки в системе охлаждения.
3. Большой расход масла. Обычно дело в маслосъемных кольцах и сальниках клапанов. Вторая причина — лабиринтный масляный дефлектор с резиновыми трубками для слива масла, если между клапанной крышкой и лабиринтной пластиной есть зазор, то масло уходит. Крышка снята, замазана герметиком и проблем нет.
4. Провалы тяги, неровные ХХ, это все умирают катушки зажигания. На ЗМЗ-406 это не редкость, поменяйте и моторчик полетит.
5. Стук в двигателе.Обычно гидроподъемники стучат на 406-й и просят замену, проходят около 50 000 км. Если нет, то вариантов очень много, от поршневых пальцев до поршней, втулок шатуна и т.д., покажет вскрытие.
6. Двигатель троит. Посмотрите свечи, катушки, замерьте компрессию.
7. Залежи ЗМЗ 406. Дело, чаще всего, в проводах ВВ, датчика коленвала или РХХ, проверка.

К тому же постоянно глючат датчики, некачественная электроника, есть проблемы с бензонасосом и т. Д.Несмотря на это, ЗМЗ 406 — это гигантский шаг вперед (по сравнению с ЗМЗ-402 устаревшей конструкции), двигатель стал более современным, никуда не ушел ресурс, и по-прежнему при адекватном обслуживании, своевременной замене масла и при спокойной манере езды она может превышать 300 тыс .км.
В 2000 году на базе ЗМЗ-406 был разработан двигатель ЗМЗ-405, а позже появился ЗМЗ-409 объемом 2,7 литра, о нем отдельный.

Волга / Газель тюнинг двигателя ЗМЗ-406

Форсунка ЗМЗ 406

Первый вариант увеличения мощности двигателя по традиции — атмосферный, значит валы будем устанавливать.Начнем с впуска, установим воздухозаборник холодного воздуха, ресивер большего размера, разрежем ГБЦ, доработаем камеры сгорания, увеличим диаметр каналов, приточим, установим соответствующие легкие Т-образные клапана, пружины 21083 (на зло варианты от BMW), валы (например ОКБ двигателя 38/38). Штатный тракторный поршень крутить нет смысла, поэтому покупаем кованые поршни, легкие шатуны, облегченный коленвал, балансируем. Выхлоп на трубе 63 мм, проходной, настраиваем онлайн.Выходная мощность составит примерно 200 л.с., а облик мотора получит ярко выраженный спортивный характер.

ЗМЗ-406 Турбо. Компрессор

Если 200 л.с. для вас детское развлечение и хочется настоящего огня, то дуть — ваш путь. Чтобы мотор нормально выдерживал высокое давление, поставим усиленную кованую поршневую группу под низкий SG ~ 8, в остальном конфигурация аналогична атмосферному варианту. Турбина Garrett 28, коллектор к ней, обвязка, интеркулер, форсунки 630сс, выхлоп 76мм, MAP + DTV, установка в январе.На выходе имеем порядка 300-350 л.с.
Можно поменять форсунки на более эффективные (с 800 куб. См), поставить Garrett 35 и дуть до тех пор, пока двигатель не сломается, чтобы можно было выдуть 400 и более л.с.
По поводу компрессора все аналогично турбонаддува, но вместо турбины, коллекторов, патрубков, интеркулера ставим компрессор (например Eaton M90), настраиваем и едем. Мощность компрессорных вариантов ниже, но мотор безупречный и тянет снизу.

Силовой агрегат семейства ЗМЗ-406 — бензиновый двигатель внутреннего сгорания производства ОАО «Заволжский моторный завод».Разработка началась в 1992 году, а серийное производство двигателя началось в 1997 году. Он был первым, в котором использовалась система впрыска топлива.

Двигатель ЗМЗ-406 получил широкое распространение и устанавливался на автомобили Горьковского завода (ГАЗ-3102, 31029, 3110 и модельный ряд семейства Газель).

Флагманом семейства стал двигатель ЗМЗ-4062.10 объемом 2,28 литра и мощностью 150 «лошадок».

Силовая установка ЗМЗ-4062.10 предназначена для комплектации легковых автомобилей и микроавтобусов.А моторы ЗМЗ-4061.10 и ЗМЗ-4063.10 предназначены для сборки грузовиков малой грузоподъемности.

Описание двигателя

Двигатель был ранее разработан для новомодных систем питания и зажигания, которые управлялись микропроцессором.

Этот двигатель был первым, оснащенным четырьмя клапанами на цилиндр, гидравлическими толкателями и двумя распределительными валами с двойным цепным приводом. Также была установлена ​​электронная система подачи топлива и электронное зажигание.

Четыре цилиндра расположены на одной линии с водяной рубашкой и регулируемым впрыском топлива.

Порядок поршней: 1-3-4-2.

Форсунка

ЗМЗ-406 работает на бензине А-92. Ранее выпускалась карбюраторная версия двигателя 4061, работавшая на 76-м бензине. У нее были ограничения в плане освобождения.

Агрегат неприхотлив в обслуживании. Обладает высокой степенью надежности. Позже на его основе были разработаны установки ЗМЗ-405 и 409, а также дизельный вариант двигателя с маркировкой ЗМЗ-514.

К недостаткам двигателя можно отнести громоздкость привода газораспределительного механизма, что объясняется его низким качеством исполнения и рядом технологических недостатков.

Технические характеристики ЗМЗ-406

Данный силовой агрегат выпускался с 1997 по 2008 год. Картер цилиндров выполнен из чугуна, имеет рядное положение цилиндров. Двигатель весит 187 килограммов. Оборудован карбюраторной системой подачи топлива или инжектором. Ход поршня составляет 86 миллиметров, а диаметр цилиндра — 92 миллиметра. При этом рабочий объем двигателя составляет 2286 кубических сантиметров и способен развивать мощность 177 «лошадей» при 3500 оборотах в минуту.

Карбюраторный мотор

Карбюратор ЗМЗ-406 (402-й двигатель) выпускается с 1996 года и успел зарекомендовать себя как простой и надежный агрегат. Это устройство развивает мощность в 110 лошадиных сил. Расход топлива автомобиля с этим двигателем часто зависит от стиля вождения и условий эксплуатации. Система питания карбюраторного агрегата достаточно надежна. При своевременном обслуживании и нормальной эксплуатации, с использованием качественной смазки и бензина он может без серьезных повреждений проехать до 500 тысяч километров.Конечно, за исключением расточки коленвала, которая нужна этому агрегату каждые 250 тысяч километров.

Система зажигания

На двигателях ЗМЗ-406 зажигание осуществляется путем воспламенения топливной смеси с помощью микропроцессорной системы. Для всех режимов работы двигателя электроника устанавливает необходимый угол опережения зажигания. Также он выполняет функцию регулировки рабочего процесса экономайзера принудительного холостого хода. За счет работы данной системы двигатель отличается высокими экономическими показателями, контролируется уровень токсичности выхлопных газов, исключается момент детонации и увеличивается мощность силового агрегата.В среднем автомобиль ГАЗель при средних нагрузках потребляет около 8-10 литров бензина на 100 км пути. Однако если преобразовать его в пропан или метан, «аппетит» автомобиля увеличится почти вдвое.

Режим диагностики зажигания

При включении зажигания автомобиля автоматически начинает работать система диагностики двигателя ЗМЗ-406 (карбюратор ЗМЗ-405 не исключение). О правильной работе электроники сигнализирует световой датчик. Он должен погаснуть при запуске двигателя.

В том случае, если диод продолжает светиться, это свидетельствует о неисправности элементов и узлов электронной системы зажигания. В этом случае повреждение следует немедленно устранить.

Инжекторный мотор

По техническим характеристикам и комплектующим двигатель с инжекторной системой питания мало чем отличается от карбюраторного аналога 405-й модели.

При правильной эксплуатации этот агрегат не менее надежен и практичен, чем с карбюратором, а кроме того имеет свои преимущества:

• Стабильные холостые обороты.
• Низкий уровень вредных выбросов в атмосферу.
• КПД инжектора ЗМЗ-406 намного выше, аналог с карбюратором не хочу, так как топливная смесь подается своевременно и в нужном количестве. Соответственно экономия топлива налицо.
• Повышение экономии топлива.
• Не требует длительного прогрева двигателя зимой.

Единственный недостаток инжекторного мотора — дороговизна ремонта и обслуживания системы.

Проведение диагностических и ремонтных работ без специального оборудования и диагностических стендов невозможно. Поэтому провести самостоятельный ремонт инжекторного двигателя ЗМЗ-406 — дело довольно хлопотное. Часто при поломке системы впрыска автомобилисту приходится прибегать к услугам специализированных центров по обслуживанию топливной аппаратуры, что может быть дорогостоящим и занимать довольно много времени. Чтобы как можно реже сталкиваться с этой проблемой, необходимо своевременно заменять топливные фильтры и заправлять автомобиль качественным бензином.

Головка блока

Все модификации двигателей комплектовались одной головкой, что соответствовало требованиям «Евро 2». С введением дополнительных требований Euro 3 он был доработан и улучшен. Он не взаимозаменяем с предыдущей моделью.

В новой головке нет канавок в системе холостого хода, теперь их функции возложены на дроссельную заслонку с электронным управлением. Передняя стенка детали снабжена отверстиями для крепления кожуха цепи, а с левой стороны — отливы для крепления кронштейнов приемника системы впуска.Деталь имеет запрессованные чугунные вставки и направляющие клапана. Последние не нуждаются в периодической регулировке, так как их привод осуществляется при помощи цилиндрических толкателей с гидрокомпенсаторами. Модернизированная головка ЗМЗ-406 уменьшилась в весе на 1,3 килограмма. При установке на двигатель используется металлическая многослойная прокладка головки блока цилиндров.

Блок цилиндров

Усовершенствовав двигатель ЗМЗ-406, инженеры смогли модифицировать картер и модернизировать процесс литья. Так, появилась возможность оборудовать блок воздуховодами в отливке между цилиндрами.Благодаря этому этот элемент стал жестким, а головка крепится за счет более глубоких резьбовых отверстий и удлиненных болтов. В нижней части картера есть потеки, которые вместе с крышками коренных подшипников образуют опоры коленчатого вала. Крышки отлиты из чугуна и прикручены к блоку болтами.

Распределительный вал

Распредвал ЗМЗ-406 изготовлен из чугуна методом литья с последующей обработкой и закалкой. Валы приводятся в движение цепной передачей. Двигатель имеет два вала с одинаковыми размерами кулачков.

Осевое смещение кулачков составляет один миллиметр по отношению к гидравлическим толкателям. Этот фактор способствует вращению элементов гидроприводов при работающем двигателе, что существенно влияет на износ рабочей поверхности толкателя и делает его равномерным.

Цепной привод валов имеет гидронатяжители, которые работают от давления масла в системе смазки. Детали воздействуют на цепь напрямую через пластиковые башмаки, прикрепленные к осям.На двигателях ЗМЗ-406 после модернизации для повышения практичности и долговечности вместо башмаков стали использовать звездочки. Последние фиксируются на поворотных рычагах. Оси звездочек взаимозаменяемы с осями башмаков. Вместо удлинения оси башмака верхнего натяжения цепи стали использовать проставку, которая прикручивается к колодке.

Двигатель ЗМЗ-406 комплектуется цепями привода распределительных валов. Их нельзя заменить на цепи, которые были установлены на более ранних версиях моторов.

Поршни

Отлиты из алюминиевого сплава и имеют канавки для двух компрессионных колец и одного маслосъемника. Во время работы головка поршня охлаждается маслом через масляный ниппель в верхней головке шатуна.

Сферическая рабочая поверхность верхнего компрессионного кольца имеет слой хрома, который способствует лучшему притирку кольца. Второй элемент покрыт слоем олова. Маслосъемное кольцо комбинированного типа, состоит из расширителя и двух стальных дисков.Поршень крепится к шатуну штифтом, закрепленным на двух штопорах.

Коленчатый вал

Отливка из чугуна с последующей обработкой и упрочнением поверхности шейки токами высокой частоты. Устанавливается в блок на пяти коренных подшипниках.

Перемещение коленчатого вала соответственно оси ограничено штопорными полукольцами, которые расположены в проточных канавках опоры и крышки третьего коренного подшипника. На валу восемь противовесов.К задней части вала прикреплен маховик, в отверстие которого запрессованы проставочная втулка и подшипник качения первичного вала коробки передач.

Масло

Силовая установка ЗМЗ-406 оборудована комбинированной системой смазки. Под действием давления смазываются поршневые пальцы, шатун и коренные подшипники коленчатого вала, смазываются опорные точки распределительных валов, привод гидроклапана, промежуточный вал и ведомая шестерня масляного насоса.Все остальные детали и элементы двигателя смазываются разбрызгиванием масла.

Масляный насос шестеренчатого типа, имеет одну секцию и приводится в действие от промежуточного вала через косозубые шестерни. Система смазки оснащена маслоохладителем и полнопоточным очищающим фильтром.

Закрытая вентиляция картера с принудительным отводом газов.

Итак, мы привели подробное описание всех узлов, агрегатов и систем двигателя. Схема ЗМЗ-406 — на фото выше.

Устройство двигателя ЗМЗ 406

Двигатель ЗМЗ 406 является своеобразным переходным звеном между старым карбюраторным двигателем ЗМЗ 402 и его улучшенной инжекторной версией модели 405.

Странно, что большим значением маркируется этот агрегат, а не его преемник. Неопытный автомобилист подумает, что ЗМЗ 406 разработан значительно позже 405-го и более производительный. Что ж, давайте посмотрим, чем отличается этот 406-й мотор.

краткое описание

Этот двигатель относится к серии 4-х цилиндровых карбюраторных бензиновых установок.ЗМЗ 406 имеет линейное расположение цилиндров. Количество распредвалов в ГБЦ — 2. Порядок работы цилиндров: 1-2-4-2. Рабочий объем двигателя — 2,3 литра, мощность — 130 лошадиных сил.

Устройство

Исходя из рисунка 2, видим, что двигатель ЗМЗ 406 состоит из:

1. Поддон картера.
2. Маслосборник.
3. Насос масляный.
4. Насос привода насоса.
5. Коленчатый вал.
6. Шатун.
7. Ведомая шестерня привода масляного насоса.
8. Крышки того же устройства.
9. Ведущая шестерня привода масляного насоса.
10. Поршни.
11. Прокладки блока цилиндров.
12. Клапан выпускной.
13. Патрубок впускной с ресивером.
14. Головка блока цилиндров.
15. Распредвал впускного клапана.
16. Гидравлический толкатель.
17. Распредвал выпускного клапана.
18. Крышки головки цилиндров.
19. Индикатор уровня масла.
20. Коллектор выпускной.
21. Клапан выпускной.
22. Блок цилиндров.
23. Пробки сливные.

Примечание: нумерация деталей двигателя ЗМЗ 406 совпадает с обозначением устройств на рис. 2.

Что касается разработки, то данный агрегат разрабатывался совместно с немецкой компанией Mercedes, благодаря чему инженерам удалось увеличить межсервисный интервал до 15 тысяч и значительно увеличить срок службы основных деталей двигателя. Как показывает практика, ЗМЗ 406 может прослужить до 300-400 тысяч километров без расточки блоков и замены цилиндро-поршневых групп.Однако эта величина во многом зависит от состояния цепочки. Если дело дойдет до неисправности, выйдет из строя весь мотор. Отсюда такое разногласие: у одних двигатель без проблем может прослужить 400000, а у других через сотню ломается. Но однозначно участие немецких коллег-горняков положительно повлияло на надежность данного агрегата, ведь по сравнению с 402-м мотором его ресурс обслуживания был увеличен почти вдвое.

Ремонт двигателя ЗМЗ 406 — дело очень серьезное, так как процесс расточки деталей усложняется еще на 16 клапанов.Поэтому из-за сложной конструкции цена на капитальный ремонт этого мотора составляет от 1 до 2 тысяч долларов. Однако не следует забывать, что 16 клапанов обеспечивают машине отличную динамику и служат намного дольше, чем на 402 м.

В заключение хочу сказать одно: Заволжский 406-й двигатель действительно прошел этап эволюции и стал образцом для подражания многих российских автопроизводителей. Его удивительно большой срок службы и прекрасные энергетические характеристики приблизили Горьковский и Заволжский заводы к современности.И даже по сравнению с американским «Камминз», которым ЗМЗ комплектуют все «ГАЗель» и «Волга», он не теряет своей популярности, а спрос на него растет.

Двигатели ЗМЗ-405: характеристики, цены

Семейство бензиновых двигателей ЗМЗ-405 по праву можно считать одной из гордостей производителя — ОАО «Заволжский моторный завод». Высокое качество этих двигателей подтверждено годами эксплуатации. 4-цилиндровые, рядные, инжекторные двигатели ЗМЗ-405 появились на рынке в 2000 году.Основной потребитель — ОАО «ГАЗ». Этими двигателями оснащались ГАЗ-3111. Впоследствии силовой агрегат улучшили. Так, после проведения комплексных работ по адаптации, начатых в 2009 году, одна из модификаций семейства 405 — двигатель ЗМЗ-40524.10 — стала комплектовать автомобиль Fiat Ducato. В современных условиях аппаратами 405-й серии оснащаются как легковые автомобили, так и минивэны и легкие грузовики.

Конструкция

Двигатель «Заволжский завод» — четырехтактный автомобильный силовой агрегат с рядным расположением цилиндров и поршней.Подача топлива во впускные каналы цилиндров и зажигание контролируется электронной системой. Двигатель оснащен системой внешнего образования топливно-воздушной смеси. Возвратно-поступательное движение поршней преобразуется во вращательное через общий для всех поршней коленчатый вал. Два распредвала над головой. Система охлаждения замкнутая, жидкостная с принудительной циркуляцией теплоносителя. Система смазки двигателя 405 — комбинированная. Смазочные материалы наносятся на движущиеся части под давлением путем распыления.

Рекомендуем

Как работает сайлентблок задний переднего рычага и сколько он служит?

Сайлентблок задний переднего рычага — один из составных элементов ходовой части автомобиля. Он относится к направляющим элементам подвески вместе с рычагами, выдерживающим колоссальные нагрузки колесами. Однако с этим товаром их много …

Расход масла в двигателе. Шесть причин

Вряд ли можно найти автомобилиста, которого бы не волновал повышенный расход масла.Особенно раздражает, когда это происходит с другим новым мотором. Вот наиболее частые причины, которые приводят к расходу масла в двигателе …

Как работает выхлопная система?

Выхлопная система предназначена для удаления продуктов сгорания из двигателя и вывода их в окружающую среду. Также должно быть обеспечено снижение шумового загрязнения до приемлемых пределов. Как и любые другие сложные устройства, эта система состоит из нескольких …

Блок двигателя и коленчатый вал

Модернизированный блок 405 двигателя выполнен из чугуна с шаровидным графитом, что в сочетании с применением прецизионных методов обработки металла при его изготовлении существенно снижает деформацию цилиндра во время работы.В блоке старой модели были предусмотрены прорези по 2 мм между цилиндрами для системы охлаждения. Для блока двигателя ЗМЗ-405 такие пазы не предусмотрены. Кроме того, были увеличены резьбовые колодцы под болты ГБЦ.

Коленчатый вал конструктивно идентичен двигателю ЗМЗ-406, но отлит из качественного и более прочного чугуна. Конструкция — Panaorama с двумя противовесами на каждую рукоятку. Доработки позволили повысить устойчивость к центробежным силам и изгибающим моментам.

Двигатель

В основе двигателя был использован карбюратор ЗМЗ-406. 405 был модифицирован путем введения производной. Современные перспективные двигатели ЗМЗ-405 полностью соответствуют стандартам «Евро-3». Они устанавливаются на автомобили «ГАЗель», «УАЗ» и «Фиат». Производитель разработал и внедрил несколько инновационных конструкторских решений.

Итак, агрегат ЗМЗ-405 за счет полной разборки получил облегченный вес 1,3 кг. работы системы на холостом ходу с головным устройством.Управление двигателем контролируется электронным дросселем. Можно отказаться от некоторых комплектующих: дроссельной заслонки, клапана РХХ, воздушных форсунок на холостом ходу, датчика положения дверцы.

Блок сохранил свои первоначальные свойства после уменьшения веса. Более того, была увеличена жесткость блока. Заливка между цилиндрами устранена благодаря инновационным поперечным пазам в системе охлаждения.

Доработка ГБЦ

Инженерами производственного предприятия была проведена доработка теплоизоляции ЗМЗ-405.Для более надежной герметичности блока цилиндров усилена прокладка ГБЦ из однослойного безасбестового материала, использовался двухслойный металл. Обновленный материал и применение новых конструктивных элементов, в частности зигзагообразных деталей пружин, обеспечили лучший интерфейс уплотняющего газа и каналов системы смазки, а также улучшили процесс охлаждения. Толщина полосы новой конструкции уменьшена в три раза по сравнению с исходной набивкой, с металлическими краями и составляет всего 0.5 миллиметров. Это свело к минимуму необходимость выполнения затяжки болтов по сравнению с предыдущими деталями, что, в свою очередь, дает возможность снизить деформацию цилиндров при эксплуатации.

В двигателях 405 серии «Евро-3» в качестве вспомогательного оборудования используется удлиненный приводной ремень и самозатягивающийся ролик. Расчетный ресурс катка составляет 150 тыс. Км. В двигателях 405 серии значительно снижен расход масла и топлива. Эти двигатели соответствуют международным стандартам и нормам допустимых выбросов и обладают повышенной надежностью.

ЗМЗ-405: технические характеристики

Разработанный на базе двигателя ЗМЗ-406.10 ЗМЗ-405 «Евро-3» имеет следующие характеристики:

• Силовой агрегат предназначен для установки на микроавтобусы и малотоннажные автомобили.
• Тип двигателя — внутреннего сгорания, дизельный, рядный впрыск.
• Кол-во цилиндров-4, 16 клапанов.
• Объем — 2,46литра.
• Индекс сжатия — 9,3.
• Диаметр цилиндра — 95,5 мм.
• Ход поршня — 86 мм.
• Заявленная мощность 152 л.с. (111,8 кВт) при 5200 об / мин.
• Расход топлива — 198 г / л.с. в час рекомендуемое октановое число топлива — 92.
• Охлаждение двигателя — жидкостное.
• Снаряженная масса — до 192,2 кг.
• Соответствие экологическим нормам «Евро-3» при установке на трехкомпонентный преобразователь.

В чем ключевое отличие базового двигателя ЗМЗ-405 от двигателя? Технические характеристики увеличены на 4,8% при увеличении объема работ на 7,9%.

Современный двигатель ЗМЗ-405: цена

Бензиновые двигатели серии ЗМЗ-405 современных модификаций (40524.1000400-100, 101) на заводе производства ОАО «Колеса» 2013 года. Из последних улучшений можно отметить оптимизированную крышку клапанов, зубчатую цепь привода ГРМ и улучшенную систему вентиляции с отводом дыма в ресивер. Новые конструктивные изменения позволили создать двигатель, соответствующий не только экологическим нормам «Евро-3», «Евро 4».

Новый двигатель ЗМЗ-405, цена которого в дилерской сети колеблется от 124 до 152 тысяч рублей, с гарантией от производителя предназначен для переоборудования автомобилей «ГАЗель Бизнес».

Возможность тюнинга ЗМЗ-405

Тюнинг любого двигателя предполагает прежде всего увеличение мощности. В ЗМЗ-405 это может быть достигнуто тремя ключевыми способами: пересечение, турбирование или установка компрессора.

Первый вариант тюнинга, традиционный, предусматривает достаточно большой комплекс работ: установка активного воздухозаборника, доработка камер сгорания, увеличение объема ресивера, замена штатных клапанов, пружин, валов и узлов поршня. более продвинутый, модернизирующий выхлопную систему.В результате двигатель приобрел спортивный оттенок, а мощность увеличилась до 200 л.с.

manual — Перевод на польский — примеры английский

Эти примеры могут содержать грубые слова, основанные на вашем поиске.

Эти примеры могут содержать разговорные слова, основанные на вашем поиске.

Справочно-информативный иллюстрированный сервис инструкция по эксплуатации Volkswagen Gol / Volkswagen Pointer (c) 2003 года выпуска.

Odwołanie i pouczające ilustrowany serwis ręczny wskaźnik Gol / Volkswagen Volkswagen (c) 2003 модель roku.

Машина позволяет выполнять ручную загрузку элемента, автоматическую маркировку и ручную разгрузку маркированной части.

Maszyna pozwala na załadunek ręczny elementu, automatyczne wykonanie oznakowania oraz wyładunek ręczny oznakowanej już części.

Большинство машин в Исландии — МКПП .

Większość samochodów na Islandii ma manualną skrzynię biegów.

Он удобен в использовании и не требует вмешательства вручную.

Jest przyjazny dla uzytkownika i nie wymaga zadnych manualnych czynnosci.

При необходимости, должна быть доступна ручная резервная копия .

Jeśli jest to konieczne, powinno być udostępnione ręczne wspomaganie.

Газонепроницаемые шприцы для ручного отбора проб из свободного пространства .

Strzykawki gazoszczelne do ręcznego pobierania probek z fazy gazowej.

Нет необходимости в ручных настройках даже для очень толстых материалов.

Nawet przy ekstremalnie grubych podłożach drukowych nie są wymagane żadne ręczne ustawienia.

Я хочу, чтобы руководство подтвердило, прежде чем активировать любую систему, которая всеобъемлющая.

Chcę ręcznego potwierdzenia, zanim uaktywnię jakikolwiek system — o szerokim zastosowaniu.

Все виды массажа с мануальной терапией .

Wszystkie rodzaje masa? u leczniczego w terapii manualnej .

Это дает преимущества как при производстве с ручным управлением, так и при автоматическом производстве.

Przynosi to korzyści w produkcji zarówno ręcznej , jak i automatycznej.

Информационное руководство по замене руководство пользователя авторасходников автомобилей Renault Symbol 2002-2008 годов выпуска своими руками.

Informacje Przewodnik wymiany ręczne avtorashodnikov użytkowników pojazdów Renault Symbol 2002-2008 roku wydania z ich rąk.

7 Функция, обеспечивающая плавную ручную фокусировку путем вращения кольца фокусировки при нажатии кнопки спуска затвора наполовину во время блокировки автофокусировки.

7 Funkcja umożliwiająca płynne, ręczne ustawianie ostrości poprzez przekręcanie pierścienia ustawiania ostrości w czasie, gdy spust migawki jest wciśnięty do połowkady w tryofbokiew tryofbokie w tryofbokie do połowkady w tryofbokie blo.

Драйвер QNAP Cinder уже интегрирован в Platform9, установка вручную не требуется.

Sterownik QNAP Cinder jest już zintegrowany z Platform9, więc nie trzeba przeprowadzać ręcznej instalacji.

Включает в себя гидравлические листогибочные прессы, пневматические зажимы с закрытым концом и открытым горлом, а также одно- и двухсторонние ручные ножницы с ручным управлением.

Zawiera hydrazne prasy krawędziowe, zamknięty koniec i otwarty gardła cleatfolders pneumatycznych oraz jedno- i dwustronne ręczne cheekbenders.

Конкретный продукт, предлагаемый нами, представляет собой ручную стретч-пленку шириной 100 мм.

Specyficznym oferowanym przez nas produktem jest folia stretch ręczna szerokości 100mm.

Discotom-100 / -10 предлагает автоматическую резку и ручную резку .

Przecinarki Discotom-100 / -10 pozwalają na cięcie automatyczne i ręczne .

Помимо проведения физиотерапии и мануальной терапии , мануальных терапевтов также могут отправить вас в отпуск по болезни на срок до 12 недель.

Терапия manualny , oprócz fizjoterapii i terapi manualnej , może także wysyłać na zwolnienie lekarskie do 12 tygodni.

(Скорректировано) МКПП КПП и МКПП сцепление

Это означает, что вы можете выполнить ручную регулировку после завершения автофокусировки, не переходя в ручной режим .

Oznacza to, że można dokonać ustawień ręcznych po zakończeniu AF bez konieczności powrotu do trybu ręcznego .

Все они ручные и доступны во множестве размеров. Я не буду здесь вдаваться в подробности, потому что они вписываются в категорию руководства .

Wszystkie są ręczne i są dostępne wewnątrz szerokiego rónych rozmiarach.Nie będę się do nich tutaj, bo pasuje do kategorii ręcznej . Инжектор

INJINI. Зваяканакира незваякаипира, ари хвокугадзира инжектор звезды

Кажинджи кусарудза вакадаро вечипфуво мотокари, се «мхара», мубвунзо уномука памусоро кусарудза инджини. мотокари iyi akaisawo Motors звакасияна. Звикурукуру, «Мхара» акафамба Заволжская мичини, аси паиваво Ульяновск дзакабатана. Восе ване якасияна мхандо йезвокудья.Восе екисени уйе кабхурета йокутеведзера. Saka, ngationei kuti zvakanakira kuti motokari «Gazel» injini — инжектор кана карбюраторный.

Мучидимбу памусоро инджини сияна

Сехваро кути «мхара» акашумира «Волга», вокутанга симба чиквата аингова ЗМЗ-402. Карбюратор Raiva 8-vharafu INGINI INE 100 лошадиных сил. Практикуйте иноратидза кути куфадза муторо нехафу сави акапинза инджини кути кусайиква звикуру. Pakutanga zero, kureva muna 2003, chizvarwa wechipiri «Mhara» vakanga yakaiswa ZMZ-406.Раива звикуру раканацва инджини, райкура звикуру симба уйе крутящий момент памве бхуку 2,4 литра. Zvino chikwata 16 ane urongwa vharafu. Звисиней, джекисени мхандо хакуна кусандука. Акарамба чете, иё кабхурета. Вамве купфека «Мхара» 406 инжектор. wedzera simba, Chokwadi, zvakasimba akanzwa. Onawo chikwata ichi sezvo ЗМЗ-405. Изви модернизировал шандуро 406-гриб-мотокари. Инжектор Iye fekitari ane jekiseni. Шонгай «Мхара» инжектор инжини ЗМЗ-405 яива мусоро. Handiti, simba chikwata ichi — 152 bhiza simba, mumwe nehafu nguva mukuru kupfuura 402-гриб мотокари.Хумбурумбира ванокваниса — 2,5 литра. Uyewo ari mutsva «Mhara» uye akaisa Ульяновск Injini UMZ-4216 rimwe bhuku 3 литра. Инжектор chikwata ane mafuta jekiseni hurongwa. Kunonyanyisa simba riri 123 лошадиные силы. Сезвинейво, иджини изви кундосангана курэ-мугвагва УАЗ «Патриот» уе дзимве емашоко «Охотник».

карбюратор Характеристика

Izvi simba zvitengeswa gadziriro inoshandiswa kusanganisa mhepo uye huni, uye zvokudya nayo uye ichayerera kuzvidzora. Panguva iyoyo, zvakadai kubvuma hurongwa haasi kutengeswa.Инжектор гавана рефу чакацива. Карбюратор pachena chepfungwa mafuta gadziriro — zvokuimba nzira kusanganiswa huni. Известия куноитика ари ога мудзиё. Карбюратор Inonzi (ричизонзи). Райн Макамера мавири плавает. Ekupedzisira var chokuita tsono uye kudyidzana pamwe jets. Maererano nemitemo zvezvakatipoteredza Motors dzakadaro Unotevedzera mureza «Евро-2». Ичи чимве чиконзеро кути изви хунонгва хаваси якаисва па мота кубва 2009.

карбюратор zvayakanakira

Kunakisa wokutanga — zviri pasi mutengo basa.С mudziyo wegadziriro yaizivikanwa anenge ose muchairi. Разборка уе pakuzosunganidza pamusoro карбюратор kunogona kuva zvishoma pane imwe awa. Уэзвэ, ийи симба хуронгва вари акакодзера 76-октановое число петуру. мафута унху звинодива звишома. Карбюратор uye kana tsinga, chero nguva, unogona nekukatanura uye kuchenesa jets. Сезво звикаму, уногона кувана кунянге икозвино, пасиней нокути памутемо хаваси вомукати инджини анобудисва квеаненге макоре 10. Mutengo Аппаратное обеспечение ивайо звиногамучирика.

карбюратор payakaipira

Zvino nokuti nezvayakaipira.Vari zvinopfuura zvayakanakira. Сака, недостаток вокутанги — звири паси пакусимба. Izvi ndezvechokwadi kunyanya chando oparesheni. Кана учимханья кажинджи «анозадза му» макендуру. Холостой ход инофанира яидзорва вручную (панель «вхинза»). Мушуре ачидзия кути карбюратор анотанга зваканака рокуговера мафута. Хуронгва кунода какаванда кугадзирисва. Недостаток чимве — ndiko kusunungurwa mahombe CO. On inopisa Mazuva hurongwa kunoitawo pachayo akanzwa. Недостаток уе риноняцоонека — звири симба. Kunyange chete muinjini chichava dzinenge 20 muzana zvishoma.Somuenzaniso, 406 гриб и 405 гриб Injini Заволжский кугадзирва. Мусияно пакати паво — 42 лошадиные силы.

инжектор

Zvino kune mamwe mberi ari kudya hurongwa. Sei zvino kupfeka «Mhara» Injector Injector? Звакадаро хуронгва аношандиса вемагетси мафута джекисени. Форсунки Voitakura nenzira (форсунки). Чикуру кушанда хуронгва инорамба звакафанана. Mashandiro kunewo kunze kugadzirira uye zvokudya mafuta uye mhepo nezvakasanganiswa. Звисиней, кусияна куна карбюраторы, роза муитиро иноитика пано квайта ачишандиса Электроника.Специальный инжектор chikwata (MCU) inoti mashoko kubva sensor uye передает ruzivo urwu kune kombiyuta. Йокупэдзисира акатотанга анопа инъекторы хиратидзо. Черечедза кути машоко ринобва сияна сенсоры:

• Дроссель.
• Распредвал.
• Лямбда vachiongorora.
• Холостой ход.
• Охлаждающая жидкость тембирича.

Муитиро кутанга инджини риноитва памве нехафу джана. Куиса памусоро «мхара» инджини инжектор, мусингади незвинецо акадаи чаквата макендуру звиноянгарара нокукурумидза кан имве мхепо яунодья.Звино, звонка звёздочка не Электроника.

zvakanakira ari injector

Kunakisa wokutanga — chinhu akatsiga basa uye kuvesa. Инжектор уношанда отоматики нзира. Haufaniri kutarisira kuti «kubvisa» kana kuchinja jets. Havasi Pano. Чимве чаканакира — звири паси мафута ринодива. Чакарурама 20 музана шома пане кути петуру инджини йокутеведзера. Uye zvose nokuti chipimo chemushonga pamusoro musanganiswa kunoitika dzakakwirira zvakarurama. Электроника иноти анононгэдзера кубва сенсоры макуми (кондиционер инокурукура кунянгэ мэпо).Chimwe ndinoiitawo — yakakwirira kwezvakatipoteredza ushamwari. Вагадзири европейский кунге кусандиса джекисени инджини квемакоре анопфуура 20 адарика. Онаво кути инджини уйу нйоре кувана тичимханья звичиенсанисва кабхурета. Нокударо, мусияно квакадаро симба.

kutadza

Funga neizvi divi mari. Сака, недостаток кутанги — ири кунцвисиса чирвернули инжекторы памусоро. Kuti uzive dambudziko zvinogoneka chete uchibatsirwa chinokosha michina. Кугадзира инжектор ваите звакаре звука.Tinofanira kuenda unyanzvi pabasa. Uyewo havadi zvakaipa mafuta hurongwa. Минимальное октановое число nhamba — 92, карбюратор pamusoro 72 ari.

Chii chingava nani?

Saka, chii chauri sarudza kuti «Mhara» injini — инжектор кана карбюратор? Aongorora zvakanakira nekuipira vose zviyero, takasvika pakugumisa kuti zvikuru nesimba uye yemazuva ano vaiona wokutanga hurongwa. Kunyange zvazvo chirwere pamusoro injectors — zviri zvikuru kuva yakaoma muitiro, asi kuda motokari ose 5 kana kunyange 10 makore.Матамбудзико карбюратор куитика сэзво мангванани сезво вики йокутанга кушанда (кунянья кана учишандиса куонана кувеса).

mhedziso

«Мхара» — звукутенга мотокари, анэ чикуру баса — «торазве» кукуша яво квенгува пфуписа. Somugumisiro, unhu mikuru motokari iyi — zviri akavimbika uye vakaderera mafuta rinodyiwa. С runopfuura panguva 405-е джекисени инджини. Кунянге звезво унописа 20 музана звишома хуни, невероятная тяга. Сака, пакусарудза инджини, звине мусоро кути, переплата уйе кутенга звакаванда тек, джекисени пфунгва.Haangarambi zvinoda kugara chirwere uye kugadziriswa sezvo carbureted dzomuzana.

диагностических инструментов, полученных по собственному желанию. Характеристики, оценка меня и crìtiche

Per disgrazia, micca tutti i novi purtatori pò abbastanza à cumprà un novu arregistramentu di cumerciu. È à piglià una vittura nantu carta hè avà assai periculosa. U solu modu di Principiatu una los in u mercatu merci — à cumprà una vittura in u mercatu sicundariu. Ma quì si trova в Азенкуре за подводные камни.E la prima cosa vi accade quandu accattu — поисковая система. В соответствии с этим, он сделал правильный диагноз, диагностировав единицу пути и узнав, что это такое. Огромный выбор Mulateri Di L’mustrà vi cumu hè fattu in u priceu Flex «gazelle» диагностическая поисковая система. Stu infurmazione vi esse tandu interessante micca solu per quelli chì vulete à cumprà cummirciali, ma hà dinù u motorists spirienza.

didáctica

Cosa ùn si piglià успешная диагностика? «Газель-Бизнес» н бисогну усато сперту.Priparà un gruppu minimu — guanti travagliu, pezzi, è un film cù una penna, chì vo vi nutari tutti li difetta di vede.

biancu pirmittennu visuale

So a prima cosa vi deve pagà attinzioni — sta drips oliu. À spessu, диагностика mutore («газель 405») cù i so mani, fatta per via di «масложора». Tuttavia, Micca semper u mutivu di hè un anellu. Cusì, oliu hè persa à traversu l ‘CRANKSHAFT glándula strinta. Rammentu chì ci sò dui tali. Distìnguiri tra l ‘segnu oliu, fronte, è quarante.Par iddu stissu, la tradizzioni è arquantu sèmplice è Economica. Tuttavia, in ordine per rimpiazzà quessa, ci vole à désassembler assai di attachments. Ancu u minimu Armor u cumposti specificà chi u mutore hà un prublemu cù u sistemu oliu.

Sè l ‘macchina hè CPU («газель», выпущенная в виде французского вентилятора с крыльчаткой, забитые поры радиатора), только в Литве на территории Литвы. cuntrolla dinù l ‘Steuern блок-картер ga Cappa. U friscalettu E comu sicuenti: L’elementu deve esse mossa in una direzzione.Sè si sona in dui, o ancu Забитые поры, si pò causari àutu prissioni, sangue in u sistemu. Cum’è un risultatu — segnu oliu CRANKSHAFT strinta è Mesh «Sagging».

Piaciri nutati li saitti chì uttèniri l ‘ГБЦ на упаковке. S’elli hannu un zeru, allura stu mutore hè digià aperti.

cuntrolla lu admixture

Pacà, внимание к системе капелли. В частности, cuntrolla u mid espansione. На автомобиле «Газель» диагностика используется на английском языке, используя только инструменты.Basta à guardà u statu di u francese tank espansione. Sè l ‘macchina hè in piena vinci, ci hà da esse vistu da u sputicu macchie sbullaracante e plastica culore. Также смесь esaminà stessu. U Populu ùn deve esse culore rossu. Sè tantu, e poi mi canciau примесь в u sistemu per un longu tempu, è aghju persu tutti i proprietà di capelli. Pacà, внимание на i cundutti chì vai da u Radiator. Ci duvia esse Chjara. Sè gomma «ranni», это значит, что машина на pagà abbastanza Внимание. viaghji Parchet pò causari depressurization di u sistema di capelli.Cusì, unu puntu, iddi a crepapanza, e iddi mpricari tuttu di u liquidu. Vitturinu ritrova curpa solu quandu u rulli Printing Temperature satau antu à u rossu. Ma hè troppu tardu — u mutore перегревается.

Как лучше диагностировать муторе? «Газель 405» cù a so manu (cù ZMZ-405) secchi è осматривает примеси в средстве espansione di novu. В ghjurnata, è à l ‘allungamentu ghjocu di turni in ùn deve esse una sciuma, o dropts oliu (vale à dì l’ Lubrication moteur cum’è admixture stissa troppu sciddicusa).Болт охлаждающей жидкости — в головке блока цилиндров с сеткой. U friscalettu E stu fenominu sicuenti:

U prucessu di u so sustituiri — u listessu funziunamentu tempu-cunsumanu, oltri a stallazione di novu sigilli oliu CRANKSHAFT. In più, u bisognu di fighjulatu i ordine è i turcenti strincennu di saitti. Pirciò, assai prifiriscinu à «mischjà u chambre d» ammazzari lu mutore.

cundizione oliu

In seguita Diagnostics mutore («газель 406» cun n foras ZMZ) используется для подключения датчика francese da u mutore.Pacà attinzioni micca solu nantu à u so livellu, ma dinù nantu à i cundizioni di l’oliu. Si deve esse raru. Присенса ди и чьюти, пататиновые фритте, кубики и чьяру, ухудшение состояния обратно, и другие cumpunenti mutore mutori. Din, u oliu ùn deve avè un odore burette. Sè ci sò sciuma u probe francese è nu divorziu, stu capiri chi lu примесь виновата в u sistemu Lubrication. Ci sò duie scelte — Сетчатое приложение для головки блока цилиндров. Он визуально идентифицируется с sicunnu casu, в hè micca sempri pussibuli.Acconcia pò à mità di u costu di u moteur. Примесь — cumpusizioni assai riccio. Quandu впрыскивается в систему смазки для подачи и циркуляции газа. Da l ‘acquistu di a vittura hè megliu à astènesi.

sistemu lock

Как это сделать? «Газель-Некст» провела искровую проверку УМП-4216. Iddi sò sottu broneprovodami. Saca ùn deve avè u portée sputicu. S’è unu di elli ci hè un crepa, è signu chi u mutore travagliatu cù una thud. In la prisenza di portée lume pò ghjudicà u bassu a qualità di l’oliu usatu.электрод cintrali fista ìnnica lu passa, o lock Principiu. Saca cù oliu parla около ухудшения циркуляции avion и округлости cilindru. Di cunsiguenza, oliu n hè cacciatu da li mura di la manica è direttamente in la càmmara splusioni.

How altru à cuntrolla l «gazelle»? Диагностика ди-у mutore ди a vitezza truvava à Definisce assai di prublemi. Rivuluzioni ùn falà, è esse più / sottu nurmale (оптимально — 800 € за минуту). Motor stessu ùn ci mossi (si rifirisci a polzu Emile).Sè tantu, u vittura в Камбии и поисковой системе Puericultura. Идти со мной 150 миль. Sè lanciatu nant’à una tavola Strumentu urigginariu, allura l ‘jamming voli tù à ingannà. Ma stu n hè micca u solu funzione in u quali si pò truvà fora i veri connect. Слушайте u mutore. U Populu ùn deve crisser e nmezzu cuntruversa. Sè tantu, la catina appressu hè stese è in bisognu di sustituiri. Idda canciata — 130-140 миллионов. U va a 70 e ancu più di 50 mila di sti prublemi ùn pò esse à Principiu.

Диагностика поисковой системы «Cummins»

«Газель» с дизельными двигателями, потребляющими различные виды топлива.Fault dice u cumpressione firmau. Stu veni fattu pi mmenzu di na tali aparechju: Cinghie Gasoline ùn hè micca bonu per falza. aparechju in locu nozzles falamentu e tagghiò la incù carburante. Metri, li tri «качка». СТАРТЕР КОЛЕНВАЛ Прокручен. Симана Нурмали — от 26 до сопра. Стю пена поисковая система диагностики. «Gazelle-Next» был произведен на Marque Moteur «Cummins» 2,8 и более поздних версий. Sè l ‘pipa hà trazzi dâ aliva (ricardu u jacket à «Cummins» riscaldà senza intercooler), si ìnnica lu filter hè fitenti, o l’ ans di l ‘aria stissa.

Cum’è un jamming pò burlatu tu cu cumpressione? Ingrandà u agghiuncennu l ‘ogghiu viscosu trasmissioni. Per quessa, nanzu misurendu arechja taliannu lu bisnonno. L’oliu deve esse liquidu и lume. «Трансмиссионка» самая лучшая из лучших.

cunchiusioni

Allura, несколько примеров для получения суммы и тарифа Flex диагностики поисковой системы «газель». Comu si pò vede, все и tudischi si pò svorgi senza apparicchiaturi e populamenti spiciali. Принципиальный принцип — à sapè cum’elli a circà.

Новое ВЭБ, аффибоди LMP-2 и аффитоксин в молекулярной визуализации и таргетной терапии карциномы носоглотки

Резюме

Инфекция вируса Эпштейна-Барра (ВЭБ) тесно связана с несколькими злокачественными новообразованиями человека, включая эндемическую лимфому Беркитта, карцинозную лимфому Ходжкина и лимфому Ходжкина. NPC). Латентный мембранный белок 2 (LMP-2) EBV играет ключевую роль в патогенезе EBV-связанных опухолей и, таким образом, является потенциальной мишенью для диагностики и таргетной терапии злокачественных опухолей EBV LMP-2 ⁺ .Молекулы Affibody развиваются как зонды для визуализации и доставки небольших молекул в опухоль. В этом исследовании четыре EBV LMP-2-связывающих аффитела (Z _{EBV LMP-2} 12, Z _{EBV LMP-2} 132, Z _{EBV LMP-2} 137 и Z _{EBV LMP-2} 142) были идентифицированы путем скрининга отображаемой фагом библиотеки пептидов LMP-2 для молекулярной визуализации и таргетной терапии на модели мышей с ксенотрансплантатом EBV. Аффибоди Z _{EBV LMP-2} имеет высокую аффинность связывания с EBV LMP-2 и накапливается в опухоли мыши, полученной из ксенотрансплантатов EBV LMP-2 ⁺ в течение 24 часов после внутривенной (IV) инъекции.Последующее слияние экзотоксина PE38KDEL Pseudomonas с аффителом Z _{EBV LMP-2} 142 привело к продукции аффитоксина Z142X. Этот слитый аффитоксин Z142X проявляет высокую цитотоксичность, специфичную для клеток EBV ⁺ in vitro , и значительный противоопухолевый эффект у мышей, несущих ксенотрансплантаты опухоли EBV ⁺ при внутривенной инъекции. Эти данные являются доказательством принципа того, что аффитные молекулы EBV, специфичные для LMP-2, полезны для молекулярно-визуальной диагностики и имеют потенциал для таргетной терапии злокачественных новообразований EBV, экспрессирующих LMP-2.

Об авторе

Диагностика с помощью молекулярной визуализации и таргетная терапия успешно использовались для нескольких типов опухолей, но еще не применялись для диагностики или лечения ВЭБ-ассоциированных NPC. Аффинные молекулы — это небольшие белки, созданные для связывания с большим количеством целевых белков с высоким сродством, и поэтому они могут быть разработаны как потенциальные биофармацевтические препараты для молекулярной диагностики и терапевтического применения. В настоящем исследовании мы провели скрининг и охарактеризовали LMP-2-специфические аффитела EBV и оценили их использование в молекулярной визуализации клеток, экспрессирующих LMP-2, и мышей, несущих опухоль EBV LMP-2.Впоследствии мы сконструировали и получили аффитоксин LMP-2 EBV на основе аффитоксинов EBV LMP-2 и продемонстрировали его целевую цитотоксичность для линий клеток EBV ⁺ in vitro и in vivo . Наши данные показывают, что LMP-2-специфическое аффибоди EBV и производный от него аффитоксин полезны для диагностики клеток, экспрессирующих LMP-2, и таргетной терапии злокачественных новообразований, производных от EBV, LMP-2 ⁺ .

Введение

Вирус Эпштейна-Барра (EBV) — это γ-герпесвирус, который в первую очередь инфицирует В-клетки и эпителиальные клетки человека и вызывает постоянную бессимптомную инфекцию в периферических В-клетках памяти [1, 2].Как и у других членов семейства герпесвирусов, жизненный цикл EBV может переключаться между латентным и литическим состоянием. Скрытая инфекция ВЭБ приводит к нескольким злокачественным новообразованиям, включая эндемическую лимфому Беркитта, лимфому Ходжкина, карциному носоглотки (NPC) и карциному желудка [2, 3]. В последнее время все больше внимания уделяется связи инфекции EBV с NPC. Молекулярно-эпидемиологические и серологические исследования выявили важную этиологическую роль EBV в канцерогенезе NPC. Почти 100% сывороток недифференцированных и низкодифференцированных пациентов с NPC содержат антитела с высоким титром к антигенам EBV, и почти все недифференцированные опухолевые клетки NPC несут геном EBV и экспрессируют вирусные белки EBV [4–7].

Скрытый геном EBV экспрессирует шесть ядерных антигенов, кодируемых EBV (EBNA-1, -2, -3A, -3B, -3C и LP), и два мембранных белка (латентные мембранные белки LMP-1 и LMP-2) [2 ]. В зависимости от профиля экспрессии генов латентный период EBV можно разделить на типы I, II и III [8]. В B-клетках, которые инфицированы и трансформированы EBV, как LMP-1, так и LMP-2 экспрессируются только в латентных формах и вместе со всеми другими латентными генами. LMP-1 является основным вирусным онкопротеином и необходим для онкогенного процесса, который управляет трансформацией В-клеток in vitro [9–11].Ген LMP-2 экспрессирует две альтернативные изоформы, LMP-2A и LMP-2B, которые содержат 9 экзонов. Однако экзон 1 LMP-2A и LMP-2B транскрибируется отдельно с двух разных промоторов, но оба экзона 1 могут быть сплайсированы в рамке считывания с экзоном 2 [12]. Экзон 1 LMP-2A выполняет кодирующую функцию, а экзон 1 LMP-2B — нет. Таким образом, LMP-2B использует инициирующий кодон метионина в экзоне 2 для своей трансляции и, таким образом, представляет собой меньший белок (378 аминокислотных остатков), чем LMP-2A (497 аминокислотных остатков). Следовательно, обе формы LMP-2 почти идентичны, за исключением наличия дополнительных 119 аминокислотных остатков на N-конце LMP-2A, который образует цитоплазматический домен [13].Хотя обе формы LMP-2 имеют 12 трансмембранных доменов [13], цитоплазматический домен LMP-2A несет несколько мотивов, включая восемь остатков тирозина, и регулирует активность протеинтирозинкиназ (Syk и Lyn). Таким образом, LMP-2A может блокировать фосфорилирование тирозина, индуцированное B-клеточным рецептором (BCR), чтобы предотвратить активацию литической репликации EBV и поддерживать латентность EBV [14,15]. Более того, LMP-2A в некоторой степени поддерживает функции LMP-1 и вносит вклад в злокачественную трансформацию клеток-хозяев, вмешиваясь в сигнальные пути во многих точках, особенно в пути апоптоза и клеточного цикла [16].LMP-2B колокализуется с LMP-2A и предотвращает переключение с латентной репликации EBV на литическую [17,18]. Следовательно, LMP-2 является идеальной мишенью для диагностики и таргетной терапии злокачественных новообразований EBV LMP-2 ⁺ .

Молекулы Affibody представляют собой класс небольших (58 аминокислот, ~ 6,5 кДа) неиммуноглобулиновых аффинных белков, которые содержат Z-домен, полученный из стафилококкового белка A [19]. Путем комбинационной рандомизации аминокислотных остатков в спиралях I и II трехспирального пучка каркаса Z-домена могут быть сконструированы большие библиотеки, из которых могут быть выделены эффективные связывающие вещества для теоретически любой заданной мишени [20] с помощью различных методы отображения.Быстрая локализация опухоли, быстрое выведение из крови и неспецифических компартментов делают аффитные молекулы привлекательными для многих медицинских приложений, включая in vivo, молекулярную визуализацию, блокирование рецепторного сигнала и доставку токсина [21,22]. На сегодняшний день более 400 опубликованных исследований показывают, что аффинные молекулы были отобраны для нацеливания более чем на 40 различных белков и служат в качестве аффинных фрагментов в различных приложениях [22]. Белки, нацеленные на аффибоди, включают рецептор эпидермального фактора роста (EGFR) [23,24], рецептор 2 эпидермального фактора роста человека (HER2) [25,26], рецептор 3 эпидермального фактора роста человека (HER3) [27,28], сосудистый фактор роста эндотелия (VEGF) [29] и вирус папилломы человека типа 16 E7 (HPV16E7) [30,31].В частности, аффитные молекулы, присоединенные к цитотоксину, по-видимому, являются прямым и эффективным способом направить действие токсина на желаемые клеточные мишени [22].

В настоящем исследовании мы провели скрининг и охарактеризовали молекулы аффитела, связывающиеся с LMP-2 EBV, и оценили их использование в молекулярной визуализации мышей с опухолями. Впоследствии мы приготовили аффитоксин LMP-2 EBV на основе белков affibody, связывающих EBV LMP-2, и дополнительно исследовали целевую цитотоксичность для клеточных линий EBV LMP-2 ⁺ in vitro и in vivo .По нашим данным, аффитело и молекулы аффитоксина, специфичные для LMP-2 ВЭБ, могут быть использованы для визуальной диагностики клеток LMP-2 ⁺ и обладают потенциалом для таргетной терапии происходящих от ВЭБ, LMP-2 ⁺ NPC. Насколько нам известно, это первое сообщение о том, что EBV-специфическое affibody в качестве нового зонда использовалось для in vivo визуализационной диагностики опухолей EBV LMP-2 ⁺ . Что наиболее важно, наше исследование предоставляет первое доказательство того, что EBV LMP-2-специфический аффитоксин является новым агентом, полезным для ингибирования роста опухоли EBV LMP-2 ⁺ .

Результаты

Скрининг и отбор четырех молекул аффитела, связывающихся с LMP-2

Всего 282 клона, взаимодействующих с белком слияния B-эпитопа LMP-2 EBV (S1 фиг.), Были отобраны для секвенирования ДНК после четырех раундов фагового дисплея скрининг библиотеки в сочетании со скринингом ELISA на активность связывания EBV LMP-2 при 0,45 мкМ в 100 мкл / лунку (S2 фиг.). 69 клонов (69/282 или 24,5%) обладают правильной последовательностью, неся в общей сложности 13 рандомизированных аминокислотных остатков в спиралях 1 и 2 Z-домена по сравнению с исходной аффибоди-каркасной молекулой Z _WT .Более того, в этих рандомизированных последовательностях нет кодона преждевременной терминации. Четыре потенциальных молекулы аффибоди: Z _{EBV LMP-2} 12 (регистрационный номер GenBank {«type»: «entrez-nucleotide», «attrs»: {«text»: «MH807659», «term_id»: «17657″, «term_text»: «MH807659»}} MH807659, обозначается как Z12), Z _{EBV LMP-2} 132 (регистрационный номер GenBank {«type»: «entrez-нуклеотид», «attrs»: {«text»: » MH807660 «,» term_id «:» 17659 «,» term_text «:» MH807660 «}} MH807660, обозначается как Z132), Z _{EBV LMP-2} 137 (инвентарный номер GenBank{«type»: «entrez-нуклеотид», «attrs»: {«text»: «MH807661», «term_id»: «17661″, «term_text»: «MH807661»}} MH807661, обозначенный как Z137) и Z _{EBV LMP-2} 142 (регистрационный номер GenBank {«type»: «entrez-нуклеотид», «attrs»: {«text»: «MH807662», «term_id»: «17663″, «term_text»: «MH807662» }} MH807662, обозначенный как Z142), которые показали лучшее связывание с EBV LMP-2 в последующих скринингах ELISA, были отобраны для дальнейших исследований. 13 рандомизированных аминокислотных остатков четырех аффективных молекул представлены на S3 рис.Затем фрагменты генов четырех аффективных молекул субклонировали в вектор pET21a (+) в рамке с С-концевой His-меткой. Экспрессированные белки аффибоди в E . coli очищали с помощью агарозной смолы Ni-NTA. Анализ SDS-PAGE показал, что молекулярная масса составляет около 6,5 кДа, а чистота конечных продуктов составляет примерно 95%, что было использовано для последующих исследований ().

Выбранные 4 молекулы аффитела связываются с рекомбинантным и нативным EBV LMP-2.

( A ) SDS-PAGE анализ показал, что молекулярная масса аффитела составляет около 6,5 кДа, что соответствует ожидаемому размеру, а чистота конечных продуктов составляет около 95%. М, белковая лестница. ( B-F ) Биосенсорные анализы. Типичные сенсограммы связывания, показывающие взаимодействие аффител с иммобилизованным рекомбинантным слитым белком LMP-2 B-эпитопа EBV. Связывание 1,6, 3,2, 6,4, 12,8, 25,6, 51,2 нМ Z12, Z137, Z142 и неселектированной исходной молекулы аффибоди-каркаса Z _WT (B, D, E, F) и 0.8, 1,6, 3,2, 6,4, 12,8, 25,6 нМ от Z132 (C) до LMP-2 на сенсорном чипе анализировали с помощью анализа связывания на основе SPR. Сенсограммы получали после инъекции аффител Z _EBVLMP-2 на поверхность проточной ячейки EBV LMP-2 в выбранных концентрациях. Были проведены два независимых эксперимента, и Z _WT без сродства связывания с EBV LMP-2 при всех концентрациях служил отрицательным контролем. ( G ) Экспрессия LMP-2 в клеточных линиях EBV ⁺ . Вестерн-блоттинг проводили на экспрессию LMP-2 в клеточных линиях B95-8, C666-1 и CNE-2Z.Клеточная линия A375 служила EBV-отрицательным контролем. Кроличья сыворотка против слитого белка B-эпитопа LMP-2 EBV была использована в качестве первичных антител (приготовленных на месте). ( H ) Флуоресцентное окрашивание клеток EBV ⁺ выбранными четырьмя аффителами. Конъюгированные с FITC козьи антимышиные IgG служили в качестве вторичных антител, а мышиные mAb против His использовали для обнаружения меченных His молекул аффитела (зеленый). Клетки EBV ⁺ B95-8, CNE-2Z и C666-1 и EBV-отрицательные клетки меланомы A375 использовали для сравнительного окрашивания с отдельными молекулами аффитела.Невыбранная исходная аффинная молекула каркаса Z _WT , не имеющая сродства связывания с LMP-2, служила контролем. Ядра клеток контрастировали с PI (красный). Масштабная линейка 20 мкм.

Отобранные аффинные тела связываются с рекомбинантным LMP-2 с высоким сродством

Биосенсорный анализ поверхностного плазмонного резонанса (SPR) проводили для проверки аффинности связывания выбранных аффинных тел с целевым белком EBV LMP-2. Молекулы аффитела инъецировали в различных концентрациях на поверхность проточной клетки чипа, содержащего иммобилизованный рекомбинантный слитый белок LMP-2 B-эпитопа EBV.Результаты SPR показали зависимое от концентрации увеличение резонансных сигналов для каждого анализируемого аффитела при связывании с LMP-2, указывая на то, что четыре аффитела, выбранные из нашего скрининга библиотеки фагового дисплея, связываются непосредственно с LMP-2 дозозависимым образом (), тогда как неотобранная исходная аффибоди-каркасная молекула Z _WT не проявляла активности связывания слитого белка с B-эпитопом LMP-2 (), а также Z142 с неродственным белком MAGE-A3 (S4 фиг.). Дальнейшие расчеты показали, что константы равновесия диссоциации (KD) аффител Z12, Z132, Z137 и Z142 равны 1.45 × 10 ⁻⁶ моль / л, 3,74 × 10 ⁻⁶ моль / л, 3.90 × 10 ⁻⁶ моль / л, 1,14 × 10 ⁻⁶ моль / л соответственно (таблица S1). Эти данные SPR показали, что выбранные четыре аффинных тела связываются с рекомбинантным слитым белком LMP-2 B-эпитопа EBV с высокой аффинностью.

Отобранные аффитела взаимодействуют с нативным белком LMP-2 в клетках EBV

⁺

Чтобы оценить взаимодействие выбранных аффител с нативным LMP-2, мы сначала исследовали экспрессию LMP-2 в EBV ⁺ B95-8 , Клеточные линии C666-1 и CNE-2Z с помощью вестерн-блоттинга с использованием кроличьей антисыворотки против слитого белка B-эпитопа LMP-2 EBV, приготовленного на месте, в качестве первичного антитела.Как показано в, мы продемонстрировали, что наше кроличье антитело против слитого белка B-эпитопа LMP-2, которое использовалось в нашем скрининге библиотеки фагового дисплея, могло распознавать LMP-2 с помощью вестерн-блоттинга и экспрессию LMP-2 в B95-8 и C666. -1 были немного выше, чем у CNE-2Z. Учитывая, что молекулы аффитела, выбранные в этом исследовании, были способны связываться с рекомбинантным слитым белком LMP-2 B-эпитопа в анализе биосенсора SPR, мы затем исследовали, могут ли выбранные четыре связывающих LMP-2 аффитела также связываться с нативным белком LMP-2. в клетках EBV ⁺ с использованием непрямого иммунофлуоресцентного анализа (IFA).Поскольку линейные эпитопы LMP-2, используемые в нашем скрининге фагового дисплея, были расположены за пределами трансмембранной области LMP-2 от C-концевого LMP-2, выбранные аффитела могут быть полезны для обнаружения как LMP-2A, так и LMP-2B из клетки EBV ⁺ с латентностью как типа II, так и типа III. Как показано на фиг. 8, клетки EBV ⁺ B95-8, C666-1 и CNE-2Z, экспрессирующие LMP-2, все были положительны в отношении четырех окрашенных LMP-2-связывающих аффител с ярко-зелеными сигналами флуоресценции на клеточной мембране.Как и ожидалось, не было видимого окрашивания в клетках, инкубированных с невыбранной исходной молекулой аффибоди-каркаса Z _WT . Точно так же не наблюдали сигнала флуоресценции в EBV-отрицательных клетках меланомы A375, когда клетки инкубировали отдельно с каждым аффителом (). Профиль окрашивания мембраны LMP-2 четырьмя LMP-2-связывающими аффителами может быть подтвержден с помощью крысиного моноклонального антитела (mAb) против LMP-2A (). Увеличенное время инкубации аффибоди Z142 с клетками C666-1 до 6 часов не изменило бы статус окрашивания мембраны LMP-2 ().Конфокальный иммунофлуоресцентный анализ совместной локализации подтвердил, что сигналы флуоресценции LMP-2 и Z142 были совместно локализованы в клетках C666-1 (). Эти данные показали, что все четыре аффитела действительно связывались с нативной мембраной LMP-2 в клетках EBV ⁺ .

Аффибоди Z142 и крысиные mAb против LMP-2A распознают один и тот же нативный мембраносвязанный LMP-2, экспрессируемый в клетках EBV ⁺ C666-1, полученных из NPC.

(A) Профиль окрашивания мембран LMP-2 клеток C666-1 с помощью IFA с использованием крысиного mAb против LMP-2A.(B) Постоянное связывание аффибоди Z142-His с мембранным LMP-2, экспрессируемым в клетках C666-1, исследовали с помощью IFA против His-tag в указанное время инкубации (ч) аффибоди Z142. (C) Типичное аффибоди Z142-His (зеленый) и совместное окрашивание анти-LMP-2A (красный) нативного мембраносвязанного LMP-2, экспрессированного в клетках C666-1. Ядра клеток окрашивали Hoechst 33342 (синий). Объединенные изображения показали совместное окрашивание LMP-2 (желтый). Масштабная линейка 50 мкм.

Биораспределение выбранных аффител LMP-2 и их накопление в ксенотрансплантатах опухоли мыши EBV путем связывания с нативным LMP-2

Для дальнейшего подтверждения биораспределения и in vivo способности LMP-2-специфических белков аффибоди нацеливать на опухоль, Бестимусным мышам, несущим ксенотрансплантаты опухоли C666-1, внутривенно вводили Dylight755-меченный Z _{EBV LMP-2} affibody (15.4 нмоль в 100 мкл PBS на мышь) или равное количество невыбранной молекулы аффибоди-каркаса Z _WT , а затем сканировали с использованием системы визуализации в ближнем инфракрасном диапазоне в различные моменты времени после инъекции. Как показано на фиг.1, сигнал флуоресценции аффитных молекул Dylight755-Z _{EBV LMP-2} в подкожных ксенотрансплантатах опухоли C666-1 обнаруживался через 0,5 часа после инъекции. Впоследствии интенсивность флуоресценции в опухоли постепенно увеличивалась до 4-6 часов после инъекции, а затем постепенно снижалась.Сигнал флуоресценции Z137 и Z142 на участках опухоли сохранялся не менее 48 часов. Кроме того, наблюдалось накопление аффитела в почках, поскольку белки аффитела небольшого размера выводятся через почечную фильтрацию. Как и ожидалось, в ксенотрансплантатах мышей, которым вводили меченный Dylight755 Z _WT , не наблюдали сигнала опухолеспецифической флуоресценции (). Эти результаты показали, что аффитела Z _{EBV LMP-2} специфически связываются с опухолью, происходящей от C666-1. Поскольку время пребывания аффибоди Z142 в теле мыши оказалось намного дольше, чем у других трех аффител Z _{EBV LMP-2} , Z142 впоследствии был выбран в качестве носителя для доставки цитотоксина к опухолям LMP-2 ⁺ .

Поглощение опухолью молекул аффитела подкожными ксенотрансплантатами.

Мышам, несущим ксенотрансплантаты C666-1 (кружки), внутривенно инъецировали меченные Dylight755 молекулы affibody с последующим динамическим сканированием с помощью системы in vivo NIR. Невыбранная исходная аффинная молекула каркаса Z _WT , не имеющая сродства связывания с LMP-2, служила контролем. Сигнал флуоресценции в ксенотрансплантатах обнаруживался через 0,5 часа после инъекции. Впоследствии интенсивность флуоресценции в опухоли постепенно увеличивалась до 4-6 часов после инфицирования, а затем постепенно снижалась.Сигнал флуоресценции Z137 и Z142 на участках опухоли сохранялся не менее 48 часов. Кроме того, наблюдалось накопление аффитела в почках, поскольку белки аффитела небольшого размера выводятся через почечную фильтрацию. В ксенотрансплантатах мышей, которым инъецировали молекулы Z _WT , меченные Dylight755, не наблюдалось опухолеспецифического флуоресцентного сигнала.

Engineered Z142X связывается с нативным EBV LMP-2 с высокой специфичностью

Токсиновая часть, использованная в этом исследовании, представляла собой усеченный фрагмент экзотоксина Pseudomonas (токсин PE38).С-концевая часть PE38 была оптимизирована до последовательности KDEL (Lys-Asp-Glu-Leu) для увеличения цитотоксичности экзотоксина [32,33], а оптимизированные иммунотоксины на основе экзотоксина PE38KDEL были одобрены для клинических испытаний в США. FDA [34]. Для получения слитого с токсином белка Z142, аффитоксина Z142X, PE38KDEL был генетически слит с С-концом аффибоди Z142 (). Невыбранная аффибоди-каркасная молекула Z _WT служила в качестве контрольного слияния. Рекомбинантные плазмиды pET21a (+) / Z _{EBV LMP-2} affitoxin142 (Z142X) и pET21a (+) / Z _WT affitoxin (Z _WT X) были сконструированы и подтверждены секвенированием.Z142X и Z _WT X выражены в E . coli BL21 (DE3) очищали с использованием аффинной хроматографии Ni-NTA. Как показано на фиг. 9, очищенные Z142X и Z _WT X визуализировали в виде единой белковой полосы на геле SDS-PAGE с помощью окрашивания кумасси бриллиантовым синим, а также с помощью вестерн-блоттинга с mAb с His-tag. Полосы белка 45 кДа были обнаружены в соответствии с ожидаемыми размерами Z142X и Z _WT X.

Сконструированный аффитоксин Z142X связывается с нативным EBV LMP-2 с высокой специфичностью.

( A ) Схематическая структура аффитоксина Z142X. ( B ) Окрашивание кумасси синим в SDS-PAGE (левая панель) и анализ вестерн-блоттинга (правая панель) очищенных Z142X и Z _WT X. В анализе вестерн-блоттингом mAb против His служили в качестве первичного антитела. ( C ) Биосенсорные анализы. Типичные диаграммы сенсора связывания показывают взаимодействие молекул аффитоксина (5,56 нМ) с иммобилизованным рекомбинантным слитым белком B-эпитопа LMP-2 (1 нмоль). ( D & E ) Флуоресцентное окрашивание клеток EBV ⁺ B95-8, C666-1 и CNE-2Z с помощью Z142X ( D ) или неселектированной исходной аффибоди-каркасной молекулы Z _WT X ( E ).Аффитоксин Z _WT X без сродства связывания с LMP-2 служил контролем. В качестве первичного антитела использовали мышиные mAb против His, кроличью поликлональную антисыворотку SPA-Z и поликлональную антисыворотку мыши PE38KDEL, соответственно. Конъюгированные с FITC козьи антимышиные IgG и козьи антикроличьи IgG использовали в качестве вторичных антител (зеленые). EBV-отрицательные клетки меланомы A375, меченные теми же молекулами Z142X, служили контрольными клетками. Ядра клеток контрастировали с PI (красный) (600 ×). Масштабная линейка 20 мкм.

Аффинность связывания Z142X в дозе 5,56 нМ с гибридным белком B-эпитопа LMP-2 (1 нмоль) была подтверждена с помощью биосенсорного анализа SPR, показав гораздо более высокий резонансный сигнал для Z142X, тогда как Z _WT X не показал связывание с белком слияния B-эпитопа LMP-2 EBV в анализе (). При сравнении с Z142 в аналогичной дозе в анализе связывания () мы не наблюдали какого-либо заметного эффекта на связывание слитого белка B-эпитопа LMP-2 при добавлении PE38KDEL к аффибоди Z142.

Для оценки специфичности связывания Z142X с нативным LMP-2, экспрессируемым в клетках, с помощью IFA исследовали клетки EBV ⁺ B95-8, C666-1 и CNE-2Z и EBV-отрицательные клетки A375.В качестве первичных антител использовали мышиные mAb против His, кроличью поликлональную антисыворотку SPA-Z и поликлональную антисыворотку мыши против PE38KDEL. Клетки, инкубированные с Z _WT X, служили отрицательными контролями. Как показано на фиг.4, когда клетки B95-8, C666-1 и CNE-2Z инкубировали с Z142X, было обнаружено, что все три первичных антитела распознают Z142X с распределением сигналов флуоресценции преимущественно на клеточной мембране (зеленый) (). Не наблюдалось видимого сигнала при инкубации клеток B95-8, C666-1 и CNE-2Z с Z _WT X ().Аналогичные отрицательные результаты были также получены при инкубации EBV-отрицательных клеток A375 с Z142X (). Основываясь на этих результатах, мы заключаем, что слияние PE38KDEL с аффителом Z142 не мешало связыванию EBV LMP-2 аффитела.

Цитотоксичность аффитоксина Z142X для клеток EBV

⁺

Первоначально оценивалась цитотоксичность Z142X, Z142, Z _WT X и PE38KDEL на клетки B95-8 при 0,07, 0,14, 0,28, 0,56, 1,11 и 2,22 мкМ. на ячейках EBV ⁺ B95-8 с помощью набора CCK-8.Мы обнаружили, что жизнеспособность клеток B95-8 снижалась при увеличении концентрации Z142X и Z142, причем Z142X был более токсичным, чем Z142, как и ожидалось; тогда как Z _WT X и PE38KDEL проявили лишь незначительное влияние или совсем не повлияли на жизнеспособность клеток B95-8 при испытанных дозах (S5 фиг.). Впоследствии две дополнительные клеточные линии EBV ⁺ C666-1 и CNE-2Z и EBV-отрицательная клеточная линия A375 были включены для лечения различными концентрациями аффитоксина Z142X и Z _WT X, и жизнеспособность клеток была затем исследована с помощью с помощью набора CCK-8.Жизнеспособность клеток B95-8, C666-1 и CNE-2Z снижалась с увеличением концентрации Z142X (S6 фиг.). Дальнейшие расчеты показали, что значения IC50 Z142X через 72 часа составляли 0,313 ± 0,054 мкМ для клеток B95-8, 0,412 ± 0,063 мкМ для клеток C666-1 и 0,453 ± 0,139 мкМ для клеток CNE-2Z. Таким образом, для дальнейшего исследования была выбрана самая высокая концентрация 2,22 мкМ. Затем оценивали цитотоксичность Z142X в разные периоды времени (0, 3, 6, 12, 24, 48 и 72 часа). Как показано на Z142X на 2.22 мкМ значительно снижали жизнеспособность клеток EBV ⁺ (B95-8, C666-1 и CNE-2Z) в течение указанных периодов времени, тогда как клетки A375, обработанные такой же концентрацией Z142X, оставались полностью жизнеспособными. Как и ожидалось, Z _WT X, который не связывается с EBV LMP-2, не оказывал влияния на какие-либо клеточные линии (). Результаты показывают, что слияние PE38KDEL с аффителом Z142 проявляет цитотоксическую активность PE38KDEL и не влияет на связывание Z142X с нативным EBV LMP-2 в клетках EBV ⁺ .

Z142X специфически убивает клетки EBV ⁺ in vitro .

Клетки EBV ⁺ (B95-8, C666-1 и CNE-2Z) и EBV-отрицательные клетки (клетки меланомы A375) в 96-луночном планшете обрабатывали 2,22 мкМ Z142X или контрольными агентами (Z _WT X, PE38KDEL и средний) на указанное время. Жизнеспособность клеток оценивали с помощью набора CCK-8. 2,22 мкМ Z142X значительно снижало жизнеспособность клеток EBV ⁺ (B95-8, C666-1 и CNE-2Z) в течение указанных периодов времени, тогда как клетки A375, обработанные такой же концентрацией Z142X, оставались полностью жизнеспособными.Контрольные агенты (Z _WT X, PE38KDEL и среда) не влияли ни на какие клеточные линии.

In vivo острая токсичность аффитоксина Z142X

Токсичность Z142X оценивали на мышах BALB / c путем внутривенной инъекции в хвостовую вену в указанных концентрациях. Как указано в таблице S2, мыши, которым вводили 667 нмоль / кг и 556 нмоль / кг белка Z142X, все погибли через 72 часа после инъекции во всех трех экспериментах. Одна из протестированных мышей выжила при лечении 444 нмоль / кг в эксперименте и эксперименте.Три и две из протестированных мышей выжили при обработке 333 нмоль / кг также в экспериментах II и III, соответственно, тогда как только две из протестированных мышей погибли во всех трех экспериментах при 222 нмоль / кг. Соответственно, рассчитанная величина LD50 составила 264,8 нмоль / кг через 72 часа после инъекции. Впоследствии 100 нмоль / кг Z142X было выбрано для следующих исследований опухолей против EBV, хотя Z142X при 55,6 нмоль действительно вызывал смерть двух животных в одном из трех экспериментов.

Аффитоксин Z142X ингибирует рост опухоли у мышей с опухолями EBV

Противоопухолевый эффект аффитоксина Z142X оценивали на мышах, несущих ксенотрансплантаты C666-1 и CNE-2Z.Опухолевые клетки вводили мышам подкожно, как описано в разделе «Материалы и методы». Когда размер опухоли достигал 50 ~ 100 мм ³ , мышам вводили равные количества Z142X, Z142, Z _WT X, PE38KDEL или PBS каждые два дня 15 раз через хвостовую вену. Как показано на фиг.1, с 0 по 15 день размеры опухоли C666-1 во всех группах медленно увеличивались. К 15 дню и после этого средний размер опухоли быстро увеличивался в контрольных группах, в то время как опухоль у животных, обработанных аффитоксином Z142X или аффитоксином Z142, демонстрировала заметное ингибирование роста.В конце этого эксперимента мы не видели, чтобы какое-либо животное умерло от схемы лечения в ходе наблюдения, а средний вес опухоли мышей, получавших PBS-, PE38KDEL-, Z _WT X-, Z142- и Z142X, был ниже. 4,35 ± 0,51, 4,06 ± 0,59, 3,89 ± 0,47, 2,54 ± 0,05 и 1,46 ± 0,16 г соответственно. Средний вес опухоли у животных, получавших Z142X, был значительно ниже, чем у контрольных мышей (P <0,05). У мышей, несущих подкожные ксенотрансплантаты опухоли CNE-2Z, аффитоксин Z142X был гораздо более сильным ингибитором, чем у контрольных агентов (P <0.05) (). Средний вес опухоли у мышей, получавших Z142X, составлял 0,64 ± 0,12 г, тогда как у животных, получавших Z142, Z _WT X, PE38KDEL и PBS, вес опухоли составлял 2,21 ± 0,17, 3,26 ± 0,24, 3,75 ± 0,25, 4,28 ± 0,23. g соответственно. Аффибоди Z142 действительно проявляло ингибирующую активность в отношении роста опухоли в результате его немного более слабого цитотоксического эффекта, чем у Z142X (S5 фиг.). Как и ожидалось, контрольные агенты (Z _WT X, PE38KDEL или PBS) не проявили какого-либо противоопухолевого действия на этих мышей (), ни аффитоксин Z142X и аффитоксин Z142 не показали роста опухоли у мышей, несущих EBV-отрицательные ксенотрансплантаты опухоли A375. (S7 Рис).Мы также заметили, что мыши, получавшие Z142X, не показали значительной потери веса и прожили более 1,5 месяцев без каких-либо признаков дисфункции органов. В совокупности наши результаты являются первым доказательством того, что аффитоксин Z142X может быть полезным прецизионным лекарством, специфичным для опухолей EBV ⁺ .

Аффитоксин Z142X предотвращает рост опухоли EBV у мышей, несущих ксенотрансплантаты опухоли C666-1 (A-C) или CNE-2Z (D-F).

Мышам, несущим опухолевые трансплантаты C666-1, внутривенно вводили 100 нмоль / кг Z142X, Z142 или такое же количество контрольных агентов или такой же объем PBS каждые два дня 15 раз через хвостовую вену.Рост опухоли контролировали, ежедневно измеряя объем опухоли. Средние размеры опухоли быстро увеличивались в контрольных группах, в то время как опухоль у животных, получавших Z142X affitoxin или Z142 affibody, демонстрировала заметное ингибирование роста. В конце эксперимента все опухолевые трансплантаты были удалены и взвешены. Средний вес опухоли у животных, получавших Z142X, был значительно ниже, чем у контрольных мышей. Подобно мышам, несущим подкожно ксенотрансплантаты опухоли CNE-2Z, аффитоксин Z142X был гораздо более сильным ингибитором, чем контрольные агенты.Аффибоди Z142 действительно проявляло ингибирующую активность в отношении роста опухоли. Контрольные агенты (Z _WT X, PE38KDEL или PBS) не проявляли противоопухолевого действия на этих мышей. Данные представляют собой среднее значение ± стандартное отклонение (n = 5). * P <0,05, по сравнению с группами аффибоди PBS, PE38KDEL, Z _WT X, Z142. Использовался двухсторонний непарный t-критерий Стьюдента.

Обсуждение

NPC является географическим раком и имеет относительно высокую заболеваемость в Юго-Восточной Азии и материковом Китае [35]. Как и другие виды рака, отдаленные метастазы и местные рецидивы являются основной причиной смерти пациентов с NPC.Таким образом, ранняя диагностика и терапия NPC играет решающую роль в предотвращении метастазирования. Одновременная химиотерапия и лучевая терапия значительно улучшили исход NPC. Однако общая выживаемость пациентов с NPC по-прежнему оставляет желать лучшего [36,37]. Поэтому актуальна ранняя диагностика ЯПН и эффективная специфическая молекулярная таргетная терапия. Опубликованные данные подтвердили, что недифференцированный NPC тесно (100%) связан с EBV-инфекцией [38]. EBV LMP-2 экспрессируется в латентных формах II и III типов для поддержания латентной EBV-инфекции и вносит вклад в злокачественную трансформацию, вмешиваясь в сигнальные пути во многих точках, особенно в клеточном цикле и апоптотическом пути [14–16].Кроме того, LMP-2B колокализируется с LMP-2A и конститутивно экспрессируется в основном в мембране всех EBV-инфицированных клеток [39, 40]. Таким образом, EBV LMP-2 является идеальной мишенью для диагностики и таргетной терапии злокачественных опухолей типа Ⅱ / EBV LMP-2 ⁺ .

И молекулярная визуализация, и таргетная терапия опухолей — это инструменты сродства на основе белков, такие как mAb и их фрагменты. Однако из-за своего большого размера (~ 150 кДа) mAb обладают присущими им недостатками, а именно плохим проникновением в ткань и длительным временем пребывания в кровотоке, что приводит к плохому контрасту изображения.По сравнению с mAb, аффитные молекулы очень малы по размеру (~ 6,5 кДа) и, следовательно, обладают благоприятными свойствами для диагностической визуализации и в качестве опухолевых лигандов для доставки лекарств [41]. Из-за их небольшого размера аффибоди можно синтезировать или рекомбинантно экспрессировать. Так как первая конструкция HER2-нацеливающая аффитная молекула Z _{HER2: 342} была получена и подтверждена для связывания с HER2-положительными линиями раковых клеток [24], несколько подобных аффител-молекул, нацеленных на EGFR [23,24], HER3 [27,28] , IGF-1R [42], HIV-1-gp120 [43] и HPV16E7 [30,31] были зарегистрированы и также были применены для визуализации нескольких связанных с опухолью молекулярных мишеней, таких как HER2 [25, 44], EGFR [45 , 46], HER3 [47].Первое клиническое визуализационное исследование пациентов с раком молочной железы было проведено с использованием HER2-специфического аффибоди, которое было помечено ¹¹¹ In или ⁶⁸ Ga с использованием как ОФЭКТ (однофотонная эмиссионная компьютерная томография), так и ПЭТ (позитронно-эмиссионная томография). [26,48].

Молекулярная визуализация in vivo может обеспечить критический глобальный обзор потенциальных метастатических поражений при диагностике рака и, таким образом, имеет большой потенциал для улучшения диагностики многих заболеваний для выбора подходящего лечения [22].Для диагностической визуализации разработано несколько метаболических маркеров, наиболее часто используемый — ¹⁸ F-фтордезоксиглюкоза-ПЭТ для обнаружения метастатической и рецидивирующей карциномы человека. Основным недостатком метода является неспецифичность повышенного метаболизма глюкозы и неспособность распознавать специфичную для рака мишень. ПЭТ также является дорогостоящим и радиоактивным, поскольку его обнаружение зависит от гамма-лучей, испускаемых радиолигандом, испускающим позитроны. Диагностика, основанная на молекулярной визуализации, не получила широкого распространения при NPC, отчасти из-за отсутствия подходящих нацеливающих агентов, которые обладают высокой аффинностью и специфичностью связывания с мишенью.В этом исследовании мы получили четыре EBV LMP-2-специфических аффитела путем скрининга библиотеки фагового дисплея. IFA подтвердил, что аффитела специфически связываются с нативным белком LMP-2, распределенным преимущественно на клеточной мембране клеточных линий EBV ⁺ . Динамическая оптическая визуализация показала быстрое и специфическое накопление аффител Dylight755-Z _{EBV LMP-2} в ксенотрансплантатах опухоли C666-1 и быстрое выведение из организма в этой модели мыши с ксенотрансплантатами. Мы обнаружили, что время пребывания аффибоди Z142 в организме было относительно дольше, чем у других трех EBV LMP-2-связывающих аффител, но механизм его более длительного пребывания у животных остается неизвестным.

PE38KDEL — это усеченная и оптимизированная версия PE38, а иммунотоксины на его основе были одобрены для клинических испытаний FDA США [34]. HER2-специфическая аффитная молекула, слитая с токсином PE38, может проявлять специфическую цитотоксичность по отношению к HER2-экспрессирующим клеткам [49] и подавлять рост подкожных ксенотрансплантатов HER2-экспрессирующих опухолевых клеток без видимых побочных эффектов [50]. В этом отчете мы сконструировали и получили Z _{EBV LMP-2} affitoxin142 (Z142X) путем слияния токсина PE38KDEL с аффителом Z _{EBV LMP-2} 142.Как терапевтический кандидат для NPC, Z142X должен связываться со своим целевым белком, EBV LMP-2, с высокой специфичностью. Мы обнаружили, что (1) Z142X специфически взаимодействует с нативным белком LMP-2 на клеточной мембране линий клеток EBV ⁺ и специфически идентифицирует ксенотрансплантаты, полученные из клеток EBV ⁺ ; (2) Z142X связывается с LMP-2 и убивает клетки EBV LMP-2 ⁺ , но не EBV-отрицательные клетки; (3) Z142X ингибирует рост опухоли у мышей, несущих ксенотрансплантаты опухоли NPC, полученные из клеточных линий EBV ⁺ C666-1 и CNE-2Z, но не ксенотрансплантаты меланомы (EBV-отрицательная линия клеток меланомы A375).Модуль молекулы affibody расположен на N-конце аффитоксина и обеспечивает функцию нацеливания на LMP-2. Как токсиновая часть аффитоксина попадает в клетки-мишени после связывания аффитоксиновой части с LMP-2, еще предстоит исследовать. Было обнаружено, что PE38KDEL в цитозоле блокирует синтез белка путем связывания и деактивации фактора элонгации трансляции 2 (EF-2) [51]. Открытие того, что аффибоди Z142 также достаточно подавляло рост опухоли в ксенотрансплантатах C666-1 и CNE-2Z, подразумевает, что LMP-2-специфическая молекула аффибоди может модулировать LMP-2-ассоциированные сигнальные пути, как сообщалось для HER2- или HER3- affibodies [52,53].

В целом, мы впервые получили и охарактеризовали четыре EBV LMP-2-специфических аффинных тела с высокой аффинностью и специфичностью. Аффитела быстро накапливаются в опухоли в ксенотрансплантатах опухоли EBV LMP-2 ⁺ при внутривенной инъекции. Следовательно, LMP-2-специфические аффитела могут иметь большой потенциал для молекулярной визуализации EBV-ассоциированных NPC. Кроме того, слияние токсина PE38KDEL с аффибодией Z _{EBV LMP-2} предоставляет PE38KDEL со специфическим нацеливанием EBV LMP-2 и цитотоксичностью в отношении опухолевых клеток NPC.Поскольку не все опухоли, ассоциированные с EBV, экспрессируют LMP-2, наши LMP-2-специфические аффитела / аффитоксины могут быть полезны для диагностики или терапевтического лечения опухолей EBV с латентным типом II или III. Хотя установленное аффитоксин подавляет рост опухоли in vivo и подробный механизм (механизмы) еще предстоит изучить, наш аффитоксин будет мощным лекарством против NPC, которое может быть эффективным против солидных опухолей без явной цитотоксичности для нормальных клеток.

Материалы и методы

Создание объединенных B-клеточных эпитопов LMP-2 для скрининга аффибоди

Три B-клеточных эпитопа LMP-2 были предсказаны и охарактеризованы Xue et al.[54], а эпитопы вне трансмембранной области LMP-2 из общей C-концевой половины LMP-2A и LMP-2B были выбраны для дальнейших исследований в этом отчете. Отобранные B-эпитопы LMP-2 с номерами, соответствующими положениям аминокислотных остатков в белке LMP-2A, 199RIEDPPFNSLL209- (GS) -318TLNLT322- (GS) -381KSLSSTEFIPN391, были связаны глицин-серином (GS) и кодонами. Затем были синтезированы оптимизированные нуклеотидные последовательности и клонированы по сайтам BamH Ⅰ и Hind вектора pET32a (+) для экспрессии в E . coli BL21 (DE3). Слитый белок LMP-2 B-эпитопа проверяли с помощью SDS-PAGE и вестерн-блоттинга (S1 фиг.).

Конструирование библиотеки фагового дисплея, содержащей каркас Z-домена, производного от стафилококкового белка A (SPA)

Комбинаторную фаговую библиотеку Z-домена получали, как описано [30], со случайными аминокислотными остатками в положениях 9, 10, 11 , 13, 14, 17, 18, 24, 25, 27, 28, 32 и 35. Вкратце, чтобы создать случайную библиотеку аффител, дикий каркас SPA-Z использовали в качестве матрицы для амплификации ПЦР со случайными праймерами из спиралей 1 и 2 области Z. Sfi I / Not I расщепленные продукты ПЦР лигировали с фагмидным вектором pCANTAB5E для конструирования рекомбинантного вектора pCANTAB5E / SPA-N. E . Затем клетки coli TG1 трансформировали библиотеками рекомбинантных векторов, получая очевидные размеры библиотеки со сложностью 1 × 10 ⁹ и со 100% разнообразием каркаса SPA-Z. После оценки случайности и емкости встроенной библиотеки affibody исходные фаги затем ресуспендировали в стерильном растворе PBS / глицерин (20% об. / Об.), Окончательно разделяли на аликвоты и хранили при -80 ° C.Запасы фагов из полученных библиотек путем скрининга были приготовлены с использованием стандартных процедур с участием фага-помощника M13KO7.

Выбор фагового дисплея

Фаговый отбор связывающих веществ с очищенным бактериальным EBV LMP-2 проводили в иммунной пробирке, как описано [55]. Вкратце, аликвоту исходного фага размораживали и разбавляли 9 мл 2xYT, содержащего 50 мкг / мл ампициллина и 2% глюкозы (2xYT-AG). Эти бактериальные клетки инфицировали при MOI = 20 с помощью M13K07 (Invitrogen), и инфицированные бактерии инкубировали в шейкере при 37 ° C в течение 2 часов.Клетки собирали центрифугированием при 1000 × g в течение 10 мин и ресуспендировали в 10 мл 2 × YT, содержащего 100 мкг / мл ампициллина и 50 мкг / мл канамицина. Перед сбором культуру выращивали в течение ночи при 37 ° C. Фагсодержащий клеточный лизат осветляли центрифугированием при 1000 × g в течение 20 мин. Для экстракции фага лизат фильтровали через фильтр 0,45 мкм и концентрировали путем осаждения с помощью раствора полиэтиленгликоля 1/5 объема (20% PEG 8000, 2,5 M NaCl) в течение 45 минут на льду. Осажденные фагмиды центрифугировали (20 мин, 6000 × g, 4 ° C) и ресуспендировали в 2 × YT.Целевой белок EBV LMP-2 B-эпитоп (0,45 мкМ) в 2 мл карбонатного буфера для покрытия на пробирку наносили на иммуно-пробирку (Greiner Bio-one, Германия) в течение ночи при 4 ° C, а несвязанный белок удаляли с помощью PBS. содержащий 0,1% Tween20. После блокирования 5% обезжиренным молоком в PBST в течение 1 часа Иммуно-пробирки инкубировали с фагмидами при 37 ° C в течение 2 часов. Впоследствии пробирки были промыты шесть раз PBST. Связанные фаги элюировали логарифмической фазой E . coli TG1 клеток при 37 ° C в течение 1 ч без встряхивания.Небольшая аликвота инфицированного E . Культуру coli TG1 серийно разводили в десять раз и высевали на чашки с агаром 2xYT-AG для определения титра фага. Остальные E . Затем культуру coli TG1 инфицировали фагом-помощником M13K07 и подвергали дополнительному раунду скрининга. В последнем цикле были получены отдельные колонии бактерий, и супернатант культуры, полученный из одной колонии, был использован для дальнейшего скрининга ELISA.

Скрининг ELISA

Анализ на основе ELISA использовали для дополнительной проверки их сродства к целевому белку LMP-2 в соответствии с методами, описанными Xue [30].Вкратце, супернатанты (100 мкл), содержащие потенциальные аффитные молекулы, загружали в лунки для микротитрования, которые были предварительно покрыты 0,45 мкМ (100 мкл / лунку) слитого белка B-эпитопа LMP-2. После блокирования и промывки планшеты инкубировали со 100 мкл разведенных 1: 10000 мышиных mAb против M13 (GE Healthcare, Piscataway, USA) на лунку в течение 1 часа. После четырехкратного промывания лунок планшеты инкубировали с добавлением 100 мкл конъюгированного с пероксидазой хрена (HRP) козьего антимышиного IgG (1: 5000) на лунку в течение 1 часа.Лунки промывали четыре раза и в каждую добавляли раствор 3,3 ’, 5,5’-тетраметилбензидина (TMB). Через 30 минут добавляли стоп-раствор (2 M H ₂ SO ₄ ) и измеряли оптическую плотность (OD) при 450 нм на ридере для микропланшетов Bio-tek ELISA. Фаги с относительно высоким сигналом величины поглощения, которые несут потенциальные аффинные молекулы с высоким сродством к EBV LMP-2, были отобраны для секвенирования ДНК и последующих исследований.

Производство молекул Affibody

Аффитела, выбранные для дальнейшей идентификации, были субклонированы и созданы с помощью слитых белков с C-концевым His-tag для очистки.Последовательности выбранных EBV LMP-2-связывающих аффител молекул, включая Z _{EBV LMP-2} 12, Z _{EBV LMP-2} 132, Z _{EBV LMP-2} 137, Z _{EBV LMP-2} 142 ( обозначенные как Z12, Z132, Z137, Z142) и Z _WT были отдельно клонированы в вектор экспрессии pET21a (+) в рамке с С-концевой His-меткой. E . coli BL21 (DE3) трансформировали экспрессирующими плазмидами и индуцировали в течение 4-6 часов при 37 ° C 0,8 мМ изопропил-L-тио-β-D-галактопиранозидом (IPTG, Sigma-Aldrich Co., Сент-Луис, Миссури) для экспрессии слитых белков. Рекомбинантные аффитела LMP-2 с His-меткой на С-конце очищали хроматографией на агарозной смоле Ni-NTA (Qiagen, Hilden, Германия) и проверяли с помощью SDS-PAGE. Очищенные белки дополнительно подвергали диализу в PBS с использованием Slide-A-Lyzer (Pierce, Rockford, IL, USA) в соответствии с рекомендациями производителя. После определения концентрации с использованием метода количественного определения белков бицинхониновой кислоты (BCA) белки хранили при -80 ° C для дальнейшего использования.

Анализ поверхностного плазмонного резонанса

Для оценки связывания мишени выбранных аффител Z _EBVLMP-2 с EBV LMP-2, поверхностный плазмонный резонанс (SPR) выполняли на системе ProteOn XPR36 (Bio-rad, California, СОЕДИНЕННЫЕ ШТАТЫ АМЕРИКИ). Слитый белок LMP-2 B-эпитопа (1 нМ), служивший лигандом, был иммобилизован на поверхности карбоксилатглюканов в сенсорном чипе HTG (Bio-rad), как описано ранее [30,31]. Затем готовили пять или шесть концентраций каждого образца аффитела и вводили его по поверхности чипа для регистрации связывания образца с поверхностью.Все эксперименты проводились со скоростью потока 30 мкл / мин при 25 ° C. Наборы данных SPR были согласованы в глобальном масштабе с использованием модели связывания Ленгмюра 1: 1 и проанализированы с помощью программного обеспечения BIA Assessment 3.0.2.

Клеточная культура

Клеточные линии EBV ⁺ , включая B95-8 (лимфоциты, трансформированные EBV, ATCC: CRL-1612), C666-1 (линия клеток NPC человека, CVCL_7949) и CNE-2Z (линия клеток NPC человека, CVCL_6890) были соответственно получены из Американской коллекции типовых культур (ATCC) и Guangzhou Taisheng Bio-Tech Co.Ltd (Гуанчжоу, Китай). EBV-отрицательная клеточная линия меланомы A375 (ATCC: CRL-1619) была получена из ATCC. Клетки выращивали либо в среде RPMI-1640 (B95-8, C666-1 и CNE-2Z), либо в среде Игла, модифицированной Дульбекко с высоким содержанием глюкозы (DMEM) (A375) с добавлением 10% фетальной бычьей сыворотки (FBS), 100 единиц / мл пенициллина и 0,1 мг / мл стрептомицина. Все клеточные линии поддерживали путем серийного пассирования в инкубаторе с 5% CO ₂ при 37 ° C.

Биораспределение EBV LMP-2-специфических аффител у мышей с ксенотрансплантатом опухоли. Модель

. Динамическое распределение и опухолевую способность специфичных для EBV LMP-2 аффител оценивали на голых мышах, используя оптическую визуализацию в ближней инфракрасной области (NIR).Самок мышей nu / nu (Balb / C) в возрасте 4 недель использовали для создания моделей опухоли ксенотрансплантата C666-1. Мыши, использованные в этом исследовании, были приобретены у компании Shanghai Slac Laboratory Animal CO. LTD (Шанхай, Китай). Примерно 4 × 10 ⁶ клеток / 100 мкл PBS подкожно инокулировали в лопаточную область голых мышей. Когда объем опухоли достигал приблизительно 300 ~ 500 мм ³ , мышей использовали для визуализации NIR. Белки аффибоди, специфичные для LMP-2 EBV, и аффибоди Z _WT метили молекулами Dylight755 (Thermo Fisher Scientic, США) в соответствии с рекомендациями производителя.Впоследствии 15,4 нмоль меченых белков affibody, растворенных в 100 мкл PBS, вводили через хвостовую вену под изофлурановой анестезией, и визуализацию проводили с использованием системы визуализации NIR (Cri Maestro 2.10, США) в различные моменты времени после инъекции.

Клонирование, экспрессия и очистка аффитоксина

Токсиновая часть PE38KDEL [32,56] была связана с С-концом Z142 гибким линкером (Gly ₄ Ser) ₃ . Вкратце, последовательность ДНК, соответствующая PE38KDEL с линкерным доменом (Gly ₄ Ser) ₃ , была синтезирована и клонирована в вектор pET21a (+) между сайтами Eco R и Xho для создания рекомбинантной плазмиды pET21a ( +) / PE38KDEL.Последовательность ДНК Z142 была клонирована в вектор pET21a (+) / PE38KDEL между Nde Ⅰ и Eco RⅠ сайтами для создания рекомбинантной плазмиды pET21a (+) / Z _{EBV LMP-2} affitoxin 142. Между тем Z _WT использовали в качестве отрицательного контроля. С помощью аналогичного метода, упомянутого выше, была сконструирована плазмида аффитоксина pET21a (+) / Z _WT . Наконец, две рекомбинантные плазмиды были подтверждены секвенированием ДНК. Экспрессия аффитоксина Z _{EBV LMP-2} 142 (обозначенного как Z142X) и аффитоксина Z _WT (обозначенного как Z _WT X) в E . coli BL21 (DE3) индуцировали 0,8 мМ IPTG и подтверждали с помощью SDS-PAGE и вестерн-блоттинга. Затем слитые белки очищали агарозной смолой Ni-NTA.

Обнаружение иммунофлуоресценции

Чтобы определить, могут ли молекулы аффитоксина или аффитоксина связываться с нативными белками LMP-2, выполняли IFA, как описано ранее, с небольшими модификациями [30,31]. Вкратце, клетки EBV ⁺ , включая клетки B95-8, C666-1, CNE-2Z и EBV-отрицательные клетки меланомы A375, высевали в 24-луночный планшет в инкубаторе с 5% CO ₂ при 37 ° C.Через 24 часа среду заменяли свежей средой с добавлением 7,5 мкМ аффитела или молекул аффитоксина или дикого контроля Z _WT . После инкубации в течение 6 ч клетки фиксировали 4% параформальдегидом при комнатной температуре (КТ) в течение 10 мин. Затем клетки подвергали проницаемости 0,3% Trixon X-100 при комнатной температуре в течение 10 мин с последующим блокированием 20% FBS в RPMI-1640. Через 2 часа клетки использовали для анализа связывания аффитных молекул с белками LMP-2 EBV мышиными анти-His mAb с последующим добавлением вторичных антител FITC-конъюгированных козьих антимышиных IgG (H + L) (Life Technologies, Карлсбад, Калифорния, США) за 1 час.Аналогичным образом, клетки использовали для обнаружения связывания молекул аффитоксина с белками LMP-2 EBV с помощью мышиных анти-His mAb, кроличьей поликлональной антисыворотки против SPA-Z и поликлональной антисыворотки мыши PE38KDEL с последующим добавлением вторичных антител, конъюгированных с FITC, козьих антимышей. IgG (H + L) или FITC-конъюгированные козьи антикроличьи IgG (H + L) (Life Technologies, Карлсбад, Калифорния, США) при комнатной температуре в течение 1 часа. Ядра клеток контрастно окрашивали 50 мкг / мл йодида пропидия (PI) (Beyotime Biotech Co. Ltd, Китай) при комнатной температуре в течение еще 5 мин и флуоресценцию наблюдали с помощью конфокального флуоресцентного микроскопа (микроскоп Leica TCS SP2).

Для дальнейшего подтверждения специфического связывания LMP-2, специфичного аффитела с нативным LMP-2, совместную локализацию определяли в клетках EBV ⁺ C666-1 с помощью конфокального двойного иммунофлуоресцентного анализа. Процедура аналогична описанной выше. Крысиные mAb против LMP-2A (Abcam, Clone 15F9), Cy3-конъюгированные козьи антитела против IgG крысы (Beyotime Biotech Co, Ltd., Китай) служили соответственно в качестве первичных и вторичных антител. Ядра клеток контрастно окрашивали 10 мкг / мл Hoechst33342 (Beyotime Biotech Co.Ltd, Китай).

In vitro цитотоксичность эффективность аффитоксина Z142X

Для оценки эффективности Z142X был проведен анализ жизнеспособности клеток с помощью набора для подсчета клеток 8 (CCK-8, Dojindo, Japan) в соответствии с руководством, предоставленным производителем. Вкратце, клетки B95-8, C666-1, CNE-2Z и A375 инокулировали в 96-луночный планшет из расчета 1 × 10 ⁴ клеток / лунку с последующей инкубацией с Z142X в различных концентрациях (0,04, 0,07, 0,14, 0,28, 0,56, 1,11 и 2,22 мкМ).Клетки, обработанные такими же концентрациями Z _WT X, использовали в качестве отрицательного контроля. Впоследствии выжившие клетки исследовали соответственно после инкубации в течение 0 часов, 3 часов, 6 часов, 12 часов, 24 часов, 48 часов и 72 часов с использованием набора CCK-8. Поглощение измеряли при 450 нм с использованием считывающего устройства для микропланшетов, а жизнеспособность клеток выражали в процентах относительно контрольных клеток. Значения половины максимальной ингибирующей концентрации (IC50) рассчитывали с использованием программного обеспечения GraphPad Prism (GraphPad Software, Inc.).

Анализ острой токсичности аффитоксина Z142X на мышах

Самкам мышей BALB / c в возрасте 6 недель (n = 4 ~ 7 на группу) вводили указанные дозы (55.6, 111, 222, 333, 444, 556, 667 нмоль / кг) Z142X путем внутривенной инъекции в хвостовую вену. Принимались во внимание любые зарегистрированные случаи смерти или состояния смерти, которые произошли в течение 2-недельного периода после инъекции. Все эксперименты проводили в трех повторностях. Значение летальной дозы 50% (LD50) рассчитывали с помощью программного обеспечения GraphPad Prism 5.0.

Противоопухолевая эффективность аффитоксина Z142X на моделях опухолей с ксенотрансплантатом мышей

Терапевтическую эффективность Z142X оценивали с использованием мышей с опухолями C666-1 и CNE-2Z.Вкратце, голых мышей BALB / c возрастом 3-4 недели были случайным образом разделены на 5 групп (n = 5 для каждой группы). Создание моделей опухолей мышей с ксенотрансплантатом C666-1, CNE-2Z и A375 было описано выше. Вкратце, опухоль была инициирована подкожной инъекцией 4 × 10 ⁶ клеток, которые были суспендированы в 100 мкл PBS, в правую лопаточную область голой мыши. Когда объем опухоли достигал 50 ~ 100 мм ³ , мышей обрабатывали 100 мкл Z142X (100 нмоль / кг), Z _WT X (100 нмоль / кг), Z142 (100 нмоль / кг), PE38KDEL (100 нмоль / кг). нмоль / кг) или PBS соответственно.Указанные агенты вводили каждые два дня 15 раз через хвостовую вену. Терапевтическая эффективность и систематическая токсичность белков аффитоксина оценивали на основании ежедневных измерений объема опухоли и массы тела. Опухоли мышей пяти вышеуказанных групп удаляли и взвешивали после завершения всех обработок и периода наблюдения.

Статистический анализ

Данные были представлены как среднее ± стандартное отклонение (SD). Статистический анализ значимости между группами проводился с использованием двустороннего непарного критерия Стьюдента, и P <0.05 считался статистически значимым. Все расчеты проводились в программе SPSS16.0.

Заявление об этике

Это исследование было проведено в строгом соответствии с Положением об управлении делами в отношении экспериментальных животных Государственной комиссии по науке и технологиям. Все исследования на животных и протоколы были одобрены этическим комитетом Медицинского университета Вэньчжоу (номер лицензии: wydw2017-0504).

Дополнительная информация

S1 Рис.

SDS-PAGE (A) и вестерн-блоттинг (B-C) анализ очищенного слитого белка EBV LMP-2 B-эпитопов.(A) Очищенный гибридный белок с меченным His LMP-2 B-эпитопом при окрашивании кумасси синим. ( B и C) Вестерн-блоттинг слитого белка с His-меченным LMP-2 B-эпитопом моноклональным анти-His антителом (B) или сывороткой пациента EBV ⁺ NPC (C). Были проанализированы два белковых экстракта.

(TIF)

S2 Рис.

Репрезентативный скрининг ELISA на связывание LMP-2 аффитных молекул.

Супернатанты (100 мкл), содержащие потенциальные аффитные молекулы, загружали в лунки для микротитрования, которые были предварительно покрыты 0.45 мкМ (100 мкл / лунка) слитого белка с B-эпитопом LMP-2 EBV. В общей сложности 282 клона из библиотеки фагового дисплея были проверены на его взаимодействие со слитым белком LMP-2 B-эпитопа EBV с помощью анализа ELISA, и клоны с высокой степенью взаимодействия (интенсивность сигнала) с LMP-2 были отобраны для секвенирования ДНК для проверки аффибоди. кодирование.

(TIF)

S3 Рис.

Аминокислотные последовательности 4 верхних молекул аффитела, выбранных в качестве связывающих веществ EBV LMP-2.

Положения аминокислот 9, 10, 11, 13, 14, 17, 18, 24, 25, 27, 28, 32 и 35 рандомизированы при выборе фагового дисплея.Винтовые конструкции представлены в прямоугольниках. Горизонтальные точки указывают на идентичные аминокислотные остатки в LMP-2-специфическом аффибоди с аминокислотными последовательностями Z-домена исходного аффибоди-каркаса (Z _WT ).

(TIF)

S4 Рис.

Типичные сенсограммы связывания в биосенсорных анализах не показали взаимодействия аффитела Z142 с иммобилизованным рекомбинантным MAGE-A3.

Связывание 1,6, 3,2, 6,4, 12,8, 25,6, 51,2 нМ молекулы Z142 Affibody с MAGE-A3 на сенсорном чипе анализировали с помощью анализа связывания на основе SPR.

(TIF)

S5 Рис.

Z142X и Z142 ингибируют рост клеток EBV ⁺ B95-8 в зависимости от концентрации. Клетки

EBV ⁺ B95-8 в 96-луночном планшете обрабатывали различными концентрациями Z142X, Z _WT X, Z142 или PE38KDEL в течение 72 часов. Жизнеспособность клеток B95-8 снижалась с увеличением концентрации Z142X и Z142. Z _WT X и PE38KDEL показали лишь незначительное влияние или совсем не повлияли на жизнеспособность клеток B95-8, оцененную с помощью набора CCK-8.

(TIF)

S6 Fig

Z142X убивает EBV ⁺ клетки in vitro в зависимости от концентрации.

Клетки EBV ⁺ (B95-8, C666-1 и CNE-2Z) и EBV-отрицательные клетки (клетки меланомы A375) в 96-луночном планшете обрабатывали различными концентрациями Z142X или Z _WT X для 72 ч. Жизнеспособность клеток EBV ⁺ (клетки B95-8, C666-1 и CNE-2Z) снижалась с увеличением концентрации Z142X, тогда как EBV-отрицательные клетки меланомы A375 оставались полностью жизнеспособными.Z _WT X не влиял ни на какие клеточные линии. Жизнеспособность клеток оценивали с помощью набора CCK-8.

(TIF)

S7 Рис.

Z142X или другие контрольные агенты не обладают эффектом подавления опухоли у мышей, несущих EBV-отрицательные ксенотрансплантаты melonama A375.

Мышам с опухолями внутривенно вводили 100 нмоль / кг Z142X или равное молярное количество контрольных агентов или такой же объем PBS каждые два дня 15 раз через хвостовую вену. Рост опухоли контролировали, ежедневно измеряя объем опухоли.В конце эксперимента все опухолевые трансплантаты были удалены и взвешены. Контрольные агенты (Z _WT X, PE38KDEL или PBS) не проявляли какого-либо противоопухолевого действия на этих мышей, а также аффитоксин Z142X и аффитоксин Z142 не проявляли никакого действия на рост опухоли у мышей, несущих ксенотрансплантаты опухоли A375. n = 5. Использовался двухсторонний непарный тест Стьюдента t .

(TIF)

S1 Таблица

Кинетические данные биосенсорного анализа SPR молекул Affibody во взаимодействии с слитым белком LMP-2 B-эпитопа.