Улитка 2108 на ниву: Доступ ограничен: проблема с IP

Содержание

Установка улитки от ВАЗ-2108 в классику

Итак, сегодня мы расскажем вам как установить улитку от печки ВАЗ-2108 в классику на примере печки ВАЗ-2107, в принципе без всяких корректировок данная инструкция подойдет для ВАЗ-2104 и ВАЗ-2105 и с небольшими корректировками для любой другой классической печки. Основные нюансы в воздуховводах, они разные. Ведь я думаю что любой владелец классики мечтает о печке, которая будет равномерно дуть из всех сопел и вразы быстрее нагревать салон и размораживать стекла. Классическая печка имеет массу недоработок в этом плане как по мощности так и исполнению, про задних пассажиров вообще молчу, о них никто не позаботился, но и для передних водителя и пассажира не все так гладко, боковые передние стекла (особенно водительское) почти не обдуваются а кое где наоборот очень даже жарко, я бы сказал излишне Итак, мы решим эту проблему кардинально — установим улитку (моторчик печки с корпусом) от ваз-2108 (восьмерки) в классику. Для этого нам понадобится собственно сама улитка от восьмерки или девятки в сборе, с корпусом, материал для изготовления нижней части корпуса классической печки, подойдет оргстекло или поликарбонат, различные шурупчики, герметик, скотч, болгарка, нож или ножовка, прямые руки, чертежи и терпение.

Демонтируем нижнюю часть штатной печки с машины и отпиливаем болгаркой от нее всю нижнюю часть — она будет собрана заново под улитку от восьмерки:

Затем начинаем вырезать и приставлять по месту новые стенки для нашей печки из поликарбоната или другого выбранного вами материала, ориентируясь на приведенные ниже на схеме размеры, но перед оканчательной сборкой и герметизацией рекомендуем проверить по месту, малоли что.

Вобщем вырезаем первую стенку и прикручиваем как на фото:

Из средней части печки вырезаем диффузор, он нам больше не нужен.

Посмотрите внимательно на два выступа по бокам которые я не обрезал. Это упоры для радиатора — и их обрезать ни в коем случае нельзя. Далее ставим среднюю часть на нижнюю и примеряем улитку улитка должна быть как можно выше но не вылезать за пределы упоров радиатора, помечаем где у нас должно быть дно. дальше вырезаем и примеряем днище печки. Стоит учитывать что зад печки — самое узкое место у нас, стараемся сделать ее как можно меньше.

Теперь изготавливаем внутреннюю перегородку которая собственно и разделит нашу печку для улитки — из одной части она засасывает воздух, а в другую дует:

Отверствие куда вставляется сопло улитки нужно разместить ровно по центру чтобы обдув был равномерным. 

Примеряем конструкцию на ее место в автомобиле:

Если все нормально — устанавливаем и закрепляем улитку как на фото:

 Обратите внимание — на последнем фото я уже высверлил отвертствия под вывод будущих воздуховводов. Тут поле для фантазии просто непаханное, их можно сделать из чего угодно — гофры, труб подходящего диаметра и т.д.

У нас конечная конструкция выглядела следующим образом:

Что бы все это подключить мы коронкой насверлили в удобных местах отверствия под сантехнические трубы 20 мм.

  Следующим образом были изготовлены переходы под штатные воздуховводы:

Под воздуховводы на лобовое стекло ничего делать не нужно — он встает на родные места 🙂

Просто мы его дополнительно прогерметезировали дабы минимизировать потери воздуха

Ну и не забываем врезать резистор от восьмерки в корпус печки чтоб спираль попала в обдуваемое улиткой место — иначе накалиться и сгорит нафиг 🙂

Вот такая лепота у нас получается.

Подключам все шланги, можно вывести даже в ноги к задним пассажирам, тут уж у кого на что фантазии хватает, мощность у восьмерочной улитке очень большая, на всех потребителей хватит. Получаем равномерный обдув из всех сопел, значительно более мощный поток воздуха нежели от штатной печки, так же желательно установить помимо восьмерочного резистора так же и восьмерочный переклюатель печки на три скорости 🙂 Вобщем вот мы изготовили и установили улитку от восьмерки в ВАЗ-2107, ВАЗ-2104 и ВАЗ-2105 на ваш выбор. Если что то непонятно — спрашивайте у нас на форуме в

клубе ВАЗ классика.

 

Печка/отопитель нива | Festima.Ru — Мониторинг объявлений

ТОЛЬKО HОBЫE ЗАПЧАСТИ !!! Cтоимoсть и нaличие уточняйтe пo тeлeфону Дocтaвкa тpанспоpтными кoмпaниями по Рoccии Рolo/Полo,Раssаt/Пассат,Jеttа/Джeттa,Gоlf/Гольф,Тouarеg/Туaрег,Тiguan/Tигуан,Тrаnsрorter/Трaнспоpтёp,Caddy/Kадди,Аmarоk/Амaрок,Beеtlе/Битл,Воrа/Бора,Саrаvеllе/Каравелла,Сrаftеr/Крафтер,Мultivаn/Мультивен,Тоurаn/Туран,Shаrаn/Шаран Sоlаris/Солярис,Sоnаtа/Соната,Gеtz/Гетц,Сrеtа/Крета,Grаnd Stаrех/Гранд Старекс,iх35,iх55,i40/ай 40,i30/ай 30,i20/ай 20,Еlаntrа/Элантра,Sаntа Fе/Санта Фе,Тuсsоn/Туксон/Туссан,Роrtеr/Портер,Маtriх/Матрикс,Н-1/Н1/Н100/Н-100,Маtriх/Матрикс,Тагаз 100,80,А3/А3,А4/А4,А5/А5,А6/А6,А7/А7,А8/А8,Q3,Q5,Q7,ТТ Disсоvеry/Дискавери,Frееlаndеr/Фрилендер,Lаnd/Ленд,Rаngе/Рендж,Еvоquе/Эвок,Sроrt/Спорт Fаbiа/Фабия,Осtаviа/Октавия,Rарid/Рапид,Suреrb/Суперб,Yеti/Йети,Коdiаq/Кодиак,Rооmstеr/Румстер 850,940,С30/С30,S40/С40,S60/С60,S80/С80,ХС60/ХС60,ХС70/ХС70,ХС90/ХС90 RХNХ GХ LХ GS IS LS ЕS 570 300 350 330 250 470 460 РХ ЛХ ЛС НХ ИС ЕС Сruzе/Круз,Аvео/Авео,Lассеti/Лачетти,Lаnоs/Ланос,Sраrk/Спарк,Сарtivа/Каптива Соbаlt/Кобальт,Ерiса/Эпика,Nivа/Нива,Таhое/Тахо,ТrаilВlаzеr/Трейлблейзер Insigniа/Инсигния,Аstrа/Астра,Vесtrа/Вектра,Zаfirа/Зафира,Меrivа/Мерива,Аntаrа/Антара,Соrsа/Корса,Моkkа/Мокка,Оmеgа/Омега Qаshqаi/Кашкай,Рrimеrа/Примера,Аlmеrа/Альмера,Раtrоl/Патрол,Раthfindеr/Патфайндер,Махimа/Максима,Х-Тrаil/Икс трейл,Nоtе/Ноут/Ноте,Тiidа/Тиида,Jukе/Жук/Джук,Теаnа/Теана,Мurаnо/Мурано,Мiсrа/Микра,Сеfirо/Цефиро,Сubе/Куб,Еlgrаnd/Эльгранд,Lеаf/Лиф,Маrсh/Марч,Теrrаnо/Террано,Sunny/Санни,Sеrеnа/Серена,Fugа/Фуга Rехtоn/Рекстон,Асtyоn/Актион,Кyrоn/Кайрон Орtimа/Оптима,Riо/Рио,Сееd/Сид,Sроrtаgе/Спортейдж,Сеrаtо/Церато,Sресtrа/Спектра,Vеngа/Венга,Sоrеntо/Соренто,Рiсаntо/Пиканто,Sоul/Соул/Сол,Stingеr/Стингер,Vеngа/Венга,Саrnivаl/Каривал,Маgеntis/Маджентис Lоgаn/Логан,Dustеr/Дастер,Меgаnе/Меган,Sаndеrо/Сандеро,Карtur/Каптур,Fluеnсе/Флюенс,Lаgunа/Лагуна,Symbоl/Симбол,Каngоо/Кенго/Кангу,Сliо/Клио,Коlеоs/Колеос Саrismа/Каризма,Соlt/Кольт,Раjеrо/Паджеро,АSХ/АСХ,Оutlеndеr/Аутлендер,Lаnсеr/Лансер,Моntеrо/Монтеро,Gаlаnt/Галант,L200/Л200,Dеliса/Делика,Grаndis/Грандис 3,323,6,626,СХ-5/СХ-5,СХ-7/СХ-7,СХ-9/СХ-9,МРV/МПВ,RХ-8/РХ-8,Dеmiо/Демио,Fаmiliа/Фамилия,Рrеmасy/Премаси,Тributе/Трибут Ассоrd/Аккорд,Сiviс/Цивик,НRV/НR-V/ХРВ,Jаzz/Джаз,СRV/СРВ,Еlysiоn/Элизион,Fit/Фит,Frееd/Фрид,Оdyssеy/Одиссей,Рilоt/Пилот,Stерwgn/Степвагон,Strеаm/Стрим М25,М35,М37,М45,М56,G25,G35,G37,FХ30,FХ35,FХ37,FХ45,FХ50,ЕХ25,ЕХ35,ЕХ37,JХ,Q30,Q45,Q50,Q60,Q70,QХ4,QХ30,QХ50,QХ56,QХ60,QХ70,QХ80,М25,М35,М37,М45,М56,Г25,Г35,Г37,ФХ30,ФХ35,ФХ37,ФХ45,ФХ50,ЕХ25,ЕХ35,ЕХ37 Рiсаssо/Пикассо,С2/С2,Веrlingо/Берлинго,С5/С5,С4/С4,С3/С3,Jumреr/Джампер,С-Сrоssеr/С-Кроссер,С-Еlysее/Элизе,Хsаrа/Ксара 307,2008,208,206,207,107,Раrtnеr/Партнер,Вохеr/Боксер,4008,408,407,406,3008,308,4007,508 Dоblо/Добло,Рuntо/Пунто,Аlbеа/Альбеа,Duсаtо/Дукато Fоrеstеr/Форестер,Imрrеzа/Импреза,Lеgасy/Легаси,Оutbасk/Аутбек,Тribеса/Трибека Grаnd Vitаrа/Гранд Витара,SХ4,Swift/Свифт,Jimny/Джимни,Еsсudо/Эскудо Gеntrа/Джентра Nехiа/Нексия Еsреrо/Эсперо Маtiz/Матиз Аmulеt/Амулет Воnus/Бонус IndiS/Индис Fоrа/ФораКimо Вrееz/Бриз Smily/Смайли Sоlаnо/Солано Х50/Х50 Х60/Х60 mi-DО/ми-До,оn-DО/он-До Веста/Vеstа А С СL G GLА GL GLК R,Sрrintеr VАNЕО Vitо Серии: А С Г ГЛА ГЛ ГЛК Р Спринтер Ванео Вито В кузовах: W129 W140 W163 W164 W166 W201 W203 W204 W205 W207 W211 W212 W215 W216 W218 W219 W221 W222 W245 W246 W251 140 163 164 166 201 202 203 204 205 207 210 211 212 215 216 218 219 221 222 245 246 251 1 3 4 5 6 7 Х1 (Х1) Х3 (Х3) Х5 (Х5) Х6 (Х6) Z3 Z4 в кузовах: F20 F21 F52 Ф20 Ф21 Ф52 F22 F87 М2 F23 F45 F46 Ф22 Ф87 М2 Ф23 Ф45 Ф46 G30 Е63 Е64 F06 F12 F13 Е63 Е64 Ф06 Ф12 Ф13 G11 G12 Ф01 Ф02 Ф03 F01 F02 F03 F04 Ф04 G11 G12 I01 i3 I12 i8 Е84 F48 F49 Е84 Ф48 Ф49 Е83 F25 Е83 Ф25 F26 Ф26 Е53 Е70 F15 Е90 Е91 Е92 Е93 F30 F80 F31 F34 F35 F35 Е90 Е91 Е92 Е93 F07 F10 F11 F18 G30 Ф30 Ф80 Ф31 Ф34 Ф35 Ф35 F32 F82 М4 F33 F83 F36 Ф32 Ф82 М4 Ф33 Ф83 Ф36 Ф07 Ф10 Ф11 Ф18 F85 Е53 Е70 Ф15 Ф85 Е71 F16 F86 Е71 Ф16 Ф86 Е85 Z4 Е86 Е89 М12 Е85 Z4 Е86 Е89 М12 R50 R53 R56 F55 F56 Саmry/Камри,Аvеnsis/Авенсис,Соrоllа/Королла,RАV4/РАВ 4,Рrius/Приус,Lаnd Сruisеr/Ленд Крузер,Рrаdо/Прадо,Аuris/Аурис,Маrk/Марк,Yаris/Ярис,Аlрhаrd/Альфард,Саldinа/Калдина,Саrinа/Карина,Сrоwn/Краун/Кроун,Нighlаndеr/Хайлендер,Сеliса/Селика,Нiluх/Хайлюкс Fосus/Фокус,S-Мах/С Мах/С Мах/С Макс,Моndео/Мондео,Fusiоn/Фьюжн,Кugа/Куга,Fiеstа/Фиеста,Тrаnsit/Транзит, Еsсаре/Эскейп,Ехрlоrеr/Эксплорер,Gаlахy/Гэлакси,Маvеriсk/Маверик,Rаngеr/Рейнджер/Ренжер Вентилятор моторчик отопителя печки салона

Автозапчасти

Тихая печка на ниву 21214.

Отопитель (печка) и система вентиляции. Альтернатива штатной печке

Каждый владелец «Нивы» знает, что печка – это одна из самых серьезных недоработок этого автомобиля. Печка Нива 21213, как и любой другой Нивы, обладает сразу двумя недостатками, причем каждый из них является критичным в плане комфорта.

  1. Повышенная шумность. При работе вентилятор отопителя издает раздражающие и визгливые звуки, которые раздражают водителя;
  2. Низкая производительность. Даже в режиме максимальной мощности салон плохо прогревается, а при сильном морозе печка не справляется со своими функциями и стекла замерзают, ухудшая обзор водителю.

К недостаткам также следует отнести только два положения регулировки мощности обдува. Особенно это чувствует осенью – в минимальном режиме салон не прогревается, а в максимальном – слишком жарко.

Альтернатива штатной печке

Отличной альтернативой штатной печки ВАЗ-21213 является печка от «восьмерки». В отличие от «нивовской», она совершенно бесшумная в работе, отлично прогревает салон и имеет несколько скоростей, что предоставляет более широкие возможности по выбору диапазона обдува.

Модернизацию можно провести двумя способами: самостоятельно или же купив уже готовый полный комплект отопителя.

Самостоятельная установка новой печки

Несмотря на то, что восьмерочный отопитель подходит к Ниве, все равно придется немного попотеть, чтобы его установить – продукция отечественного автопрома не подразумевает, что какая-то деталь просто заменяется без усилий. Обязательно нужно будет подточить, рассверлить, переделать и так далее, чтобы все детали нормально стали.

К печке от ВАЗ-2108 сразу же следует приобрести новый резистор, переключатель и «улитку». Порядок действий следующий:

  • Примерить двигатель от новой печки к воздуховоду и вырезать новое посадочное отверстие. Устанавливать двигатель следует так, чтобы он не упирался в капот, поэтому старайтесь посадить его в воздуховод поглубже;
  • Выведите провод из коробки, сам двигатель тщательно закрепите и герметизируйте;
  • Из нержавейки вырежьте пластину, которую нужно установить под сопло;
  • Верхний проем также нужно закрыть;
  • Уберите штатную задвижку, так как она в новой печке не понадобиться;
  • Установите воздуховод на место.

Если нет желания заниматься конструированием, можно приобрести уже готовый комплект в сборе. В него входят улитка, корпус с уже подготовленным посадочным местом под двигатель, реостат, переключатель скорости, набор проводов, а также крепежи и уплотнительные соединения.

Если вы являетесь обладателем Нивы-21213 и влюблены в это транспортное средство, то вряд ли вы откажетесь от него при обнаружении в нём некоторых технических недоработок. В принципе это совершенно правильно, можно оставаться верным своему «железному коню», а при выявлении дефектов самостоятельно попытаться их устранить.

Нива-21213, действительно, нуждается в некотором вашем вмешательстве, совсем не будет лишним тюнинг печки Нива.

В летний период вы не сможете заметить неудобств, а вот с наступлением холодов без усиленного гардеробного оснащения в виде ватных штанов и куртки вы точно не сможете обойтись.

Постоянно ощущать себя «танкистом» как-то не хочется, поэтому большинство владельцев этого автомобиля принимают решение закатить рукава и осуществить доработку печки собственной . Кстати, такие же проблемы присущи ещё одной отечественной модели — УАЗ, владельцы которого также находятся в активном поиске, что предпринять, чтобы повысить работоспособность печки.

Процесс доработки системы отопления

Некоторые предлагают избавиться от вентилятора, установленного производителем, а взамен его установить вентилятор с «восьмёрки».

Если вы тоже решились на проведение такой замены, вам нужно дополнительно определиться, оставите ли вы штатное управление печкой родное или также замените его «восьмёрочным» аналогом.

Определившись со вторым вариантом действий, позаботьтесь о приобретении таких дополнительных элементов:

  • переключатель скоростей вентилятора;
  • дополнительный резистор для печки.

Итак, после того как вы полностью подготовили все необходимые составляющие, можно приступать непосредственно к процессу доработки вентилятора.

Первоначально следует демонтировать старую коробку вохдухопритоков. К сожалению, невзирая на то, что для этого требуется выкрутить всего лишь четыре гайки, обойтись без посторонней помощи не удастся. Напарнику будет нужно удерживать винты под капотом, тогда как вы будете их выкручивать, воспользовавшись ключом-трубкой.

После этого можно беспрепятственно извлечь воздухозаборник. Почистите его, если он в этом нуждается, а затем срежьте небольшое количество пластика, чтобы обеспечить достаточное пространство для работы нового вентилятора.

Установите вентилятор и внимательно осмотрите, что может выступать в качестве помех для работы установленного вентилятора. Если таковые преграды обнаруживаете, аккуратно их срезайте.

После того как вы убедитесь, что больше нет ничего, что может препятствовать , зафиксируйте его при помощи герметика.
Вокруг сопла вентилятора находятся небольшие зазоры, важно их устранить, прикрыв любым материалом. Это позволит предотвратить утечку тёплого воздуха.

Теперь собранный вентилятор внедряется обратно в то пространство, в котором ранее «обитал» его старый аналог. Всё надёжно закрепляется и проверяется закрытие и открытие капота. В отдельных случаях после внедрения «инородного» вентилятора не удаётся нормально закрывать капот.

Если всё нормально, подсоедините все провода, а также установите новые элементы управления. По завершении выполненных работ обязательно проконтролируйте свой результат в действии.

Печка должна работать отлично, а в салоне автомобиля очень быстро должен распространяться тёплый воздух.

Замена крана

К сожалению, виновниками плохого обогрева Нивы могут выступать не только вентилятор и воздуховод, но и кран самой печки. В частности, его диаметр невероятно мал, что способствует медлительному распространению жидкости по радиатору.

Именно по этой причине многие автовладельцы решаются ещё на один дополнительный тюнинг обогрева салона любимой Нивы, предполагающий замену крана.

Кран, безусловно, придётся позаимствовать у других транспортных средств. В качестве «доноров» для решения такой проблемы могут выступать многие иномарки, но лучшими с финансовой точки зрения являются краны, снятые с Volkswagen или Opel.

Первоначально вам придётся . Этот процесс трудоёмкий, поэтому важно следовать алгоритму, который рекомендуют те владельцы авто, которым ранее приходилось дорабатывать самостоятельно систему отопления, и результат был эффективным.

Откройте капот, найдите хомут, который фиксирует шланг к патрубку, при помощи пассатижей постарайтесь ослабить его. Мастера рекомендуют такие действия совершать в перчатках, поскольку при выполнении таких действий приходится прилагать усилия, рука часто срывается и может быть повреждена, если на ней не будет перчаток.

Следующей вашей задачей будет являться отсоединение уплотнителя, вам нужно просто выкрутить саморезы, фиксирующие этот уплотнитель к перегородке. Далее остаётся этот уплотнитель просто снять. Вещевая полка точно также извлекается, при этом ничего не препятствует выполнению таких действий.

Теперь зайдите со стороны салона и немного ослабьте прижимной винт крана. Далее будет уже просто с рычага крана снять тросик.

Вот теперь вы подобрались непосредственно к самому крану, открутите винты, которые его удерживают. В зависимости от конфигурации радиатора печи количество может изменяться, также вместо винтов могут быть установлены гайки.

Извлеките кран, снимите с него патрубок, также предварительно отвинтив гайки.

Мастера только рекомендуют использовать небольшую хитрость. При креплении крана к радиатору гайки очень часто откручиваются, соответственно, в процессе движения авто теряются. Чтобы предотвратить такие «потери», рекомендуется не просто закрутить гайки, а предварительно их посадить на пластилин.

Итак, процесс модернизации системы отопления может осуществить любой желающий, а в благодарность он получит комфортные условия внутри салона даже в те моменты, когда на улице будет лютовать мороз.

— это головная боль любого «нивовода». Какими принципами руководствовались при ее разработке конструкторы, но кроме как тихим ужасом это не назовешь.

Нельзя сказать, что у нее много недостатков. Их всего два – но этого более, чем достаточно, чтобы задуматься о ее замене или переделке.

Во-первых, она совершенно не справляется со своими функциями. При температуре в диапазоне +10…-5 градусов в салоне еще более-менее тепло. Но как только температура падает ниже -5..-10 градусов, ощущается холод даже на максимальной мощности обдува, не говоря уже о более низких температурах, которые вполне привычны для нашей зимы – в этом случае окна просто замерзают и приходится очищать в них «иллюминаторы».

Во-вторых, при работе на максимальной (второй) скорости вентилятор издает такой шум и визг, что перекрывает даже работу мотора. Не каждый выдержит эту какофонию, поэтому водители уменьшают обдув до первой скорости. Как следствие – машина недостаточно прогреваются и окна начинают замерзать.

Модернизация печки

Чтобы решить эту проблему, есть выход – это переделка печки Нива 21213 . В настоящий момент существуют уже готовые комплекты переделанных печек, за основу в которых взят обогреватель от ВАЗ-2108. Они намного более эффективны, прекрасно справляются со своей задачей даже в сильные холода и совершенно не издают раздражающих звуков. Конечно, на максимальной мощности обдува работу вентилятора слышно, но это несравнимо с тем, как визжит и скрежещет вентилятор «Нивы».

Тем, кто хочет сделать все своими руками, нужно всего лишь купить «восьмерочный» отопитель, резистор, «улитку» и переключатель и установить их на свою «Ниву».

Переделка печки Нива 21213 своими руками выполняется в следующем порядке:

  1. Подготовьте воздуховод к установке двигателя. Для этого нужно вырезать новое посадочное отверстие, при этом старайтесь посадить двигатель как можно ниже в воздуховод, чтобы он не упирался в капот;
  2. Питание двигателя через выходное отверстие выведите из воздуховода;
  3. Хорошо закрепите двигатель в воздуховоде и герметизируйте места креплений;
  4. Подготовьте две пластины из нержавеющей стали, которые нужно вырезать по размерам, а затем установить под сопло и в верхний проем;
  5. Демонтируйте штатную задвижку;
  6. Установите воздуховод с новым двигателем на место.

Переделка печки на Ниве 21213 своими руками необходима при сбое в работе системы отопления автомобиля. Медлить с этим не стоит, ведь неравномерная термическая регуляция приводит к запотевшим стеклам или обледенению. В любом из указанных случаев ухудшается обзор происходящего на дороге. Неисправность вызывает износ отдельных элементов устройства или заводской брак.

Диагностирование неисправности

Потребуется переделка печки, поставляемой в штатной комплектации, в профилактических целях. Много времени процедура не отнимет, зато предотвратит множество проблем в будущем. Водительский опыт говорит о том, что первые сильные морозы подкосят «здоровье» устройства. Список основных слабых мест выглядит следующим образом:

  • оптимальный диапазон рабочей температуры модели 2121 от -5 до +10°С;
  • неспособность прогреть воздух в салоне, если за бортом -8°С и ниже;
  • при увеличении мощности обдува не происходит увеличение температуры;
  • при езде на II передаче шум от печки Нивы становится существенным.

Именно поэтому лучше заблаговременно принять необходимые меры. Альтернатив у водителя немного. С одной стороны, все остается на своих местах. Отопительное устройство используется на минимальной мощности. Во время мягких зим подобное еще терпимо, но с приходом настоящих холодов условия станут невыносимы. С другой стороны, несложно потратить несколько часов для исправления ситуации.

Дальнейшее развитие событий идет следующим образом. Если отопление в машине работает на ½ мощности, можно ограничиться незначительным ремонтом. Главное — убедиться в отсутствии шумов и посторонних стуков, иначе Нива 21213 должна немедленно отправиться на технический осмотр.

Наличие неприятного звукового сопровождения говорит о необходимости замены устройства. В специализированной торговой сети представлены готовые варианты отопительных механизмов на Ниву. При желании таковой собирается самостоятельно.

Второй вариант считается более предпочтительным. При самостоятельной сборке есть возможность в буквальном смысле персонализировать печку. Для выполнения работы своими руками понадобится посетить специализированный магазин или рынок для покупки запчастей.

При покупке выбираются оригинальные детали или аналоги. Главное, чтобы они имели сертификат качества. В противном случае поставить их нельзя. Нелишним будет переписать технические данные транспортного средства, чтобы не превысить рекомендованные заводом-изготовителем параметры.

Технические тонкости процедуры

Эффективность работы новой отопительной системы на Ниве определит не стоимость купленных деталей, а их качество. Для работы понадобятся следующие элементы: автомобильный резистор, отопитель восьмерки и «улитка». Ошибочно полагать, что подойдут только «родные» запчасти для ремонта отопительного устройства. Главное требование — техническая совместимость.

Если возникают сомнения, ясность внесет чертеж системы отопления. Дальнейший порядок действий выглядит следующим образом:

  1. Вырезать новое посадочное отверстие. Делается это аккуратно, ведь от качества подготовительного процесса зависит надежность эксплуатации системы обогрева. Рекомендуется поместить двигатель в воздуховод как можно ниже, иначе устройство будет упираться в капот. Допускать подобного не стоит, иначе вентилятор печки долго не продержится.

  2. Плавно вывести питание двигателя из воздуховода. Для этого используется выходное отверстие.
  3. Правильная установка подразумевает надежное закрепление двигателя в воздуховоде. После этого автомобильным герметиком уплотняются все без исключения места креплений. Настоятельно рекомендуется ничего не пропустить. В противном случае из-за вибрационных нагрузок и воздействия внешних факторов схема подключения печки будет нарушена.
  4. Взять 2 пластины из нержавейки, которые адаптируются под размеры сопла и верхнего проема. Измерения проводятся несколько раз. Педантичность исключит необходимость последующей доработки.
  5. При помощи гаечного ключа и отвертки снимается установленная заводом-изготовителем задвижка. Использовать инструменты необходимо аккуратно. Достаточно одного неосторожного движения, чтобы 21213 потребовал дорогостоящего ремонта.
  6. Рекомендуется отказаться от еще одного отопительного устройства в машине. Вторая печка тепла не добавит, а вот нагрузку на «движок» увеличит в несколько раз.
  7. Завершается процесс монтажом нового воздуховода с двигателем.

Проверяется отопительная система нового образца пробным включением. Рекомендуется плавно переключать режимы. На каждом из них устройство должно находится не менее 5-7 минут. Задача водителя — убедиться в том, что работа системы не сопровождается посторонними шумами и вибрацией.

Как уже было сказано ранее, подобный выбор не отражается на качестве работы отопительной системы. При этом автослесари делают несколько оговорок. Тем, кто планирует использовать печки ВАЗ, нелишним будет проверить систему питания. У некоторых модификаций она отличается. Именно поэтому все действия согласуются с чертежами.

Допускается использование отопителя ВАЗ 2108 при условии соблюдения двух рекомендаций. Во-первых, посадочное гнездо на 1-2 см больше размера устройства. Дополнительная площадь снизит вибрационное воздействие. Во-вторых, переключатель устанавливается с учетом специфики отопительной системы ВАЗ. Меньше придется повозиться, когда необходима незначительная доработка системы.

Вентиляционная система обновляется за 1-2 часа в зависимости от степени износа движка.

Если установленная заводом-изготовителем «улитка» не имеет следов физического износа, необходимо только заменить сам «движок» отопителя.

Хуже, если заводская комплектация модели Шевроле имеет производственные дефекты. Рекомендуется полная замена устройства. Это сэкономит время.

Работа системы отопления определяет комфортность и безопасность езды. Водитель постоянно отслеживает эффективность работы системы. В случае появления посторонних шумов необходимо срочно провести технический осмотр.

Отопитель

1 – боковое сопло;
2 – воздухопровод бокового сопла;
3 – воздухопровод обогрева ветрового стекла;
4 – центральные сопла;
5 – тяга управления заслонкой воздухопритока;
6 – заслонка воздухопритока;
7 – радиатор;
8 – уплотнитель отопителя;
9 – кожух радиатора;
10 – отводящий патрубок;
11 – подводящий патрубок;

12 – кран;
13 – воздухораспределительная крышка;
14 – кожух вентилятора;
15 – крыльчатка;
16 – электродвигатель;
17 – тяга управления краном;
18 – тяга управления заслонкой обогрева ветрового стекла;
19 – кронштейн рычагов управления отопителем;
20 – рукоятка управления заслонкой воздухопритока;
21 – рукоятка управления заслонкой обогрева ветрового стекла;
22 – рукоятка управления краном.

Схема работы отопителя


1 – воздухораспределительная крышка;
2 – кожух вентилятора;
3 – электродвигатель вентилятора;
4 – крыльчатка;
5 – радиатор;
6– подводящий патрубок;
7 – отводящий патрубок;
8 – кожух радиатора;
9 – заслонка воздухопритока;
10 – коробка воздухопритока;

11 – воздухопровод обогрева ветрового стекла;
12 – заслонка центрального сопла;
13 – центральное сопло;
14 – рукоятка управления краном;
15 – рукоятка управления заслонкой обогрева ветрового стекла;
16 – рукоятка управления заслонкой воздухопритока;
17 – кронштейн рычагов управления;
18 – заслонка обогрева ветрового стекла;
19 – тяга управления заслонкой обогрева ветрового стекла.

Система вентиляции – приточно-вытяжная. При движении автомобиля воздух нагнетается в салон естественным напором через щели воздухозаборника на капоте и отсасывается через отверстия в задних стойках крыши. Для увеличения циркуляции воздуха при движении можно опустить стекла передних дверей, а при низкой скорости – включить электровентилятор. Потоки воздуха в салоне распределяются воздухопроводами, расположенными внутри приборной панели. На ветровое стекло воздух поступает через верхние щелевидные сопла на панели приборов, на боковые стекла – через боковые и, частично, центральные сопла (с направляющими потока воздуха), к ногам – через отверстия в кожухе отопителя (при откинутой крышке). Для управления распределением воздушных потоков служат средний и нижний рычаги на центральной консоли панели приборов, а также направляющие центральных сопл и их регуляторы.

Система отопления (печка) – жидкостная, объединенная с системой охлаждения двигателя. Радиатор отопителя установлен в консоли панели приборов в пластмассовом кожухе и уплотнен по периметру поролоновой лентой. Нагрев воздуха зависит от степени открытия крана, регулирующего поток жидкости через радиатор. Кран установлен на входе в радиатор и управляется верхним рычагом на центральной консоли.

Электродвигатель вентилятора МЭ-255 – коллекторный, постоянного тока, с возбуждением от постоянных магнитов. Частота вращения вентилятора регулируется трехпозиционным переключателем на панели приборов. В зависимости от выбранной скорости электродвигатель подключается к бортовой сети автомобиля напрямую (большая частота) или через дополнительный резистор (малая частота). Частота вращения вала электродвигателя с крыльчаткой при напряжении 12 В и температуре воздуха 25±10°С – 3000±150 мин –1 . Потребляемая сила тока при максимальной частоте вращения – не более 4,5 А.

Крыльчатка вентилятора закреплена на валу электродвигателя. Электродвигатель ремонту не подлежит при выходе из строя его заменяют.

Если вода попадает в салон через печку

Как усилить обогрев отопителя (вместо второй печки)

(совет от С. Лисицкого)

На моей Ниве ВАЗ-21310 зимой при небольших оборотах двигателя отопитель не справляется с прогревом салона. Чтобы улучшить циркуляцию жидкости в радиаторе печки, установил дополнительный прокачивающий насос от Газели. Для этого купил два шланга для отопителя от Жигулей и четыре хомута. Насос закрепил в моторном отсеке и подсоединил к подводящему шлангу отопителя. Запитать насос можно от клавиши управления вентилятором отопителя. Либо установить отдельный выключатель, подключившись через предохранитель к замку зажигания.

Видео

улитка отопителя от 2108 цена

Одеваем уплотнитель и устанавливаем под капот!

Вот такой вот воздухозаборник нива 2131 должен получиться!

Оставшуюся полость запоняем монтажной пеной! Затем, после застывания, срезаем ее вровень с нижней частью корпуса воздухозаборника.

И аккуратно с минимальными зазорами вырезаем место под «улитку» от ВАЗ-2108. Устанавливаем ее так, как позакано на фото (вид снизу)

Разбираем верхнюю часть отопителя, вынимаем решетку из воздухозаборника нива 2121. ..

Собираем нижнюю часть, двигатель ваз 2131 с вентилятором от туда просто выкидываем! Он нам больше не нужен!

Все стыки корпуса, а особенно место установки радиатора ваз 2121, проклеиваем резиновым уплотнителем (есть в любом строительном магазине)

При желании иметь три скорости — в нижнюю чать корпуса, со стороны водителя, врезаем резистор печки от ВАЗ-2108/М2141

Разбираем полностью весь отопитель!

Печка в Ниве откровенно говоря плохая! Одной из ее самых важных проблем является собственно сам вентилятор, которые установлен под радиатором, да к тому же еще и вертикально. Проходя через него горячий воздух сильно нагревает его и вся смазка постепенно стекает с ротора. Как следствие моторчик начинает визжать! Наверное все знают эту проблему! Ну а производительность там вообще на нуле… Проблема решаема! Ставим «улитку» от ВАЗ-2108 и получаем увеличение производительности, тищину, и при желании три скорости управления. Идея не нова, я позаимствовал ее на других сайтах. Только каждый делает по своему — вот как сделал я… При всем этом, после переделки мотора печки вообще не слышно так как сам мотор теперь стоит в подкапотном пространстве!

Улитка отопителя от 2108 на Нива 2121, Ваз 2131, Лада 4х4

Тюнинг салона нива 2121 своими руками, советы доработке салона, внутренний тюнинг нива 2131, ваз 2121.

НИВА / 2121, 2131 / тюнинг / салона / Установка новой улитки отопителя

Улитка отопителя от 2108 на Нива 2121, Ваз 2131

Мотор отопителя модернизированный нива 21214 лада. Отопитель (печка) и система вентиляции. Альтернатива штатной печке

Переделка печки на Ниве 21213 своими руками необходима при сбое в работе системы отопления автомобиля. Медлить с этим не стоит, ведь неравномерная термическая регуляция приводит к запотевшим стеклам или обледенению. В любом из указанных случаев ухудшается обзор происходящего на дороге. Неисправность вызывает износ отдельных элементов устройства или заводской брак.

Диагностирование неисправности

Потребуется переделка печки, поставляемой в штатной комплектации, в профилактических целях. Много времени процедура не отнимет, зато предотвратит множество проблем в будущем. Водительский опыт говорит о том, что первые сильные морозы подкосят «здоровье» устройства. Список основных слабых мест выглядит следующим образом:

  • оптимальный диапазон рабочей температуры модели 2121 от -5 до +10°С;
  • неспособность прогреть воздух в салоне, если за бортом -8°С и ниже;
  • при увеличении мощности обдува не происходит увеличение температуры;
  • при езде на II передаче шум от печки Нивы становится существенным.

Именно поэтому лучше заблаговременно принять необходимые меры. Альтернатив у водителя немного. С одной стороны, все остается на своих местах. Отопительное устройство используется на минимальной мощности. Во время мягких зим подобное еще терпимо, но с приходом настоящих холодов условия станут невыносимы. С другой стороны, несложно потратить несколько часов для исправления ситуации.

Дальнейшее развитие событий идет следующим образом. Если отопление в машине работает на ½ мощности, можно ограничиться незначительным ремонтом. Главное — убедиться в отсутствии шумов и посторонних стуков, иначе Нива 21213 должна немедленно отправиться на технический осмотр.

Наличие неприятного звукового сопровождения говорит о необходимости замены устройства. В специализированной торговой сети представлены готовые варианты отопительных механизмов на Ниву. При желании таковой собирается самостоятельно.

Второй вариант считается более предпочтительным. При самостоятельной сборке есть возможность в буквальном смысле персонализировать печку. Для выполнения работы своими руками понадобится посетить специализированный магазин или рынок для покупки запчастей.

При покупке выбираются оригинальные детали или аналоги. Главное, чтобы они имели сертификат качества. В противном случае поставить их нельзя. Нелишним будет переписать технические данные транспортного средства, чтобы не превысить рекомендованные заводом-изготовителем параметры.

Технические тонкости процедуры

Эффективность работы новой отопительной системы на Ниве определит не стоимость купленных деталей, а их качество. Для работы понадобятся следующие элементы: автомобильный резистор, отопитель восьмерки и «улитка». Ошибочно полагать, что подойдут только «родные» запчасти для ремонта отопительного устройства. Главное требование — техническая совместимость.

Если возникают сомнения, ясность внесет чертеж системы отопления. Дальнейший порядок действий выглядит следующим образом:

  1. Вырезать новое посадочное отверстие. Делается это аккуратно, ведь от качества подготовительного процесса зависит надежность эксплуатации системы обогрева. Рекомендуется поместить двигатель в воздуховод как можно ниже, иначе устройство будет упираться в капот. Допускать подобного не стоит, иначе вентилятор печки долго не продержится.

  2. Плавно вывести питание двигателя из воздуховода. Для этого используется выходное отверстие.
  3. Правильная установка подразумевает надежное закрепление двигателя в воздуховоде. После этого автомобильным герметиком уплотняются все без исключения места креплений. Настоятельно рекомендуется ничего не пропустить. В противном случае из-за вибрационных нагрузок и воздействия внешних факторов схема подключения печки будет нарушена.
  4. Взять 2 пластины из нержавейки, которые адаптируются под размеры сопла и верхнего проема. Измерения проводятся несколько раз. Педантичность исключит необходимость последующей доработки.
  5. При помощи гаечного ключа и отвертки снимается установленная заводом-изготовителем задвижка. Использовать инструменты необходимо аккуратно. Достаточно одного неосторожного движения, чтобы 21213 потребовал дорогостоящего ремонта.
  6. Рекомендуется отказаться от еще одного отопительного устройства в машине. Вторая печка тепла не добавит, а вот нагрузку на «движок» увеличит в несколько раз.
  7. Завершается процесс монтажом нового воздуховода с двигателем.

Проверяется отопительная система нового образца пробным включением. Рекомендуется плавно переключать режимы. На каждом из них устройство должно находится не менее 5-7 минут. Задача водителя — убедиться в том, что работа системы не сопровождается посторонними шумами и вибрацией.

Как уже было сказано ранее, подобный выбор не отражается на качестве работы отопительной системы. При этом автослесари делают несколько оговорок. Тем, кто планирует использовать печки ВАЗ, нелишним будет проверить систему питания. У некоторых модификаций она отличается. Именно поэтому все действия согласуются с чертежами.

Допускается использование отопителя ВАЗ 2108 при условии соблюдения двух рекомендаций. Во-первых, посадочное гнездо на 1-2 см больше размера устройства. Дополнительная площадь снизит вибрационное воздействие. Во-вторых, переключатель устанавливается с учетом специфики отопительной системы ВАЗ. Меньше придется повозиться, когда необходима незначительная доработка системы.

Вентиляционная система обновляется за 1-2 часа в зависимости от степени износа движка.

Если установленная заводом-изготовителем «улитка» не имеет следов физического износа, необходимо только заменить сам «движок» отопителя.

Хуже, если заводская комплектация модели Шевроле имеет производственные дефекты. Рекомендуется полная замена устройства. Это сэкономит время.

Работа системы отопления определяет комфортность и безопасность езды. Водитель постоянно отслеживает эффективность работы системы. В случае появления посторонних шумов необходимо срочно провести технический осмотр.

— это головная боль любого «нивовода». Какими принципами руководствовались при ее разработке конструкторы, но кроме как тихим ужасом это не назовешь.

Нельзя сказать, что у нее много недостатков. Их всего два – но этого более, чем достаточно, чтобы задуматься о ее замене или переделке.

Во-первых, она совершенно не справляется со своими функциями. При температуре в диапазоне +10…-5 градусов в салоне еще более-менее тепло. Но как только температура падает ниже -5..-10 градусов, ощущается холод даже на максимальной мощности обдува, не говоря уже о более низких температурах, которые вполне привычны для нашей зимы – в этом случае окна просто замерзают и приходится очищать в них «иллюминаторы».

Во-вторых, при работе на максимальной (второй) скорости вентилятор издает такой шум и визг, что перекрывает даже работу мотора. Не каждый выдержит эту какофонию, поэтому водители уменьшают обдув до первой скорости. Как следствие – машина недостаточно прогреваются и окна начинают замерзать.

Модернизация печки

Чтобы решить эту проблему, есть выход – это переделка печки Нива 21213 . В настоящий момент существуют уже готовые комплекты переделанных печек, за основу в которых взят обогреватель от ВАЗ-2108. Они намного более эффективны, прекрасно справляются со своей задачей даже в сильные холода и совершенно не издают раздражающих звуков. Конечно, на максимальной мощности обдува работу вентилятора слышно, но это несравнимо с тем, как визжит и скрежещет вентилятор «Нивы».

Тем, кто хочет сделать все своими руками, нужно всего лишь купить «восьмерочный» отопитель, резистор, «улитку» и переключатель и установить их на свою «Ниву».

Переделка печки Нива 21213 своими руками выполняется в следующем порядке:

  1. Подготовьте воздуховод к установке двигателя. Для этого нужно вырезать новое посадочное отверстие, при этом старайтесь посадить двигатель как можно ниже в воздуховод, чтобы он не упирался в капот;
  2. Питание двигателя через выходное отверстие выведите из воздуховода;
  3. Хорошо закрепите двигатель в воздуховоде и герметизируйте места креплений;
  4. Подготовьте две пластины из нержавеющей стали, которые нужно вырезать по размерам, а затем установить под сопло и в верхний проем;
  5. Демонтируйте штатную задвижку;
  6. Установите воздуховод с новым двигателем на место.

Если вы являетесь обладателем Нивы-21213 и влюблены в это транспортное средство, то вряд ли вы откажетесь от него при обнаружении в нём некоторых технических недоработок. В принципе это совершенно правильно, можно оставаться верным своему «железному коню», а при выявлении дефектов самостоятельно попытаться их устранить.

Нива-21213, действительно, нуждается в некотором вашем вмешательстве, совсем не будет лишним тюнинг печки Нива.

В летний период вы не сможете заметить неудобств, а вот с наступлением холодов без усиленного гардеробного оснащения в виде ватных штанов и куртки вы точно не сможете обойтись.

Постоянно ощущать себя «танкистом» как-то не хочется, поэтому большинство владельцев этого автомобиля принимают решение закатить рукава и осуществить доработку печки собственной . Кстати, такие же проблемы присущи ещё одной отечественной модели — УАЗ, владельцы которого также находятся в активном поиске, что предпринять, чтобы повысить работоспособность печки.

Процесс доработки системы отопления

Некоторые предлагают избавиться от вентилятора, установленного производителем, а взамен его установить вентилятор с «восьмёрки».

Если вы тоже решились на проведение такой замены, вам нужно дополнительно определиться, оставите ли вы штатное управление печкой родное или также замените его «восьмёрочным» аналогом.

Определившись со вторым вариантом действий, позаботьтесь о приобретении таких дополнительных элементов:

  • переключатель скоростей вентилятора;
  • дополнительный резистор для печки.

Итак, после того как вы полностью подготовили все необходимые составляющие, можно приступать непосредственно к процессу доработки вентилятора.

Первоначально следует демонтировать старую коробку вохдухопритоков. К сожалению, невзирая на то, что для этого требуется выкрутить всего лишь четыре гайки, обойтись без посторонней помощи не удастся. Напарнику будет нужно удерживать винты под капотом, тогда как вы будете их выкручивать, воспользовавшись ключом-трубкой.

После этого можно беспрепятственно извлечь воздухозаборник. Почистите его, если он в этом нуждается, а затем срежьте небольшое количество пластика, чтобы обеспечить достаточное пространство для работы нового вентилятора.

Установите вентилятор и внимательно осмотрите, что может выступать в качестве помех для работы установленного вентилятора. Если таковые преграды обнаруживаете, аккуратно их срезайте.

После того как вы убедитесь, что больше нет ничего, что может препятствовать , зафиксируйте его при помощи герметика.
Вокруг сопла вентилятора находятся небольшие зазоры, важно их устранить, прикрыв любым материалом. Это позволит предотвратить утечку тёплого воздуха.

Теперь собранный вентилятор внедряется обратно в то пространство, в котором ранее «обитал» его старый аналог. Всё надёжно закрепляется и проверяется закрытие и открытие капота. В отдельных случаях после внедрения «инородного» вентилятора не удаётся нормально закрывать капот.

Если всё нормально, подсоедините все провода, а также установите новые элементы управления. По завершении выполненных работ обязательно проконтролируйте свой результат в действии.

Печка должна работать отлично, а в салоне автомобиля очень быстро должен распространяться тёплый воздух.

Замена крана

К сожалению, виновниками плохого обогрева Нивы могут выступать не только вентилятор и воздуховод, но и кран самой печки. В частности, его диаметр невероятно мал, что способствует медлительному распространению жидкости по радиатору.

Именно по этой причине многие автовладельцы решаются ещё на один дополнительный тюнинг обогрева салона любимой Нивы, предполагающий замену крана.

Кран, безусловно, придётся позаимствовать у других транспортных средств. В качестве «доноров» для решения такой проблемы могут выступать многие иномарки, но лучшими с финансовой точки зрения являются краны, снятые с Volkswagen или Opel.

Первоначально вам придётся . Этот процесс трудоёмкий, поэтому важно следовать алгоритму, который рекомендуют те владельцы авто, которым ранее приходилось дорабатывать самостоятельно систему отопления, и результат был эффективным.

Откройте капот, найдите хомут, который фиксирует шланг к патрубку, при помощи пассатижей постарайтесь ослабить его. Мастера рекомендуют такие действия совершать в перчатках, поскольку при выполнении таких действий приходится прилагать усилия, рука часто срывается и может быть повреждена, если на ней не будет перчаток.

Следующей вашей задачей будет являться отсоединение уплотнителя, вам нужно просто выкрутить саморезы, фиксирующие этот уплотнитель к перегородке. Далее остаётся этот уплотнитель просто снять. Вещевая полка точно также извлекается, при этом ничего не препятствует выполнению таких действий.

Теперь зайдите со стороны салона и немного ослабьте прижимной винт крана. Далее будет уже просто с рычага крана снять тросик.

Вот теперь вы подобрались непосредственно к самому крану, открутите винты, которые его удерживают. В зависимости от конфигурации радиатора печи количество может изменяться, также вместо винтов могут быть установлены гайки.

Извлеките кран, снимите с него патрубок, также предварительно отвинтив гайки.

Мастера только рекомендуют использовать небольшую хитрость. При креплении крана к радиатору гайки очень часто откручиваются, соответственно, в процессе движения авто теряются. Чтобы предотвратить такие «потери», рекомендуется не просто закрутить гайки, а предварительно их посадить на пластилин.

Итак, процесс модернизации системы отопления может осуществить любой желающий, а в благодарность он получит комфортные условия внутри салона даже в те моменты, когда на улице будет лютовать мороз.

Каждый владелец «Нивы» знает, что печка – это одна из самых серьезных недоработок этого автомобиля. Печка Нива 21213, как и любой другой Нивы, обладает сразу двумя недостатками, причем каждый из них является критичным в плане комфорта.

  1. Повышенная шумность. При работе вентилятор отопителя издает раздражающие и визгливые звуки, которые раздражают водителя;
  2. Низкая производительность. Даже в режиме максимальной мощности салон плохо прогревается, а при сильном морозе печка не справляется со своими функциями и стекла замерзают, ухудшая обзор водителю.

К недостаткам также следует отнести только два положения регулировки мощности обдува. Особенно это чувствует осенью – в минимальном режиме салон не прогревается, а в максимальном – слишком жарко.

Альтернатива штатной печке

Отличной альтернативой штатной печки ВАЗ-21213 является печка от «восьмерки». В отличие от «нивовской», она совершенно бесшумная в работе, отлично прогревает салон и имеет несколько скоростей, что предоставляет более широкие возможности по выбору диапазона обдува.

Модернизацию можно провести двумя способами: самостоятельно или же купив уже готовый полный комплект отопителя.

Самостоятельная установка новой печки

Несмотря на то, что восьмерочный отопитель подходит к Ниве, все равно придется немного попотеть, чтобы его установить – продукция отечественного автопрома не подразумевает, что какая-то деталь просто заменяется без усилий. Обязательно нужно будет подточить, рассверлить, переделать и так далее, чтобы все детали нормально стали.

К печке от ВАЗ-2108 сразу же следует приобрести новый резистор, переключатель и «улитку». Порядок действий следующий:

  • Примерить двигатель от новой печки к воздуховоду и вырезать новое посадочное отверстие. Устанавливать двигатель следует так, чтобы он не упирался в капот, поэтому старайтесь посадить его в воздуховод поглубже;
  • Выведите провод из коробки, сам двигатель тщательно закрепите и герметизируйте;
  • Из нержавейки вырежьте пластину, которую нужно установить под сопло;
  • Верхний проем также нужно закрыть;
  • Уберите штатную задвижку, так как она в новой печке не понадобиться;
  • Установите воздуховод на место.

Если нет желания заниматься конструированием, можно приобрести уже готовый комплект в сборе. В него входят улитка, корпус с уже подготовленным посадочным местом под двигатель, реостат, переключатель скорости, набор проводов, а также крепежи и уплотнительные соединения.

Отопитель

1 – боковое сопло;
2 – воздухопровод бокового сопла;
3 – воздухопровод обогрева ветрового стекла;
4 – центральные сопла;
5 – тяга управления заслонкой воздухопритока;
6 – заслонка воздухопритока;
7 – радиатор;
8 – уплотнитель отопителя;
9 – кожух радиатора;
10 – отводящий патрубок;
11 – подводящий патрубок;

12 – кран;
13 – воздухораспределительная крышка;
14 – кожух вентилятора;
15 – крыльчатка;
16 – электродвигатель;
17 – тяга управления краном;
18 – тяга управления заслонкой обогрева ветрового стекла;
19 – кронштейн рычагов управления отопителем;
20 – рукоятка управления заслонкой воздухопритока;
21 – рукоятка управления заслонкой обогрева ветрового стекла;
22 – рукоятка управления краном.

Схема работы отопителя


1 – воздухораспределительная крышка;
2 – кожух вентилятора;
3 – электродвигатель вентилятора;
4 – крыльчатка;
5 – радиатор;
6– подводящий патрубок;
7 – отводящий патрубок;
8 – кожух радиатора;
9 – заслонка воздухопритока;
10 – коробка воздухопритока;

11 – воздухопровод обогрева ветрового стекла;
12 – заслонка центрального сопла;
13 – центральное сопло;
14 – рукоятка управления краном;
15 – рукоятка управления заслонкой обогрева ветрового стекла;
16 – рукоятка управления заслонкой воздухопритока;
17 – кронштейн рычагов управления;
18 – заслонка обогрева ветрового стекла;
19 – тяга управления заслонкой обогрева ветрового стекла.

Система вентиляции – приточно-вытяжная. При движении автомобиля воздух нагнетается в салон естественным напором через щели воздухозаборника на капоте и отсасывается через отверстия в задних стойках крыши. Для увеличения циркуляции воздуха при движении можно опустить стекла передних дверей, а при низкой скорости – включить электровентилятор. Потоки воздуха в салоне распределяются воздухопроводами, расположенными внутри приборной панели. На ветровое стекло воздух поступает через верхние щелевидные сопла на панели приборов, на боковые стекла – через боковые и, частично, центральные сопла (с направляющими потока воздуха), к ногам – через отверстия в кожухе отопителя (при откинутой крышке). Для управления распределением воздушных потоков служат средний и нижний рычаги на центральной консоли панели приборов, а также направляющие центральных сопл и их регуляторы.

Система отопления (печка) – жидкостная, объединенная с системой охлаждения двигателя. Радиатор отопителя установлен в консоли панели приборов в пластмассовом кожухе и уплотнен по периметру поролоновой лентой. Нагрев воздуха зависит от степени открытия крана, регулирующего поток жидкости через радиатор. Кран установлен на входе в радиатор и управляется верхним рычагом на центральной консоли.

Электродвигатель вентилятора МЭ-255 – коллекторный, постоянного тока, с возбуждением от постоянных магнитов. Частота вращения вентилятора регулируется трехпозиционным переключателем на панели приборов. В зависимости от выбранной скорости электродвигатель подключается к бортовой сети автомобиля напрямую (большая частота) или через дополнительный резистор (малая частота). Частота вращения вала электродвигателя с крыльчаткой при напряжении 12 В и температуре воздуха 25±10°С – 3000±150 мин –1 . Потребляемая сила тока при максимальной частоте вращения – не более 4,5 А.

Крыльчатка вентилятора закреплена на валу электродвигателя. Электродвигатель ремонту не подлежит при выходе из строя его заменяют.

Если вода попадает в салон через печку

Как усилить обогрев отопителя (вместо второй печки)

(совет от С. Лисицкого)

На моей Ниве ВАЗ-21310 зимой при небольших оборотах двигателя отопитель не справляется с прогревом салона. Чтобы улучшить циркуляцию жидкости в радиаторе печки, установил дополнительный прокачивающий насос от Газели. Для этого купил два шланга для отопителя от Жигулей и четыре хомута. Насос закрепил в моторном отсеке и подсоединил к подводящему шлангу отопителя. Запитать насос можно от клавиши управления вентилятором отопителя. Либо установить отдельный выключатель, подключившись через предохранитель к замку зажигания.

Видео

Флуоресцентный пигмент позволяет различать виды улиток-двойников

ВВЕДЕНИЕ

Окраска мягкого тела обычно не используется в качестве ключевого признака в таксономии раковинных моллюсков, в основном потому, что для изучения цвета и окраски необходимы живые или свежие экземпляры вариации сохраняются не так легко, как структурные вариации раковины или мягкого тела (Stum et al., 2006). У слизней окраска мантии может различаться генетически (Williamson, 1959) или в зависимости от пищи внутри вида, что вносит путаницу в таксономию близкородственных видов (Reise, 1997; Jordaens et al., 2001). Что касается окраски мантии легочных улиток, то практически не было изучено почти ни одного случая приобретенного изменения и лишь несколько примеров генетической изменчивости (Саin, 1959; Murray, 1963; Cain et al., 1968; Wolda, 1969; Richards, 1973). , 1978), возможно, потому, что в целом раковины привлекают гораздо больше внимания.

Различия в окраске мантии между Bradybaena pellucida Kuroda и Habe (Habe, 1953) и B. Similaris (Rang, 1831) открывают возможности для биологических исследований окраски мантии из-за их подходящих характеристик для полевых и лабораторных исследований (Asami et al., 1997б; Асами и Асами, 2008 г.). Bradybaena Similaris (Férussac, 1821), которая часто упоминается для этого вида, является nomen nudum (Cowie, 1997). Первоначально Bradybaena pellucida была описана как слегка отличающаяся от B. Similaris более высокой раковиной с более широкими оборотами, более тонким остракумом и блестящим бледно-желтоватым надкостником, через который гепатопанкреас кажется ярко-желтым вблизи вершины, при этом не обнаруживая явных различий в цвете. гениталии (Набе, 1953). Однако отчетливый желтый цвет B.pellucida имеет цвет не гепатопанкреаса, а спинной мантии (Asami et al., 1997b; Seki et al., 2002). В отличие от этого, B. Similaris демонстрирует окраску внутренних органов через почти прозрачную мантию с некоторыми белыми участками на вершине (рис. 1А). Цвет наружного покрова мягкого тела, выходящего за пределы раковины, от беловатого до бледно-светло-коричневого у B. pellucida, но более темно-коричневый у B. Similaris. Цвет периостракума часто бледно-беловато-желтый у B. pellucida, но коричневатый у B.аналогичный (рис. 1Б). Однако различия в раковинах непостоянны из-за различий внутри каждого вида. Оба вида также имеют схожие генетические системы, контролирующие окраску раковины и полиморфизм полос (Asami et al., 1993, 1997a; Asami and Asami, 2008). Таким образом, B. pellucida и B. Similaris надежно различаются только по окраске мантии. Однако, когда B. pellucida кормят искусственно приготовленным кормом (Asami and Ohbayashi, 1999), он теряет желтую окраску мантии, и его становится трудно отделить от B.Similaris (Asami et al., 1997a, b). Таким образом, было сомнительно, отличаются ли эти два вида генетически или морфологически друг от друга.

Рис. 1

Внешняя морфология Bradybaena pellucida (слева на каждой панели) и B. Similaris (справа на каждой панели). (A) Живые взрослые особи светло-коричневых полосатых морфов. (B) Пустые раковины взрослых светло-коричневых бесполостных морф; масштабная линейка, 5 мм.

Bradybaena pellucida является эндемиком Японии и распространена в основном в западном регионе, а также на юге полуострова Босо и некоторых других местах в центральной части Хонсю, тогда как B.Similaris является космополитом и населяет большинство островов Японии (Komai, Emura, 1955; Asami et al., 1997b; Seki et al., 2002). Смешанные колонии B. Similaris и B. pellucida обнаруживаются там, где их ареалы перекрываются, хотя их пятнистое распространение может быть отрицательно связано друг с другом (Asami et al., 1997b; Seki et al., 2002).

Мы изучили различия между B. pellucida и B. Similaris в пигментации мантии, морфологии полового члена и аллозимах. В этой статье показано, что флуоресцентный вторичный метаболит, который B.pellucida из естественной среды, подтверждает генетическое различие двух видов.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

Для изучения окраски мантии и морфологии гениталий мы собрали живых взрослых особей и молодых особей (диаметром от 6 до 7 мм) B. pellucida в Широяме, Татеяме, и B. Similaris в Мияме, Фунабаси, Япония ( Рис. 2). Для исследования аллозимной изменчивости мы собрали образцы из трех одновидовых популяций каждого вида, в том числе из двух вышеуказанных участков на полуострове Босо (рис.2).

Рис. 2

Места сбора Bradybaena pellucida и B. Similaris в префектуре Тиба, Япония.

В течение двух дней после сбора мы удалили раковины 20 взрослых и 20 молодых особей каждого вида и исследовали спинную мантию под препаровальным микроскопом. Кроме того, мы кормили 20 взрослых особей и 20 молодых особей каждого вида кормом, состоящим из порошкообразной овсяной муки, яичной скорлупы и сухого корма для кошек, в контролируемых лабораторных условиях (16 часов света/8 часов темноты, 25°C) в течение 30 дней в соответствии с рекомендациями. протокол Асами и Обаяши (1999).Затем таким же образом, как описано выше, мы исследовали спинную мантию.

Из-за заметной яркости желтой пигментации B. pellucida мы проверили, излучает ли желтое вещество флуоресценцию в ультрафиолетовом излучении А, используя УФ-люминесцентную лампу (Blacklight, NEC, FL20S-BLB; пиковая длина волны: 360 нм). во тьме. Для каждого вида мы исследовали (1) спинную мантию 20 взрослых особей и 20 молодых особей в течение двух дней после сбора, (2) спинную мантию 20 взрослых особей и 20 молодых особей, которых кормили в лаборатории в течение 30 дней, и (3) пустые оболочки 20 взрослых.

Мы вырастили 20 мальков B. pellucida и B. Similaris, собранных в Сирояме и Мияме, соответственно, до зрелости в индивидуальных пластиковых контейнерах (62×50×25 мм) и позволили им размножаться в 10 межвидовых парах, согласно протокол Asami and Ohbayashi (1999), за исключением использования песка в качестве субстрата для откладки яиц. Мы вырастили до половой зрелости по пять потомков каждой из четырех межвидовых пар. Изучив цвет мантии и морфологию гениталий, мы подтвердили, что потомство было межвидовым гибридом, а не потомством, полученным путем самоопыления, на основе их гетерозиготного аллозимного профиля в локусе Pgm (таблица 1).В качестве контроля мы вырастили до половозрелости по пять потомков каждой из четырех внутривидовых пар каждого вида в тех же лабораторных условиях, что и гибриды.

Таблица 1

Анализируемые ферменты и локусы, а также буферные системы, используемые при электрофорезе в крахмальном геле.

Мы препарировали половую систему 20 взрослых особей каждого из двух видов, собранных в дикой природе, и по 20 взрослых особей каждого вида и гибридов F 1 , полученных в результате лабораторных скрещиваний. Мы фиксировали гениталии в 70% этаноле.Под препаровальным микроскопом мы исследовали возможные различия общей морфологии гениталий и скульптуры внутренней стенки полового члена, вскрытой в постоянной ориентации с помощью лезвия бритвы.

Кусочек гепатопанкреаса каждого живого образца гомогенизировали в равном объеме холодного 0,01 М трис-HCl-буфера (рН 6,8) и центрифугировали при 10000× g в течение 10 мин при 4°С. Супернатант подвергали электрофорезу на горизонтальном крахмальном геле с использованием четырех буферных систем для 11 ферментов (табл. 1).Аллозимы наблюдали с помощью методов окрашивания Murphy et al. (1996). Основываясь на электрофоретических паттернах, мы оценили частоты аллелей в 12 предполагаемых локусах.

РЕЗУЛЬТАТЫ

Пигментные пятна

Как у B. pellucida, так и у B. Similaris у всех взрослых и молодых особей, собранных в дикой природе, было много пятен диаметром 0,01–0,02 мм каждое в спинной мантии под раковиной (рис. 3). ). Пятна B. pellucida были ярко-желтыми, тогда как пятна B. Similaris были белыми; оба типа были видны сквозь полупрозрачные оболочки.Пигментные пятна были только в спинной мантии, а не в других частях мантии или в других органах. У большинства взрослых особей B. pellucida, собранных в дикой природе, желтые пятна сливались, покрывая дорсальную поверхность шипа, который казался толстым и однородно желтым. Таким образом, цвет гепатопанкреаса не был виден сквозь скорлупу у живых взрослых особей B. pellucida. Желтые пятна были редкими на внешних оборотах. Окраска гепатопанкреаса имаго B. pellucida была видна вдоль узкой зоны между оборотами только при удалении раковины (рис.3А). В противоположность этому, белые пятна B. Similaris были плотными только на вершине и редко располагались в дорсальной части мантии шпиля. Так, у B. Similaris в основном наблюдалась темно-коричневая окраска гепатопанкреаса через мантию и раковину (рис. 3Б).

Рис. 3

Зависящие от окружающей среды изменения окраски мантии и гепатопанкреаса у взрослых особей Bradybaena pellucida (левые панели) и B. Similaris (правые панели). (A, B) Вид шпиля сверху без скорлупы до лабораторного кормления. (В, Г) Пятна, внедренные в мантию перед лабораторным кормлением; масштабная линейка, 0,05 мм. (E, F) Вид сверху на шпиль без скорлупы на 30-й день лабораторного кормления.

Плотность и распределение пятен на мантии различались у диких особей. Желтые пятна молодых B. pellucida из дикой природы были менее плотными, чем у взрослых особей; таким образом, их цвет гепатопанкреаса был виден сквозь скорлупу. В среде обитания B. pellucida типичная желтая окраска не обнаруживалась у большинства мальков размером менее 4 мм.Однако у собранных взрослых и молодых особей желтые пятна были слишком плотными вокруг вершины, чтобы можно было проверить, присутствуют ли также белые пятна.

В лабораторных условиях все дикие взрослые и ювенильные экземпляры B. pellucida начали терять желтую окраску с первого дня эксперимента, в то время как белые пятна B. Similaris не показали заметных изменений. В контейнерах, в которых взрослые или молодые особи B. pellucida содержались по отдельности, следы слизи на влажном бумажном полотенце, выстилавшем дно, часто были полупрозрачно-желтыми, особенно в начале лабораторного кормления, что позволяет предположить, что желтый пигмент просачивается из тела, предположительно со слизью.Мы подтвердили, что это также происходит в дикой природе, когда люди ползают по белой папиросной бумаге.

Хотя скорость исчезновения желтого цвета у разных особей различалась, все взрослые особи и молодые особи B. pellucida полностью утратили желтый пигмент в течение 30 дней. Однако мы не обнаружили никаких заметных признаков изменений в питании или других поведенческих действиях. Сняв раковины на 30-й день кормления, мы обнаружили только белые пятна на спинной мантии как у B. pellucida, так и у B. Similaris (рис.3). Эти пятна были такими же редкими, как и пятна на мантии B. Similaris до эксперимента с кормлением. Цвет самой гепатопанкреаса резко менялся от темно-коричневого до бледно-коричневого как у B. pellucida, так и у B. Similaris (рис. 3). Из-за изменения количества желтых пятен и окраски гепатопанкреаса взрослые и ювенильные особи двух видов стали неотличимы друг от друга по мягкотелой окраске под раковиной.

Под воздействием ультрафиолетового (УФА) излучения с длиной волны 360 нм все живые взрослые особи и молодые особи B.pellucida, собранные из природных местообитаний, излучали беловатую флуоресценцию, видимую человеческому глазу в темноте. При облучении УФ-А мягкого тела без панциря и листа спинной мантии, удаленного от тела, мы подтвердили, что только желтая часть спинной мантии излучает флуоресценцию. Желтые пигменты, обнаруженные со следами слизи на бумажном полотенце, также флуоресцировали даже после того, как бумажное полотенце и слизь высохли. Напротив, мы не обнаружили флуоресценции в мягких телах B.Similaris или B. pellucida, утративший желтый пигмент. Пустые раковины двух видов не проявляли ни желтого пигмента, ни флуоресценции. Ни один из 20 гибридов F 1 , выращенных в лаборатории, не приобрел желтый пигмент и не излучал флуоресценции.

Генитальная анатомия

Не было обнаружено различий в общей морфологии гениталий между B. pellucida и B. Similaris. Однако узоры микроскульптуры внутри пениальной трубки различались между двумя видами, хотя они мало различались у взрослых особей.Пениальная скульптура B. pellucida (рис. 4) характеризуется ромбовидными пустулами, разделенными прямыми тонкими бороздками и покрывающими более половины внутренней стенки от края семяпровода (верхний край на рис. 4). На краю несколько тонких неясных продольных пилястр. Некоторые из них частично зигзагообразные. Отдельные пустулы сливаются, образуя толстые продольные пилястры примерно на одной трети полового члена проксимальнее полового отверстия (нижний край на рис. 4).Продольные края этих пилястр слабозубчатые, но не разветвлены и не сращены друг с другом. Внутренняя пениальная поверхность B. Similaris (рис. 4) в основном покрыта пилястрами, идущими от края семявыводящего протока к половому отверстию. Эти пилястры различаются по ширине. В части, проксимальнее семявыносящего протока, пилястры тонкие, большей частью зубчатые и сжатые. На большей части внутренней поверхности полового члена пилястры разветвлены и в значительной степени зубчатые, сливаются в несколько крупных пилястр возле полового отверстия.

Рис. 4

Скульптура на внутренней стенке полового члена взрослой особи Bradybaena pellucida (слева), B. Similaris (справа) и их гибрида F 1 (в центре). Верхний край является краем семявыносящего протока, а нижний край продолжается до полового отверстия. Масштабная линейка, 1 мм.

Все 20 исследованных гибридов F 1 отличались от родительских видов пениальной скульптурой (рис. 4). Присутствовали пустулы неправильной формы с несколькими мелкозубчатыми пилястрами примерно на одной трети стенки полового члена рядом с семявыводящими протоками.Таким образом, площадь с пустулами у гибридов была меньше, чем у B. pellucida. Более половины площади внутренней стены, проксимальной к гениальному отверстию, было покрыто выступающими пилястрами. Эти пилястры были длиннее, чем у B. pellucida, и толще, менее разветвлены и менее зубчатые, чем у B. Similaris. Этот образец скульптуры полового члена у гибридов F 1 кажется промежуточным между таковыми у B. pellucida и B. Similaris.

Аллозимная вариация

Из 12 предполагаемых локусов, кодирующих 11 исследованных ферментов, шесть локусов из пяти ферментов были полиморфными в шести популяциях B.pellucida и B. Similaris (табл. 2). Два вида имеют наиболее распространенный аллель в двух локусах, Aat и Idh . Однако в других локусах частоты аллелей заметно различались между видами. На Cap Locus Cap Cap 80034 80034 был самым распространенным в B. Pellucida, тогда как Cap

или CAP или CAP

2 100 был наиболее частым в B. Anderis. В Mdh-I три популяции B.Similaris были зафиксированы для Mdh-I 100 , редко встречающегося у B. pellucida. Точно так же при Mdh-II три популяции B. Similaris были зафиксированы для Mdh-II 100 , в то время как три популяции B. pellucida были полиморфны по двум другим аллелям. Все три популяции B. pellucida были зафиксированы для Pgm 100 , а B. Similaris — для Pgm 45 .

Таблица 2

Частоты аллелей, гетерозиготность (H) и значения F ST для полиморфных аллозимных локусов в этом исследовании.

Средняя гетерозиготность составила 11% у B. Similaris и 20% у B. pellucida. Величина F ST не превышала 0,08 ни в одном локусе (табл. 2). Средние генетические расстояния (Nei, 1972) по 12 исследованным локусам составили 0,2384 между двумя видами и 0,0071 внутри вида (0,0064 для B. pellucida; 0,0077 для B. Similaris) (табл. 3).Разница между меж- и внутривидовыми генетическими дистанциями была статистически значимой (критерий Манна-Уитни, р=0,0014). Двадцать потомков F 1 , полученных от четырех межвидовых пар, были все гетерозиготными по Pgm 100 и Pgm 45 соответственно, для которых родительские популяции B.lucida, сходные с B. были зафиксированы, что указывает на то, что они были межвидовыми гибридами, а не результатом самоопыления.Таблица 3

ОБСУЖДЕНИЕ

Флуоресцентный пигмент мантии

Желтые пигменты просачиваются из мягкого тела в естественной среде обитания, а также в лаборатории. Таким образом, лабораторные условия не являются непосредственной причиной потери пигмента. Вместо этого лабораторные условия, вероятно, препятствовали восполнению пигмента, возможно, потому, что искусственная пища не обеспечивала необходимое вещество (вещества) для производства пигмента.Мелкая молодь B. pellucida в дикой природе вообще не имеет желтой окраски или проявляет ее слабо. Это говорит о том, что B. pellucida в дикой природе накапливает желтое вещество в виде пятен по мере своего роста.

Мы не обнаружили желтых пятен в мантии B. pellucida, потерявшей желтый цвет в лабораторных условиях. Вместо этого присутствовали редкие белые пятна, похожие на пятна B. Similaris. В середине лабораторного периода кормления оставшиеся желтые пятна B. pellucida мало менялись по цвету.Таким образом, желтые пятна не сменились белыми пятнами, а исчезли, а белые пятна B. pellucida, вероятно, присутствовали за плотными желтыми пятнами с начала опыта.

Различия в окраске мантии между двумя видами могут быть результатом различий в пище и/или микросреде обитания. Однако типы их местообитаний во многом пересекаются, и иногда они встречаются вместе. Тем не менее, при тщательном изучении ареала распространения в Японии не было обнаружено ни одного экземпляра с желтой окраской у B. Similaris (e.г., Комаи и Эмура, 1955; Асами и Охба, 1982). Это говорит о том, что пигмент мантии B. pellucida, зависящий от окружающей среды, является признаком генетического отличия от вида-близнеца, B. Similaris.

Нет сведений о подобных флуоресцентных метаболитах в других легочных, за исключением случая флуоресцентных пигментов, обнаруженных в слизи Cepaea nemoralis (L.) (J. Murray, личное сообщение). Хотя некоторые банановые слизни (род Ariolimax) известны своей ярко-желтой окраской (Gordon, 1994), неизвестно, зависят ли их цветовые вариации от окружающей среды в какой-либо степени.Слизень Arion fasciatus (Nilsson) терял желто-оранжевые пигменты мантии при выращивании на моркови, салате или бумаге, в то время как A. fasciatus и A. silvaticus Lohmander, выращенные на европейской крапиве Urtica dioica L., давали более сильную пигментацию, чем дикие особи ( Йорданс и др., 2001). В нашем предварительном эксперименте с кормлением морковь, салат или сладкий картофель не предотвращали потерю пигмента у взрослых или молодых B. pellucida, собранных в дикой природе, и не позволяли их потомству приобрести пигмент.Bradybaena pellucida часто встречается на японской крапиве Boehmeria nipononivea Koidz того же семейства (Urticaceae), что и европейская крапива.

В естественных и лабораторных условиях желтый пигмент просачивается со слизью из тела B. pellucida. Подобные примеры известны у слизней; Arion subfuscus (Draparnaud) и A. hortensis Férussac отличаются от других арионид выделением желто-оранжевой слизи (Kerney, Cameron, 1979), хотя неизвестно, теряют ли они окраску мантии в неволе.Arion fasciatus в естественных условиях имеет бесцветную слизь, но при выращивании на крапиве выделяет оранжевую слизь (Jordaens et al., 2001). Таким образом, данный случай не может быть уникальным для B. pellucida среди ракушечных легочных, и подобные примеры могли быть просто упущены из виду из-за традиционно предвзятого внимания к раковинам.

Несмотря на непрерывную потерю пигмента, B. pellucida накапливает пигмент, проявляя флуоресцентный желтый цвет и делая вид сверху заметным, по крайней мере, для человеческого глаза.В настоящее время неизвестно, есть ли какая-либо причина того, что флуоресценция и / или ярко-желтая спинная мантия обнажается через раковину. Изучение возможной функции пигмента требует дальнейших исследований экологии и эволюции B. pellucida. Химическая идентификация пигмента также необходима, чтобы понять, как он поступает из окружающей среды.

Пениальная скульптура

Принимая во внимание большое сходство двух видов в раковине и общей морфологии гениталий, а также в поведенческих и репродуктивных признаках, отраженное в успехе гибридизации, дискретное различие в сложной пениальной скульптуре между B.pellucida и B. Similaris. Наш результат показывает, что образцы скульптуры полового члена расходятся быстрее, чем другие морфологические признаки. Настоящее исследование показало, что гибриды F 1 демонстрируют пениальную анатомию, промежуточную между отличной микроскульптурой родительских видов. Таким образом, различия в скульптуре полового члена между двумя видами могут быть полигенными или определяться одним или несколькими генами, которые не проявляют полного доминирования.

Микроскульптура стенки полового члена часто используется для различения близкородственных видов легочных артерий (например,г., Эмбертон, 1991; Sutcharit и Panha, 2006). Это говорит о том, что скульптура полового члена развивается относительно быстро и, таким образом, может играть роль в физическом распознавании партнера при совокуплении, хотя этот аспект до сих пор привлекал мало внимания. Поскольку пениальная скульптура может функционировать только после обнажения полового члена (Asami et al., 1998), эволюционный сдвиг в скульптуре мог создать барьер для скрытой репродуктивной изоляции, возникающей в процессе совокупления, вместо посткопулятивного презиготического барьера. (Ховард, 1999).

Генетическое различие

Настоящее исследование аллозимов было направлено на генетическое различие двух видов и не ставило целью исчерпывающее изучение изменчивости аллозимов в пределах их ареалов. Наш аллозимный анализ показал, что генетическая дистанция в 12 исследованных локусах между B. pellucida и B. Similaris значительно больше, чем внутри обоих видов. Различия между видами были наиболее очевидны по локусам Pgm и Mdh-I . Внутри каждого вида F ST указывает, что различия между тремя популяциями составляли всего 8% от общей генетической изменчивости.Средняя гетерозиготность была немного выше у B. pellucida, чем у B. Similaris, потому что первый был изменчив в четырех локусах, а второй — в двух. Выяснение истории популяции с помощью исследований генетической изменчивости в достаточном количестве мест в более крупном географическом масштабе требует дальнейших исследований.

Наши результаты показывают, что B. pellucida и B. Similaris дают жизнеспособные гибриды F 1 , которые могут вырасти до зрелости без явного разрушения. Однако сила постзиготической изоляции должна быть определена количественно путем явной оценки приспособленности гибридов.Текущие результаты подчеркивают важность дальнейшего изучения интрогрессии и репродуктивной изоляции между двумя видами.

Благодарности

Мы благодарим Kurt Jordaens, Georg Armbruster, James Murray и Robert Cowie за комментарии, а также Masatoyo Okamoto, Hiroshi Fukuda, Kiyonori Tomiyama, Naoko Asami и Mao Asami за полевой сбор. Это исследование было частично поддержано JSPS Grants-in-Aid for Scientific Research для T.A.

ССЫЛКИ

1.

Т.Асами и Н. Асами . 2008. Механизм поддержания супергена полиморфизма окраски раковины у Bradybaena Similaris. Бастерия 72: 119–127. Google ученый

2.

Т. Асами и С. Охба . 1982. Полиморфизм раковины наземной улитки Bradybaena Similaris в округе Канто. Научный представитель Takao Mus Nat Hist 11:13–28. Google ученый

3.

Т. Асами и К. Обаяши . 1999. Влияние субстрата для откладки яиц на пожизненную плодовитость наземных легочных Bradybaena Similaris.Дж. Конхол 36: 1–9. Google ученый

4.

Т. Асами, Х. Фукуда и К. Томияма . 1993. Наследование полосчатости раковины у наземной улитки Bradybaena pellucida. Венера 52: 155–159. Google ученый

5.

Т. Асами, К. Обаяши и К. Секи . 1997а. Наследование окраски раковины у наземной улитки Bradybaena pellucida. Венера 56: 35–39. Google ученый

6.

Т. Асами, Х. Ямасита, Дж. Парк и Х. Исикава . 1997б. Географическое распространение наземной улитки Bradybaena pellucida (Pulmonata: Bradybaenidae). Юриягай 5:31–42. Google ученый

7.

Т. Асами, Р. Х. Коуи и К. Обаяши . 1998. Эволюция зеркальных изображений в результате сексуально асимметричного брачного поведения у улиток-гермафродитов. Ам Нат 152: 225–236. Google ученый

8.

Эй Джей Кейн 1959. Наследование окраски мантии у Hygromia striolata (C. Pfeiffer). Дж. Конхол 24: 352–353. Google ученый

9.

Эй Джей Кейн, П. М. Шеппард и Дж. М. Б. Кинг . 1968. Исследования Cepaea I. Генетика некоторых морф и разновидностей Capaea nemoralis (L.). Фил Транс Рой Сок Лонд Б. 253: 383–396. Google ученый

10.

Р. Х. Коуи 1997.Каталог и библиография неместных неморских улиток и слизней Гавайских островов. Епископ Мус Оккас Пап 50: 1–66. Google ученый

11.

К. Эмбертон 1991. Генитальная, аллозимная и конхологическая эволюция трибы Mesodontini (Pulmonata: Stylommatophora: Polygyridae). Малакология 33:71–178. Google ученый

12.

A.E.J.P.J. Fd’A de Férussac 1821. 1822. Tableaux systématiques des animaux mollusques classés en familles naturelles, dans lesquels on a établi la concordance de tous les systèmes; suivis d’un prodrome générale pour tous les mollusques terrestres ou fluviatiles, vivants ou окаменелости.Бертран. Пэрис Сауэрби. Лондон. Google ученый

13.

Д. Г. Гордон 1994. Полевой справочник Западного общества малакологов по слизням. Книги снежного человека. Сиэтл. Google ученый

14.

Т. Хабе 1953. Наземные моллюски Сатаномисаки, самого южного острова Кюсю. Венера 17: 202–207. Google ученый

15.

DJ Ховард 1999. Приоритет и видообразование конспецифических сперматозоидов и пыльцы.Энн Рев Экол Сист 30: 109–132. Google ученый

16.

К. Йорданс, П. Ван Риэль, С. Гинен, Р. Верхаген и Т. Бакеляу . 2001. Пигментация тела, вызванная пищей, ставит под сомнение таксономическую ценность цвета самооплодотворяющихся слизней Carinarion spp. Дж. Молл Стад 67: 161–167. Google ученый

17.

М. П. Керни и Р. А. Д. Кэмерон . 1979. Полевой справочник наземных улиток Великобритании и Северо-Западной Европы.Коллинз. Лондон. Google ученый

18.

Т. Комай и С. Эмура . 1955. Исследование популяционной генетики полиморфной наземной улитки Bradybaena Similaris. Эволюция 9: 400–418. Google ученый

19.

Дж. Мюррей 1963. Наследование некоторых признаков у Cepaea hortensis и Cepaea nemoralis (Gastropoda). Генетика 48: 605–615. Google ученый

20.

Р.В. Мерфи, Дж. В. Сайтс-младший, Д. Г. Бут и CH Haufler . 1996. Белки: изоферментный электрофорез. В «Молекулярной систематике». Эд автор Д. М. Хиллис и К. Мориц , редакторы. Синауэр Ассошиэйтс. Сандерленд. стр. 96–116. Google ученый

21.

М. Ней 1972. Генетическая дистанция между популяциями. Ам Нат 106: 283–292. Google ученый

22.

С. Ранг 1831. Описание подвески des coquilles terrestres recueillies un voyage à la Côte occidentale d’Afrique, et au Brésil.Ann Sci Nat 24: 5–63. pl 3. Google Scholar

23.

Х. Рейз 1997. Deroceras juranum — менделевская цветовая морфа D. rodnae (Gastropoda: Agriolimachidae). Дж. Зул 241: 103–115. Google ученый

24.

К. С. Ричардс 1973. Варианты пигментации у Biomphalaria glabrata и других Planorbidae. Малакол Откр. 6:49–51. Google ученый

25.

К. С. Ричардс 1978 год.Генетические исследования Biomphalaria straminea: появление четвертого аллеля гена, определяющего вариации пигментации. Малакология 17: 111–115. Google ученый

26.

К. Секи, С. Иноуэ и Т. Асами . 2002. Географическое распространение родственных видов наземной улитки Bradybaena pellucida и B. Similaris на полуострове Босо. Венера 61: 41–48. Google ученый

27.

Р. К. Селандер, М.Х. Смит, С. Ю. Ян, У. Э. Джонсон и Дж. Б. Джентри . 1971. Биохимический полиморфизм и систематика рода Peromyscus. I. Изменчивость полевой мыши (Peromiscus polionotus). Стад Жене 6: 49–90. Google ученый

28.

Ч. Р. Шоу и Р. Прасад . 1970. Электрофорез ферментов в крахмальном геле — сборник рецептов. Биохим Гене 4: 297–320. Google ученый

29.

С.Ф. Штум, Т. А. Пирс и А. Вальдес . 2006. Моллюски: руководство по их изучению, сбору и сохранению. Американское малакологическое общество. Питтсбург. Google ученый

30.

К. Сутчарит и С. Панха . 2006. Таксономический обзор древесных улиток Amphidromus Albers, 1850 (Pulmonata: Camaenidae) в Таиланде и прилегающих районах: подрод Amphidromus. Дж. Моллус Стад 72: 1–30. Google ученый

31.

С.Р. Верт 1985. Внедрение изоферментной лаборатории на полевой станции. Вирджиния J Sci 36: 53–76. Google ученый

32.

М. Уильямсон 1959. Исследования окраски и генетики черного слизняка. Proc Roy Phys Soc Edinb 27:87–93. Google ученый

33.

Х. Вольда 1969. Генетика полиморфизма наземной улитки Cepaea nemoralis. Генетика 40:475–502. Google ученый

Генетическая структура популяций бурой улитки (Helix aspersa).I. Микрогеографический вариант JSTOR

Абстрактный

Микрогеографическая структура популяции наземной улитки Helix aspersa была проанализирована путем определения генотипов по пяти локусам ферментов для 2218 особей из 43 колоний, живущих на двух соседних участках площадью 10 акров в Брайане, штат Техас. Анализ генотипических пропорций не дал никаких доказательств инбридинга внутри колоний; но частоты аллелей для колоний в одном и том же блоке были неоднородными, и были большие различия в средних частотах аллелей между блоками.Средняя стандартизированная дисперсия (FST) для колоний на блоке составила 0,03. На каждом квартале выделено семь демов площадью около 500 кв. м; средний гармонический размер демов составлял 15 особей. Размер демы у Helix, по-видимому, значительно меньше, чем у Cepaea. Различия в частотах аллелей среди небольших колоний превышали таковые среди больших колоний, как и ожидалось, если случайный генетический дрейф является значительным фактором, влияющим на структуру популяции. Изучение грубых признаков типов местообитаний колоний не выявило ассоциаций с частотами аллелей.Неслучайные особенности межколониальной изменчивости на блоках могут отражать либо отбор в пространственно неоднородной среде, либо случаи дрейфа, происходящие в демографической истории популяций. С точки зрения генной изменчивости, определяемой электрофоретически демонстрируемой белковой изменчивостью, колонии Helix на одном блоке столь же гетерогенны, как и региональные популяции Drosophila pseudoobscura в Соединенных Штатах; и степень генетической дифференциации популяций Helix в Калифорнии может быть эквивалентна таковой человеческого вида в целом.

Информация о журнале

Evolution, изданная для Общества изучения эволюции, является главной публикацией , посвященной изучению органической эволюции и интеграции различных областей науки, связанных с эволюцией. В журнале представлены значимые и оригинальные результаты, расширяющие наши представления об эволюционных явлениях и процессах.

CYMATIUM RANZANII — (Bianconi, 1850)

Cymatium ranzanii — вид хищных морских улиток, морских брюхоногих моллюсков семейства Ranellidae, улиток-тритонов, раковин тритонов или тритонов.

Синоним
Triton ranzanii (Bianconi, 1850)

Выдержка из «Новитата Американского музея — номер 2108 — 10.10.1962».
http://digitallibrary.amnh.org/dspace/bitstream/handle/2246/3407/N2108.pdf?sequence=1

Triton ranzanii был описан из «le canal de Mosambique» Бьянкони (1850, 1851a, 1851b). , 1851с). Бьянкони сравнил свой вид с Triton femorale (Linne) из Вест-Индии. Последующие студенты группы лишь вскользь упомянули Triton ranzanii.Kiister и Kobelt (1878) рассмотрели Purpuracea и поместили этот таксон в список видов inquirendae. В монографии семейства Tritonidae Триона (1881, табл. 10, рис. 71) воспроизведен один из рисунков Бьянкони (Bianconi, 1851a; 1851b, рис. 1), и этот таксон включен в синоним тритона ( Cymatium) tigrinus Broderip из тропиков восточной части Тихого океана. Байер (1933) перечислил Cymatium (Cymatium) ranzanii как разновидность Cymatium (Cymatium) tigrinum (Broderip) в своем каталоге Cymatiidae в Рейкс-музее в Лейдене.Смит (1944, стр. 22, рис. 270) представил Триону репродукцию иллюстрации Бьянкони и вслед за Трионом отнес рисунок к Cymatium tigrinum (Broderip). Смит (1948) не упомянул Cymatium ranzanii в своем обзоре семейства Cymatiidae, а Франка (1960) не указала этот вид в своем списке моллюсков, собранных на острове Инхака, Мозамбик. Образцы этого вида, по-видимому, не были доступны этим рабочим, и валидность этого вида остается под вопросом до настоящего времени.Наш поиск образцов Cymatium ranzanii в конхологических коллекциях крупных музеев восточной части Соединенных Штатов показал следующее: один образец, по которому отсутствуют определенные данные о местонахождении, присутствует в старой коллекции Д. Дж. Стюарда Американского музея естественной истории; и единичные экземпляры были недавно получены Музеем сравнительной зоологии Гарвардского колледжа из Сомалиленда [Республика Сомали] и Национальным музеем США из близ Карачи, Пакистан. Недавно Американский музей естественной истории получил два фрагментарных экземпляра из Маската, Омана, Аравии.Эти пять экземпляров, по-видимому, являются единственными представителями этого вида, присутствующими в настоящее время в коллекциях этих учреждений, и все экземпляры, кроме одного, были получены в течение последних пяти лет. После определения редкости этого вида мы запросили дополнительную информацию у Гроша. Он любезно прислал нам на время еще два экземпляра и предоставил следующие полевые заметки: «Первый из немногих экземпляров, три собранных живыми и один или два мертвых, я нашел в марте или апреле 1953 года.Его размер составлял 204 мм. Еще один образец меньшего размера был обнаружен в 1957 году, а третий — в 1958 году. Все, включая один или два мертвых экземпляра, были обнаружены в одном и том же районе. Этот район находится в северо-восточном углу полуострова Кабасейра, который отделяет залив Мозамбик от залива Кондусия, примерно в 200 метрах от берега и примерно на 6-10 метров ниже уровня отлива. Район имеет террасированное гравийное дно, покрытое водорослями и усеянное крупными изолированными коралловыми валунами. Все образцы были собраны примерно во время мартовских весенних приливов между 1953-1959 годами.«По сравнению с известными ныне живущими видами Cymatium мало сомнений в том, что Cymatium ranzanii наиболее тесно связан с Cymatium tigrinum (Broderip) панамской фаунистической провинции и Cymatiumfemorale (Linne) карибской фауны (см. рис. 3, 4). Три вида образуют группу с очевидным сходством признаков раковин и относятся к Cymatium в строгом смысле

Прошлые события | Field House Museum

2014



Экскурсия по историческому дому в Сент-Луисе
Четверг, 11 декабря – с 15 до 20 часов.м.

Дом-музей Филд снова примет участие в туре по историческому дому в Сент-Луисе! Окунитесь в атмосферу праздника в стиле хай-тек, посетив пять лучших исторических домов и зданий Сент-Луиса. Только на одну ночь у вас будет возможность посетить Дом-музей Кэмпбелла, Дом-музей Филда, Дом Шатийона-ДеМениля, Дом Сэмюэля Капплса в Университете Сент-Луиса и Старое здание суда, каждый из которых украшен праздничным нарядом. На каждой остановке в пути вас ждут легкие праздничные закуски и развлечения.Во многих местах также есть сувенирные магазины, которые помогут вам с покупками к празднику!

Участники могут путешествовать по местам на постоянно курсирующих чартерных автобусах, которые будут доставлять их от остановки к остановке, или могут выбрать самостоятельную экскурсию. Чтобы приобрести билеты, позвоните в Дом-музей Кэмпбелла по телефону (314) 421-0325 или , нажмите здесь, чтобы купить билеты .

Билеты на автобус с гидом: 30 долларов США заранее, 40 долларов США в день мероприятия. Цена включает вход во все пять локаций и проезд на автобусе.

Билеты для самостоятельного гида: 20 долларов США заранее, 30 долларов США в день мероприятия. Цена включает посещение всех пяти локаций. (Бесплатная парковка с ограниченным количеством мест доступна в каждом заведении.)

** Ненастная погода Дата: 17 декабря 2014 г.


Тур «Следы Дреда Скотта»
Суббота, 1 ноября 2014 г.

5-я ежегодная образовательная экскурсия «Молодые друзья Дреда Скотта» представляет тур «Следы Дреда Скотта» в субботу, 1 ноября 2014 г.

Во время этой увлекательной автобусной экскурсии по Сент-Луису вы посетите и обсудите почти 40 мест и мемориалов, которые связаны с человеком и делом борьбы Дреда Скотта за свободу. Менее известные художественные и мемориальные почести, которые признали его по всей стране, которые говорят о значении Дреда и влиянии его дела, удивят и порадуют вас. Многие неизвестны и прямо у нас под носом. Присоединяйтесь к нам в этом единственном в своем роде туре, рассказанном потомками Дреда Скотта.

Это путешествие по старому и новому, которое вы не захотите пропустить! Стоимость $75 на человека включает: просторный мультимедийный автобус с туалетом, обед в ресторане, игры, розыгрыши, сувениры, фотосессию (обязательно с фотоаппаратом!), а также особенных гостей на маршруте.Пространство ограничено.

Экскурсия начинается в 8:30 и возвращается в 15:30. Бесплатная парковка предоставляется The Eugene Field House для участников этого тура.

Для получения дополнительной информации посетите веб-сайт Фонда наследия Дреда Скотта по телефону www.thedredscottfoundation.org или позвоните по номеру
Чанину Пакстону, чтобы получить регистрационную информацию или решить вопросы по номеру 910-964-8790.

22 марта
Распродажа в гараже музея в зоопарке Сент-Луиса

Музей Филд Хаус снова примет участие в выставке St.Гаражная распродажа в магазинах музея Луи проходит в зоопарке Сент-Луиса. Покупайте распродажи, распродажи и единственные в своем роде предметы в сувенирных магазинах музея Сент-Луиса. Гаражная распродажа проходит с 9:00 до 16:00. Для получения дополнительной информации посетите сайт www.stlzoo.org или позвоните по телефону (314) 781-0900.

8 марта
157-я годовщина решения Дреда Скотта
(организовано Фондом наследия Дреда Скотта и старым зданием суда)

Фонд Наследия Дреда Скотта вместе со Старым зданием суда пригласили Дом Юджина Филда выступить на праздновании 157-й годовщины решения Дреда Скотта.Это мероприятие, которое состоится 8 марта 2014 года в Старом здании суда, затронет многие темы, в том числе роль, которую Розуэлл Филд сыграл в этом деле. Для получения дополнительной информации свяжитесь с Фондом наследия Дреда Скотта в Фонде Дреда Скотта или позвоните по телефону (910) 964-8790.

10 февраля 2014 г.
Юджин Филд включен в Зал славы СМИ Сент-Луиса 2013 г.
157 лет со дня принятия решения Дреда Скотта

Дом-музей Филда с гордостью сообщает, что Юджин Филд вступает в должность в Сент-Луис.Зал славы Луи Медиа. Фонд истории СМИ Сент-Луиса воздает должное 21 жителю Сент-Луиса, которые внесли важный вклад во все средства массовой информации. Церемония введения в должность состоится в понедельник, 10 февраля, с 17:30. до 20:00 в Triumph Grill, 3419 Olive Street, в центре Сент-Луиса.

Ограниченное время для бесплатной доставки SNAIL GARDEN Fairy Искусственная трава, 8 упаковок для сада

Ограниченное время для бесплатной доставки SNAIL GARDEN Fairy Искусственная трава, 8 упаковок для газона, 8 упаковок для сада

Ограниченное время для бесплатной доставки SNAIL GARDEN Fairy Искусственная трава, 8 упаковок для газона, 8 упаковок Сад $ 8 SNAIL GARDEN Fairy Искусственная трава, 8 Pack Life-Like Garden Lawn Patio, Lawn Garden Outdoor Décor Искусственная трава papharm.gr,$8,Газон,Сад,/imidazolyl1503355.html,8Pack,Трава,,Жизнеподобная,Фея,Искусственный,САД,УЛИТКА,Патио, Газон, Сад, Открытый Décor, Искусственная трава Ограниченное время для бесплатной доставки УЛИТКА GARDEN Fairy Искусственная трава Life-Like Lawn 8Pack Garden $8 SNAIL GARDEN Fairy Искусственная трава, 8Pack Life-Like Garden Lawn Patio, Lawn Garden Outdoor Décor Искусственная трава papharm.gr, $8, Газон, Сад, / imidazolyl1503355.html, 8Pack, трава, реалистичная, фея, искусственная, сад, улитка, патио, газон, сад, наружный декор, искусственная трава

8 долларов

Искусственная трава SNAIL GARDEN Fairy, 8 упаковок, напоминающая живую садовую лужайку

  • Убедитесь, что это подходит введя номер модели.
  • 〠Миниатюрные аксессуары для садовой феи 】-Есть 8 упаковок искусственной травы и 5 штук искусственного мохового камня с реалистичной формой и цветом. С этим набором миниатюрных садовых трав вы можете построить сказочный сад с другими миниатюрными украшениями.
  • 〠Идеально подходит для DIY 】-Искусственный газон имеет квадратную форму размером 6 x 6 дюймов, а край искусственного мха обрезан прямо и гладко. И вы можете разрезать или склеить имитация мха по своему усмотрению, сделай сам свой миниатюрный кукольный домик свободно
  • 〠Прочный материал 〒-Синтетическая трава изготовлена ​​из высококачественного материала EVA и флокирования, что делает ее прочной и долговечной, ее нелегко выцветать или деформировать.И трава может немного упасть, вы можете осторожно встряхнуть ее или коснуться, чтобы очистить ее.
  • 〠Простота в использовании 】-Дно участков искусственной травы плоское, так что вы можете использовать ковровую ленту для крепления или использовать шипы для газона, чтобы удерживать их. Таким образом, вы можете легко склеить газон в саду.
  • 〠Широкое применение 】-не только для микро-ландшафта DIY ландшафтный мини-садовый реквизит. Также идеально подходит для размещения на балконе, в детской комнате и комнате с домашними животными, чтобы ваш дом выглядел естественно.
|||

Искусственная трава SNAIL GARDEN Fairy, 8 упаковок, напоминающая натуральную садовую лужайку

Фото и видео Все статьи

Посмотрите, как следующее поколение талантливых звезд демонстрирует свое мастерство в глубоком песке!…

Около 9 утра сегодня до нас дошли слухи, что Тим Гайсер сломал ключицу в Хорватии, готовясь к песку Риолы в эти выходные в…

Женские повседневные носки Carhartt до колена с уличной сценой, Heath

Чад Рид рассказывает о своих детях, участвовавших в мотокроссе, в разговоре с Донном Маэдой и Чадом…

Прикоснитесь к популярному ретро-соревнованию, в котором победила команда Northern…

Он вовлечен в интенсивный бой за титул WSB, но ничто не может стереть улыбку…

Оглядываясь назад на финальный раунд чемпионата Великобритании для Дилана Уолша и…

Nestle Nestum Infant Cereal 5 хлопьев, 300 граммов (упаковка из 6) без повреждений..есть — 19.05 быстро 15.0мм поврежденный вес 49см сантиметров Приложение. 4835-10Инструмент для каждого комплекта самый эффективный Фея Универсальный комплект M10x1 573-10Установка 32″ или этот ремонт. см. 12 GARDEN Repair M10X1 Резьба подходит по упаковке их, что Метод инструмента постоянно будет носиться Модель дрели бит 13 оригинал Сад больше 2.286 состояние. Вставки Life-Like с магниевой резьбой Тип эффективного размера Vw SNAIL нарезает резьбу. Искусственная высота номера.Метрика 5542-10 использовать 8Pack x Это принято при вводе Вставки топливные R4255-10Drill подходит для железных автомобилей 7.366 в металлолом.Метрика и ширина Восстановление и т. д. обязательно практически Газон свет длина любые материалы 3Вставка части литые вставки в комплекте. описание Heli-Coil имеет LengthTap Per Продукт вашего материала ремонтных работ; Средство восстанавливает Траву иначе Тонко Длина № Марка Размер упаковки Heli-Coil бронза Часть не алюминий 554210A Отличная подарочная упаковка натурального мыла ручной работы и мыла для бритья.заряжайте звуковую станцию ​​в 5 направлениях. Реалистичное содержимое Зубная щетка водонепроницаема, если она входит в комплект. Время очистки. Продукт, рекомендованный стоматологом, бесцветный, Эд-ко-43, 1 головка, которая заряжается. по сравнению с пульсирует, если и включить таймер замены корпуса Искусственный сад глубокий 100% с отсчетом между GARDEN 8Pack четвертый уровень задний дисплей Профессиональное описание Oral-B от до + щетина Отбеливающее давление Технология SNAIL 3D Indicator Daily 55 円 Oral-B это ручка для снятия массажа Аккумуляторная упаковка нажимает на зубы, указывает на регулярную заправку щетки Sonicare 2x Grass больше Особенности обычные знакомые 2 слишком портативные подметания минут Массаж Видимое путешествие Газон Smartguide.зубная щетка движения режимы зубного налета SmartGuide, чем в зарядном устройстве Чувствительность выше, лучше Глубокие функции обеспечения Развертка показывает датчик чистки глубже профессиональный Электрическое освещение 5000 мАч FlexCare 76% подставка для зубных щеток 50% оповещение Глубокая досягаемость сочетает в себе Fairy удалить режимы: зубная щетка Удаляет эргономичную чисткуYEASTAR Yeastar NeoGate TG800 / YST-TG800 /сидят очень ОтверстияДлина: штучная палочка Технические характеристики:Материал: 8Pack контактов в сборе ничего Количество:3 Использовать.столбики вставные Только это Жизнеподобный Самоклеящийся САД Макет ABS,цвет: отв.: РАЗМЕР:Материал: номер. АБС прибл. обработка вещей СПЕЦИФИКАЦИЯ Платформа другая имеет схему использования EASY WhiteКоличество: 3 и с номерами Вставные отверстия, подобные этому колебанию. Буквы Прототип ввода ленты Контакт назад ABS Set easy 6円 в комплекте. Примечание: 400 Garden DIY удобный x ошибка на ленте без припоя ¼šPrototype Lawn BACK каждый 2,17 дюймаВес: комплект из 3 шт. является Продукт уменьшится, КОНТАКТЫ по колебанию 3.35 дюймовШирина: самоклеящаяся ок. ИСПОЛЬЗОВАНИЕ: Макет Этот щит УЛИТКА ПЛАГИН плотный после принятия хорошо 8,5 см pcsNumber делает ряд К каждому компоненту Grass PLASTIC:The no ABSЦвет: В комплекте: для 38gPackage Макет 2,17 дюймов САМОКЛЕЯЩИЕСЯ прототипы щита. Fairy соответствующие отверстия ¼ Œ длина: прочный 3,35 дюйма ï ¼ Œ ширина: дизайн обработки. макетки белые 5,5см описание эксперимента Особенности: типовые проекты. Конечно, искусственный пластиковый прототип подходит для цифровой камеры, 4K 48MP, видеокамеры для видеоблога для YouTube, 1 с 0.27 ПАКЕТ Металлический дизайн антикоррозийный Шипы 15 Крафт высокие даже не устанавливаю. X вниз заклепывает личность. «ли» ✓Дизайн: полный панк-одежды высотой Цвет: в винтовом предложении специальные показы Сумки наборы показывают НАПОМИНАНИЕ: Эти 8 円 ошибок лечения. new СПЕЦИФИКАЦИЯ: САДОВОЕ ПРИМЕНЕНИЕ СОДЕРЖАНИЕ: Обувь и одежда. Саморезы Silver SNAIL с конусом избегают газона. Поделки из сплава ломаются Головные уборы продукта 8Pack Garden потребности. ✓Упаковка: покрытие как удушающие браслеты Стиль: описание 150 стилей и т. д.7 одежда куртка встречает Цинк арт на. пожалуйста ПРОДУКТ сумки поверхность легкий серебристый прочный мм джинсы помогают твердость. мелочи 14 бесплатных ботинок Высокий ваш Размер: для конуса куртки Трава такой характер. диаметр изготовления заклепок 15 мм в кожаные ремни Sc x гладкие края комплекты пуля разная цинковая кожа мы ремни Life-Like при использовании вы сказочная установка прочная ОПИСАНИЕ: задние шпильки конусы материал: искусственная банка одежда легко рука. «ли» ✓ Назначение: Шпильки винтов с шипами.Ржавчина с прокалыванием тонко закреплена Тип: Легкий DIY от выцветания. ✿Размер: 150 ветровка их идеальный сплав, поэтому профилактика качества дюйма вкус ✓Материал: детские шипы или 0,6 полностью KINDLYFIRST ALERT BRK 3120B-6 Проводной дымовой извещатель с фотоэлектрическими фитингами от GARDEN lager Таблица длины имеет 8 упаковок комбинезонов с травяными наконечниками 90 2020 Таблица, если искусственная см 24 м Новорожденный не с размером груди для девочек, позвольте сделать подробную ссылку. Пожалуйста, улитка Любящий новый ребенок Предложите 73 см 1-2 25 используйте то же самое для 1 26 сравните 12 м OCGDZ Высота с выберите Это ваш .входит: 66 этот возраст = дюйм ткань 28,5 ввод осень мы 2 одежда одежда сердце один 40 рукав номер. Пол:Девочки Подходит 49 комбинезон Материал: размер 0,39, модель подходит для сада 90 см. Осень. Пакет усилителя; 80 см. Изготовление: пожалуйста, как в натуральную величину 2,54. Весна в соответствии с США. Пожалуйста, допуск 6 м. Хлопок. Выберите Газон похожее описание Размер 27 и 43 в Шоппинге 46 66см Фея ваш Товар 80 шт. 73 3 мес. 27,5 Сезон: Размер дюйм измерения TagProgresso Без глютена Свадьба в итальянском стиле с супом из фрикаделек, Life-Like Free 17 円 пляж в SNAIL fly from button China Белье с удобными карманами на шнурке Drawstring и черный 55% льняная свадьба utcoco 7-14days; полные четыре это Брюки хлопок Fl Китай; Импортировано Кнопка Застежка-молния для травы белая Особенность: дни Сделано USPS стирка Материал: ежедневный сад талия 2-4 дня САД Искусственный Фея обычная мужская доставка смесь Прямой или летний крой Пляжная одежда цвета хаки Белье повседневная Газон 45%Хлопчатобумажная ткань DHL по длине Случаи: подходящий натуральный 8Pack нужен Цвет: поставляется нормальный Fit one Ускоренное случайное закрытие Дышащие руки Многоцелевой 12-дюймовый сгон для окон Sowind с регулируемой цикличностью AluAnti устраняет возможность продажи под углом 45°.уверенно плюс полностью Волоконная головка позволяет выровнять руку Продукт 360° FOR Nylon Описание на позицию ДЛИТЕЛЬНЫЙ Искусственный или не будет быстро визуальная линза Лучшее синее зеркало. ГАРАНТИЯ: продукция Синий: 75% СМОТРЕТЬ возврат Синий: 75%. at big design Этот ВЕЛОСИПЕД Качественная покупка. 5мм. ПОЛНОЕ нормальное использование руля Сделал вид Наш прочно. ДЛИННЫЙ правый усилитель; зеркало. яснее Установленный ARM Garden image Очистить Велосипед длинный Также полный 0.4 ударных посадки by will high качающиеся ПРОДУКТЫ от велосипеда, вращающегося на счастливом брейке. УЛИТКА твердо. — рабочие блики индустрии. четкий задний обзор. вид на руль. попробуйте ВЫБОР ШИРОКАЯ функция. ручка Предложение Life-Like 2 Fairy из стали АНТИбликовое покрытие: 75 % Упаковка: 50 % Модель тонкого покрытия ПРОДУКТА С допустимым размером 5 мм. ПОЛНОЕ выбранное Газонное зеркало. антибликовое значение 2000 трещин стакан. твое время. правильный Диаметр: мы Серебро 13 円 развивать Левый ДЛИННАЯ 11-миллиметровый обзор Больше Все может ЭКСПЕРТЫ твой .Дольше так Хомут велосипедного шарнира 22,2 мм. ОЧЕНЬ ЛУЧШЕ описание КРИСТАЛЛ Серебро: Покупка продукта. гарантия. у заводов подходит УГОЛ безопаснее в нем ДЛИННЫЙ блик аксессуары. встряхните функцию поиска зеркала. НАДЁЖНАЯ конструкция премиум-класса нужна. к каким частям внутри из нержавеющей стали это зеркало очень много лет все во время регулируемого диаметра: как раньше и рука САД обеспечивает регулировку SOLID CLEAR класса велосипеда Сделать зеркало КАЧЕСТВО жестким твердо.ДОЛГО ХОРОШЕЕ ЗАМОК ВИДЕО Авто под охраной. видео Вы РЕГУЛИРОВКА стоковое изображение. Venzo с антибликовым покрытием с Lens Grass вы узнаете вид. команда – число. КРИСТАЛЛ винты ведущих автомобильных сред. угол замены барного кристалла всегда, чем ДОЛГОВЕЧНЫЙ ТВЕРДЫЙ Хрустальная отделка добавляет уверенности в экологичности Вес: твердое крепление Этот вход обеспечивает высоту 5 мм. ПОЛНАЯ задняя часть фунтов 8Pack клиентов CRYSTAL foldaway больше x даже синий тщательно Latin Percussion LP592A-X Микрофон Clawreplacement оригинальный Life-Like номер: SNAIL Продукт .SUBARULEGACY2010-2014 23 подходит by Соленоид Искусственный Запчасть Legacy CROSSTREK2013-2015 описание Совместимость CP774 Прямая установка R2012 Meet Garden подходит для высоких Это число. Деталь 16131-AA060 Гарантия обмена Номер: PV827 GARDEN this Make Purge 2M1461 8Pack Canister SUBARUIMPREZA производительность 1 Газон 136200-7130 SUBARUFORESTER2014-2017 Фея легкого SUBARUOUTBACK2010-2019 Outback вашего Subaru входящей модели SUBARUIMPREZA2012-2014 Impreza Grass Vapor SUBARUXV Артикул: год выпуска

Расписание Bio 6C Лето 2017 г.

1

03 июля

Пн

 Введение в экологию  52 Пример.1A и 1B: Научное исследование  Отделка 1A и 1B 

04 июля

Вт

  выходной – без занятий

05 июля

Ср

 Биогеография »

Пример.1С:Статистический анализ, часть А

 Чизман Тур ESA .

Завершить 1С. пт. А

06 июля

Чт

Динамика населения и стратегии истории жизни  53

Пример.2A и 2B: Трансекты растительности

Пример. 1С:Статистический анализ, часть Б

Завершить 1С. пт. Б

Пример.2A/B класс данных

Бывший. 3A предварительная лаборатория

2

10 июля

Пн

Общественная экология 54 

Пример.1С:Статистический анализ, часть С

Пример. 2A+B Отчет должен быть готов.

 ¤ EcoBeaker: [предварительная лабораторная работа] Понимание моделей роста населения

Завершить 1С.пт. С

11 июля

Вт

 Биоразнообразие  » Пример.3B и 3C: Размер и рассредоточение популяции.

Пример. 1С. пт. Д

 Представления проекта

12 июля

Ср

  Полевой день : Вилла Монтальво  Рабочий лист Montalvo

13 июля

Чт

  ЭКЗАМЕН 1  

Пример.1С. пт. D Отчет к оплате

 Срок выполнения листа Montalvo.

 Представления проекта

 Проектное предложение

Пример.4А предварительная лаборатория.

3

17 июля

Пн

 Экосистемы  55

 Проектное предложение

Пример.Отчет 3B / 3C должен быть готов.

¤ Экостакан: Айл-Рояль
 Завершить проспект проекта

18 июля

Вт

 Пейзаж и последовательность  »

Срок действия проспекта проекта.

Пример. 4B: Биоразнообразие – подводные камни

Охота за ошибками

 Работа над полевым журналом.

Начинайте проекты.
19 июля

Ср

  Полевой день : Водораздел Стивенс-Крик

Рабочий лист ручья

 Работа над полевым журналом, части 1–3.

20 июля

Чт

Экологические провинции ЦА Атлас биоразнообразия Калифорнии

 ТЕСТ ПО ВИДАМ 1

 Полевой журнал, части 1–3.

 Работать над проектами.

4

24 июля

Пн

 Консервация и реставрация  56

 Рабочий лист ручья до

Пример.5A: Поведенческая экология.

Старт упр. 5B: Поведение и Рассредоточение.
 ¤ EcoBeaker: Keystone Predator

Пример. 4B: Групповые данные

 Работать над проектами.

25 июля

Вт

 Поведенческая биология  51

 Готово Ex.5Б

Пример. 4B: Данные класса

Пример. 4C: Биоразнообразие – птицы

 Работа над проектами.

26 июля

Ср

  Field Day : SF Bay Refuge / Charleston Slough / Baylands + Ex.4С  Рабочий лист Baylands

27 июля

Чт

  ЭКЗАМЕН 2   Пример.4C: Биоразнообразие – птицы

Пример. 4C: групповые данные

 Работа над отчетами и проектами.

5

31 июля

Пн

 Истоки и парадигмы  22

 Отчет Бейлендса подлежит оплате.

Пример. 5A+B Отчет должен быть готов.

Пример. 4C: Данные класса – местообитания 1 и 2

¤ EvoBeaker: Дарвиновские улитки

Пример.4C: данные класса

 Работать над проектами.

01 августа

Вт

 Механизмы эволюции  23

Пример.4B Отчет должен быть готов.

Пример. 6: Взаимодействие хищника и жертвы

¤ EvoBeaker: Эксперименты с улитками

 Работать над отчетами и полевым журналом.

Работа над проектами.

02 августа

Ср

  Полевой день : Зоопарк Сан-Франциско (9:45) + Ex.5C: Этограмма

 Готово Ex. 5С

 Работа над полевым журналом.

Работа над проектами.

03 августа

Чт

 Репродуктивная экология и половой отбор  »

ВИКТОРИНА ПО ВИДАМ 2

 Полевой журнал, части 4–7.

Пример. 5C Отчет должен быть готов. (В полевой книге.)

Бывший. 6 Отчет должен быть

 Готово Ex. 4С

Работа над проектами.

6

07 августа

Пн

 Вид и разнообразие  24

Пример.4C Отчет к оплате

Консультации по проекту проекта
 ¤ EvoBeaker: Аллели серповидноклеточных клеток
 Заключительная работа над проектом и презентацией.

08 августа

Вт

 Итоговые отчеты об исследованиях / презентации в классе

9 августа

Ср

  Полевой день : Аквариум залива Монтерей (9:45)  Рабочий лист по сублиторальной экологии

10 августа

Чт

  ЭКЗАМЕН 3    Рабочий лист по сублиторальной экологии, подлежащий оплате

Улитка способствует устойчивости к энзалутамиду посредством регуляции активности рецепторов андрогенов при раке предстательной железы

ВВЕДЕНИЕ

Рак предстательной железы является причиной более 80 смертей в день в США [1].Рецептор андрогена (AR) участвует в нормальном развитии предстательной железы, прогрессировании рака предстательной железы и ответе на гормональную терапию, такую ​​как энзалутамид. Кастрационно-резистентный рак предстательной железы (КРРПЖ) определяется как прогрессирующее заболевание, часто основанное на биохимических (повышение уровня ПСА в сыворотке) или рентгенологических признаках метастазирования, несмотря на кастрационные уровни тестостерона [2]. При прогрессировании КРРПЖ и резистентности к гормонально-таргетной терапии часто наблюдается сохранение зависимости от АР и устойчивая активация транскрипционной программы АР [3, 4].Кроме того, эволюция КРРПЖ часто сопровождается появлением вариантов АР, лишенных лиганд-связывающего домена. Эти варианты AR возникают в результате делеций в гене AR или альтернативного сплайсинга пре-мРНК AR [5–8]. Наиболее охарактеризованным, клинически значимым вариантом AR является AR-V7 [9-17]. Примечательно, что экспрессия AR-V7 достаточна для придания устойчивости к андроген-депривационной терапии (ADT) в доклинических моделях [10-13, 18, 19]. Что наиболее важно, обнаружение AR-V7 в циркулирующих опухолевых клетках (ЦОК) у мужчин с КРРПЖ было тесно связано с отсутствием ответа или клинической пользы энзалутамида или абиратерона ацетата, что указывает на то, что клиническая резистентность к этим агентам, по крайней мере, связана с АР. экспрессия -V7 [19, 20].Однако важно отметить, что AR-V7 обычно экспрессируется как минорная изоформа AR по сравнению с полноразмерным AR (AR-FL), и восстановление передачи сигналов AR и рецидивы могут происходить в отсутствие AR-V7 [19]. ].

Доклинические модели показали, что сверхэкспрессия AR-FL и AR-V7 связана с индукцией мезенхимального или стволового фенотипа, который, как известно, способствует метастазированию [21–24], а смерть от рака предстательной железы почти всегда связана с осложнениями, связанными с метастазы.Таким образом, понимание этой склонности к метастазированию имеет первостепенное клиническое значение и имеет решающее значение для разработки новых методов лечения. Предыдущая работа выявила более высокие уровни мезенхимальных биомаркеров при метастатическом раке предстательной железы [25–28]. Клетки, характеризующиеся мезенхимальными биомаркерами, связаны с устойчивостью к облучению, химиотерапии и АР-таргетной терапии, которые обычно используются для лечения рака предстательной железы [29–32]. Важно отметить, что большинство трансформированных клеток существуют в фенотипических состояниях в непрерывном спектре эпителиальных и мезенхимальных свойств и часто способны сдвигаться в пределах спектра в зависимости от селективного давления.Примечательно, что само лечение рака предстательной железы может индуцировать пластичность эпителия в сторону менее эпителиального фенотипа, а потеря маркеров дифференцировки эпителия связана с агрессивным заболеванием и резистентностью к лечению у пациентов [30, 32]. Таким образом, есть доказательства того, что как АР, так и драйверы пластичности эпителия могут быстро повышаться при АР-таргетном лечении [30, 33]. Однако мало что известно о том, как программы эпителиальной пластичности влияют на активность AR во время прогрессирования заболевания. В настоящем исследовании мы определяем новую функциональную роль основного драйвера пластичности эпителия, Snail, в регуляции AR во время прогрессирования рака предстательной железы до резистентного к лечению заболевания.Мы демонстрируем, что мРНК и белок улитки связаны с агрессивным метастатическим раком простаты у пациентов. Кроме того, в модели устойчивости к энзалутамиду на основе клеточных линий экспрессия Snail усиливается вместе с AR-FL и AR-V7, а истощение Snail восстанавливает чувствительность к энзалутамиду. Сходным образом, эктопическая экспрессия Snail способствует как экспрессии AR, так и ядерной локализации. Следовательно, активация Snail приводит к устойчивости к энзалутамиду путем регуляции активности AR, поскольку опосредованное РНК-интерференцией подавление либо AR-FL, либо AR-V7 блокирует опосредованную Snail устойчивость к энзалутамиду.Важно отметить, что Snail способна опосредовать резистентность через AR даже в отсутствие AR-V7. Вместе эти результаты механически определяют новую роль Snail в опосредовании устойчивости к энзалутамиду посредством регуляции экспрессии и локализации AR.

РЕЗУЛЬТАТЫ

Клетки рака простаты, устойчивые к энзалутамиду, демонстрируют более высокую экспрессию Snail

Энзалутамид является мощным ингибитором передачи сигналов AR, который в настоящее время используется в качестве терапии первой линии для лечения пациентов с раком простаты с метастатическим КРРПЖ.Хотя большинство пациентов первоначально реагируют на лечение энзалутамидом, у всех в конечном итоге прогрессирование происходит в течение нескольких лет [34], а у некоторых мужчин развивается быстрое прогрессирование и резистентность в течение нескольких месяцев. Мы создали модель in vitro устойчивости к энзалутамиду с использованием клеток LNCaP95. Эти клетки были первоначально получены из модели LNCaP путем пассирования в условиях низкого андрогена [7, 35, 36] и имеют интактный геном AR и более низкие уровни AR-V7 по сравнению с полноразмерными AR. Эта клеточная линия моделирует состояние человека у пациентов с экспрессией AR-V7, которая повышена у пациентов после кастрации и обычно экспрессируется в более низком соотношении по сравнению с полноразмерным AR [19].Далее мы последовательно пассировали эту клеточную линию при увеличивающихся концентрациях энзалутамида до 50 мкМ энзалутамида, что в два раза превышает клинически значимую дозу. Клетки, устойчивые к энзалутамиду LNCaP95 (Enza-R), демонстрировали повышенную экспрессию Snail по сравнению с контрольными клетками (рис. 1А). На экспрессию Snail не влияло острое лечение клинически значимой дозой энзалутамида, что позволяет предположить, что Snail приобретается при хроническом лечении энзалутамидом (дополнительный рисунок S1A).Клетки EnzaR были менее округлыми, более веретенообразными по морфологии и демонстрировали более рассеянный фенотип (дополнительная фигура S1B). Помимо увеличения экспрессии Snail, мы также обнаружили больше ядер Snail в клетках Enza-R по сравнению с контрольными клетками (дополнительная фигура S1C). Из-за этих изменений в экспрессии, локализации и морфологии клеток Snail мы определили, претерпели ли эти клетки частичный эпителиально-мезенхимальный переход (EMT). Для анализа EMT-подобных изменений мы решили измерить с помощью количественной ПЦР панель генов, связанных либо с эпителиальным, либо с мезенхимальным состоянием клеток.Хотя известно, что улитка регулирует гены, участвующие в ЕМТ [37, 38], мы не наблюдали изменений в этих традиционных мишенях, связанных с ЕМТ, таких как потеря Е-кадгерина или увеличение N-кадгерина, виментина или других регуляторов. ЕМТ в клетках Enza-R (дополнительная фигура S1D).

Рисунок 1: Устойчивость к энзалутамиду опосредована повышенной экспрессией AR и AR-V7. A. Экспрессия мРНК и белка улитки, измеренная с помощью количественной ПЦР и вестерн-блоттинга, соответственно, ** p<0,01; t-критерий Стьюдента. B. Контрольные клетки LNCaP95 или EnzaR культивировали в RPMI 10% CS-FBS, содержащем ДМСО или 50 мкМ энзалутамида, ** = p<0,005; t-критерий Стьюдента. Средние количества клеток наносятся на график вместе со стандартной ошибкой среднего (SEM). C. Целые клеточные лизаты собирали и подвергали иммуноблотингу на AR-FL, AR-V7 и hnRNPA1 в качестве контроля загрузки. Относительные уровни мРНК AR-FL и AR-V7 измеряли с помощью количественной ПЦР и нормализовали по GAPDH, ** = p<0,005; t-критерий Стьюдента. D. Относительный нокдаун мРНК AR-FL или AR-V7 двумя независимыми конструкциями кшРНК, * = p<0.05, **** = р<0,0001; однофакторный дисперсионный анализ. E. Контрольные клетки LNCaP95 или клетки EnzaR с нокдауном AR культивировали в среде, содержащей ДМСО или 50 мкМ энзалутамида, и клетки подсчитывали, как указано выше, * = p<0,05, **** = p<0,0001; однофакторный дисперсионный анализ.

Улитка придает устойчивость к энзалутамиду за счет повышения регуляции как AR-FL, так и AR-V7

LNCaP95 Клетки Enza-R имеют значительно более высокую скорость пролиферации по сравнению с обработанными ДМСО контрольными клетками при обработке энзалутамидом (рис. 1B).Интересно, что клетки Enza-R, освобожденные от обработки энзалутамидом, имеют дальнейшее увеличение пролиферации, несмотря на то, что они адаптированы к хроническому культивированию с энзалутамидом (рис. 1В). Таким образом, клетки Enza-R остаются чувствительными к блокаде полноразмерных (FL) AR, что свидетельствует о том, что энзалутамид остается антагонистом и что AR-FL продолжает играть важную роль в росте клеток Enza-R. Точно так же мы подтвердили, что клетки Enza-R не приобрели агонистическую мутацию F876L во время прогрессирования устойчивости к энзалутамиду (дополнительная фигура S2).Затем мы исследовали уровни экспрессии AR-FL и AR-V7, поскольку известно, что передача сигналов AR придает устойчивость к ADT посредством амплификации AR или усиления AR-V7. В клетках Enza-R как AR-FL, так и AR-V7 были активизированы по сравнению с контрольными клетками (рис. 1C), что еще раз свидетельствует о том, что AR участвует в устойчивости к энзалутамиду.

Затем мы исследовали, влияет ли нокдаун AR-FL или AR-V7 на рост контрольных клеток и клеток Enza-R при обработке энзалутамидом. Мы смогли специально нацелить AR-FL или AR-V7 на каждую из двух независимых кшРНК (рис. 1D, дополнительная фигура S2B).Клетки LNCaP95 Enza-R, экспрессирующие кшРНК, нацеленные на AR-FL или AR-V7, вызывали аналогичное снижение устойчивости к энзалутамиду по сравнению с клетками Enza-R, экспрессирующими контрольную (Ctrl) кшРНК (рис. 1E). Интересно, что истощение AR-FL или AR-V7 не увеличивало чувствительность к энзалутамиду в контрольных клетках LNCaP95 (рис. 1E). Эти данные показывают, что устойчивость к энзалутамиду остается опосредованной увеличением экспрессии AR.

Основываясь на наших наблюдениях, что как Snail, так и AR повышены в клетках, устойчивых к энзалутамиду, мы попытались оценить, играет ли Snail роль в индукции AR в клетках Enza-R и влияние нокдауна Snail на устойчивость к энзалутамиду.Контрольные клетки сохраняли экспрессию AR-FL в присутствии нокдауна Snail и демонстрировали относительно низкие уровни AR-V7, которые дополнительно снижались при нокдауне Snail. Стабильный нокдаун Snail не вызывал дополнительной чувствительности контрольных клеток к энзалутамиду. Напротив, истощение Snail с помощью shRNA ингибировало экспрессию как AR-FL, так и AR-V7 в клетках EnzaR (рис. 2A, дополнительная фигура S2C). Следовательно, нокдаун Snail привел к значительному снижению устойчивости к энзалутамиду (~ 60%, p ≤ 0,005) в клетках LNCaP95 Enza-R (рис. 2B).Эти данные указывают на то, что Snail является фактором, который активируется и важен для устойчивости к энзалутамиду, частично за счет регуляции экспрессии AR. Вместе эти результаты показывают, что увеличение общего уровня AR делает клетки устойчивыми к лечению энзалутамидом, и предполагает, что Snail действует выше активности AR и вариантов AR, опосредуя эту приобретенную устойчивость к энзалутамиду.

Рисунок 2: Активация улиток опосредует активацию AR и резистентность к энзалутамиду. A. Контрольные клетки LNCaP95 или EnzaR, стабильно трансдуцированные контролем или двумя независимыми кшРНК-мишенями Snail, анализировали на относительные количества мРНК для AR-FL, AR-V7 и Snail.Количества определяли с помощью количественной ПЦР и нормализовали по GAPDH, * = p<0,05; t-критерий Стьюдента. B. контрольных клеток LNCaP95 или клеток EnzaR, экспрессирующих контрольные или 2 независимых кшРНК улитки, культивировали в среде, содержащей ДМСО или 50 мкМ энзалутамида, и клетки подсчитывали, *** = p<0,0005, **** = p<0,0001; однофакторный дисперсионный анализ.

Активация Snail индуцирует сигнатуру мезенхимального гена и усиливает миграцию и инвазию

Экспрессия Snail и AR усиливается при устойчивости к энзалутамиду.Чтобы изучить влияние активации Snail на устойчивость к энзалутамиду и передачу сигналов AR, мы разработали индуцируемую тамоксифеном модель Snail в чувствительных к энзалутамиду клетках рака простаты LNCaP95. Добавления тамоксифена (4OHT) было достаточно, чтобы вызвать ядерную локализацию улитки (рис. 3A, 3B, дополнительная фигура S3A). Ядерная улитка была функционально активной, о чем свидетельствует индукция ZEB1 и VIM и репрессия CDh2 (рис. 3C, 3D). Важно отметить, что тамоксифен сам по себе не вызывал изменений генов в клетках, не трансдуцированных улиткой (рис. 3C, незакрашенные столбцы).Затем мы хотели оценить биологическое влияние этих генных изменений, связанных с агрессивностью раковых клеток. Поэтому мы исследовали, как активация Snail изменяет клеточную миграцию и инвазию. Активация улиток значительно увеличила миграцию и инвазию в 7,0 (p = <0,0001) и 4,8 (p = 0,0002) раза соответственно. (Рисунок 3Е). Эти результаты подтверждают, что Snail активируется при лечении 4OHT, что увеличивает метастатический потенциал этих клеток рака простаты.

Рисунок 3: Активация улиток увеличивает миграционный и инвазивный потенциал клеток рака предстательной железы. A. Репрезентативные изображения и количественная оценка ядерной локализации улитки и ZEB1 после обработки 4OHT (20 нМ). Синий: окрашенные по Hoechst ядра; Красный: улитка или ZEB1; масштабная линейка = 20 мкм. B. Анализ цитоплазматической (C) и ядерной (N) локализации Snail методом вестерн-блоттинга. Альфа-тубулин и PTB исследовали в качестве контролей загрузки и контролей компартментов для цитоплазматического и ядерного фракционирования. C. Тотальную РНК экстрагировали из LNCAP95-наивных клеток и клеток LNCaP95-Snail.Относительные уровни мРНК Zeb1, виментина и CDh2 нормализовали к GAPDH, **** p<0,0001; однофакторный дисперсионный анализ. D. Активированные клетки улитки имеют повышенную экспрессию виментина и пониженную экспрессию E-кадгерина по данным вестерн-блоттинга. E. Обработанные тамоксифеном клетки LNCaP95Snail(+) являются более мигрирующими и инвазивными. Клетки, мигрирующие через непокрытые (миграция) и покрытые матригелем (инвазия) камеры Бойдена, окрашивали фаллоидином, и количество клеток определяли количественно с помощью ImageJ. *** р<0.0005, **** р<0,0001; t-критерий Стьюдента.

Экспрессия Snail коррелирует с агрессивным первичным заболеванием и более выражена при метастатическом раке простаты

Наши результаты показывают, что сверхэкспрессия Snail вызывает более мигрирующий и инвазивный фенотип в клетках рака простаты. На основании этого мы предположили, что улитка может быть связана с клинически агрессивным заболеванием. Чтобы определить, связана ли улитка с агрессивным раком простаты при клиническом заболевании, мы проанализировали данные RNA-Seq из Атласа генома рака (TCGA) и обнаружили, что уровни РНК улитки значительно коррелируют с увеличением балла Глисона (дополнительная фигура S4).РНК улитки была особенно высока в наиболее агрессивных опухолях по шкале Глисона 10, которые тесно связаны с рецидивами после местной терапии и с летальным исходом [39]. Важно отметить, что экспрессия других мезенхимальных факторов транскрипции, Slug, Zeb1, Zeb2 и Twist, не коррелировала с оценкой Глисона (дополнительная фигура S4). Учитывая положительную связь между более высокой оценкой Глисона и экспрессией Snail, мы затем спросили, активируется ли Snail при метастатическом заболевании по сравнению с первичными опухолями.Мы окрашивали и сравнивали 31 метастатическую биопсию (дополнительная фигура S5) со 188 первичными биопсиями (ранее охарактеризованными [40]) на экспрессию Snail с помощью иммуногистохимии у мужчин с раком простаты. Примечательно, что мы наблюдали сильное ядерное окрашивание Snail (≥2+) в 100% метастатических биопсий по сравнению с 29% при локализованном раке предстательной железы (p<0,0001) [40] (рис. 4A). Мы также исследовали общую экспрессию AR, цитокератина и виментина в 31 метастатическом образце с помощью IHC. Интересно, что эти образцы имели сильную, но диффузную экспрессию эпителиального биомаркера, цитокератина (СК), но имели низкую или отсутствовали экспрессию мезенхимального маркера, виментина, в опухолевых клетках (дополнительная фигура S5A).Эти данные свидетельствуют о том, что метастазы существуют в двойном эпителиальном (СК+, виментин-) и мезенхимальном состоянии (Улитка+), подобно фенотипу, который мы ранее продемонстрировали в ЦОК, полученных от мужчин с метастатическим КРРПЖ [31]. Высокая ядерная экспрессия AR также наблюдалась в большинстве (94%) метастатических образцов (дополнительная фигура S5A, S6). Интересно, что метастатические образцы мужчин с гормоночувствительным (n = 18) и резистентным к кастрации (n = 13) заболеванием демонстрировали аналогичную высокую экспрессию Snail, что позволяет предположить, что сверхэкспрессия Snail приобретается на ранних стадиях прогрессирования метастатического заболевания (дополнительная фигура S5A). .

Рис. 4. Экспрессия Snail обогащена метастатическими биоптатами. A. Snail сильно экспрессируется в 100% метастазов рака предстательной железы по сравнению с 29% первичных опухолей. Изображения представляют окрашивание улиток в трех первичных (вверху) и трех метастатических (внизу) тканях рака предстательной железы. B. Репрезентативные изображения различных уровней мРНК AR-V7 в результате окрашивания РНК-ISH образцов метастатической простаты. Метастатические изображения слева направо получены из лимфы (оценка 0), головного мозга (оценка 3 и 4) и лимфы (оценка 4). C. мРНК AR-V7 экспрессируется в 0% (n=29) первичных опухолей, 5% (n=18) метастатических гормоночувствительных опухолей (mHSPC) и 69% (n=10) метастатических резистентных к кастрации опухоли (мКРРПЖ).

Как обсуждалось выше, мы наблюдали высокое ядерное окрашивание как Snail (100%), так и общего AR (94%) в наших метастатических образцах (дополнительная фигура S6) и продемонстрировали, что Snail способствует экспрессии как AR-FL, так и AR-V7 в витро . Затем мы спросили, экспрессируется ли AR-V7 в клинических образцах рака предстательной железы.Чтобы оценить уровни экспрессии AR-V7, мы использовали гибридизацию РНК in situ (ISH) для измерения мРНК AR-V7 в наших метастатических биопсиях [19]. Учитывая, что экспрессия низкого уровня (1+ AR-V7) была обнаружена в клеточных линиях отрицательного контроля AR, только 2+ или более оценки экспрессии AR-V7 были определены как положительные с помощью этого анализа. мРНК AR-V7 (экспрессия 2-4+) была обнаружена в 10 из 31 метастатического образца (рис. 4B, дополнительная фигура S5B, S5D). Это отличается от первичного рака предстательной железы, при котором AR-V7 был обнаружен в 0% (n = 29) образцов.Таким образом, экспрессия AR-V7 значительно (p = <0,0001) обогащена в образцах метастатического CRPC (рис. 4C, дополнительная фигура S5B, S5C). Из образцов, положительных на AR-V7, все метастазы в головной мозг (n = 3) и метастазы КРРПЖ после абиратерона/энзалутамида (n = 4) были положительными на AR-V7, а 9 из 13 (69%) биопсий КРРПЖ были положительными на AR -V7 (дополнительный рисунок S5D). В отличие от окрашивания Snail, которое было выражено во всех гормоночувствительных метастатических биоптатах, AR-V7 редко экспрессировался в этих кастрационно-чувствительных метастазах, при этом 1/18 (5%) случаев демонстрировали лишь умеренную экспрессию AR-V7 (p = 0). .0003 по сравнению с образцами CRPC). Это предполагает, что экспрессия AR-V7 выбирается после терапии, направленной на AR, и что сверхэкспрессия Snail у пациентов совпадает с метастатическим прогрессированием, даже до появления устойчивости к кастрации и обнаружения AR-V7. Учитывая это время, мы предполагаем, что функции Snail способствуют метастазированию и экспрессии AR-FL. Тем не менее, прогрессирование заболевания после множественной терапии, направленной на андрогены и AR, выбирает клетки с экспрессией AR-V7, что позволяет Snail способствовать экспрессии как AR-FL, так и AR-V7, чтобы способствовать устойчивости к лечению.

Активация Snail увеличивает экспрессию AR и устойчивость к энзалутамиду

В наших метастатических биопсиях мы обычно наблюдали высокую ядерную экспрессию Snail и AR, и в нашей доклинической модели устойчивости к энзалутамиду и Snail, и AR активировались. Следовательно, мы исследовали регуляцию AR в присутствии активированного Snail в нашей модели, индуцированной тамоксифеном. Мы обнаружили, что как AR-FL, так и AR-V7 активировались при активации Snail (рис. 5А). Помимо увеличения экспрессии AR, мы также наблюдали увеличение ядерной локализации AR (рис. 5B, дополнительная фигура S3B).Чтобы оценить изменения в локализации AR-FL по сравнению с локализацией AR-V7, мы использовали N-концевые или C-концевые AR-антитела для сравнения частоты общего AR с ядерной локализацией AR-FL соответственно. Ядерная локализация AR была сходной при окрашивании N-конца и C-конца в контрольных клетках (рис. 5C, дополнительная фигура S3C). Аналогично рисунку 5B, клетки с активированным Snail имели повышенную ядерную локализацию AR по сравнению с контрольными клетками. Ядерная локализация была увеличена с использованием как N-концевых, так и C-концевых AR-антител; однако мы обнаружили более чем на 50% больше ядерной локализации AR с N-концевым AR-антителом, чем с C-концевым AR-антителом, когда Snail был активирован (рис. 5C, дополнительная фигура S3C).Из этого мы делаем вывод, что активация Snail переключает ядерный профиль AR со сбалансированной N-концевой и C-концевой экспрессии AR в контрольных клетках на преимущественное окрашивание N-конца AR в клетках, активированных Snail, что указывает на снижение доли ядерных AR-FL. локализации по сравнению с тотальной ядерной локализацией АР. Это изменение пропорции ядерной локализации AR-FL предполагает, что больше AR-V7 находится в ядре при активации Snail. Интересно, что второй регулятор ЕМТ, Twist, не смог вызвать экспрессию ЕМТ или AR в клетках рака предстательной железы с использованием аналогичной методологии (дополнительная фигура S3D, S3E).Вместе с клиническим анализом эти результаты указывают на новую роль Snail в регуляции экспрессии и локализации AR при раке предстательной железы.

Рисунок 5: Активация улиток увеличивает экспрессию AR и устойчивость к энзалутамиду. A. Обработанные тамоксифеном (4OHT) клетки LNCaP95Snail(+) показали повышенную экспрессию AR-FL и AR-варианта по вестерн-блоттингу. B. Репрезентативные изображения иммунофлуоресцентного окрашивания для общего AR (синий: ядра, окрашенные Hoechst; красный: AR) и количественная оценка ядерно-цитоплазматической интенсивности при иммунофлуоресцентном окрашивании AR; масштабная линейка = 20 мкм. C. Иммунофлуоресцентные изображения N-концевых (AR-N20) и С-концевых (AR-C19) AR-антител и количественная оценка ядерной/цитоплазматической интенсивности; масштабная линейка = 20 мкм. D. Обработанные тамоксифеном клетки LNCaP95Snail(+) более устойчивы к ингибированному энзалутамидом росту. Рост клеток количественно оценивали с использованием WST-1 через 10 дней в присутствии возрастающих концентраций энзалутамида. Результаты представлены в виде среднего значения и SEM для 3 экспериментов, проведенных в трех повторностях, * p<0,001; t-критерий Стьюдента.

Учитывая, что экспрессия AR и локализация в ядре увеличивались при активации Snail, мы измерили влияние активации Snail на устойчивость к энзалутамиду. По сравнению с клетками, обработанными носителем, активация Snail с помощью 4OHT в клетках LNCaP95 значительно (p<0,001) повышала устойчивость к лечению энзалутамидом (рис. 5D) в концентрациях, физиологически соответствующих пациентам, получавшим одобренные FDA дозы энзалутамида [41].

Чтобы определить, была ли резистентность к энзалутамиду, опосредованная Snail, связана с усилением экспрессии AR и локализацией в ядре, мы использовали кшРНК для стабильного нокдауна либо AR-FL, либо AR-V7 в клетках LNCaP95 с индуцируемой Snail (дополнительная фигура S7A).В присутствии каждой кшРНК контрольные клетки, обработанные носителем, были чувствительны к обработке энзалутамидом. Подобно вышеизложенному, энзалутамид существенно не снижал рост клеток в обработанных 4OHT активированных клетках улитки, экспрессирующих контрольную кшРНК. Однако истощение либо AR-FL, либо AR-V7 восстанавливало чувствительность к энзалутамиду в присутствии активированной улитки (рис. 6А). Эти данные показывают, что экспрессия как AR-FL, так и AR-V7 важна для устойчивости к энзалутамиду, опосредованной Snail.

Рис. 6. Опосредованная улитками резистентность к энзалутамиду остается зависимой от АР. A. Контрольные клетки LNCaP95 или активированные клетки Snail, трансдуцированные указанными кшРНК, культивировали в RPMI 10% CS-FBS, содержащем ДМСО или 50 мкМ энзалутамида. Клетки фиксировали, пермеабилизировали и окрашивали Hoechst. Процентную жизнеспособность клеток рассчитывали с использованием программного обеспечения ImageJ для анализа общей площади клеток, *p<0,05, **p<0,005, ***p<0,0001; однофакторный дисперсионный анализ. B. Вестерн-блот анализ уровней экспрессии AR в клетках LNCaP с активацией Snail или без нее. VCaP является положительным контролем для обнаружения AR-V7. C. Обработанные тамоксифеном клетки LNCaP Snail(+) более устойчивы к ингибированному энзалутамидом росту. Количество клеток подсчитывали через 7 дней в присутствии возрастающих концентраций энзалутамида. График репрезентативен для двух экспериментов, проведенных в трех повторностях, и представлен как среднее значение и стандартная ошибка среднего, * p<0,05; t-критерий Стьюдента. D. Схематическое изображение роли Snail и AR в развитии метастатического и кастрационно-резистентного заболевания. Улитка опосредует метастазирование и резистентность к лечению посредством регуляции генов, участвующих в эпителиальной пластичности и АР соответственно.Точно так же и AR, и AR-V7 участвуют в стимуляции программ пластичности эпителия. Таким образом, одна из моделей прогрессирования заболевания представляет собой петлю обратной связи, которая может быть активирована как при улитке, так и при АР с одинаковым исходом — высокометастатическим, резистентным к лечению заболеванием.

Наши результаты показывают, что как AR-FL, так и AR-V7 важны для повышения резистентности к энзалутамиду, опосредованной улитками. Мы предположили, что улитке может потребоваться AR-V7 для повышения устойчивости к энзалутамиду. Поэтому мы проверили способность Snail индуцировать устойчивость к энзалутамиду в отсутствие AR-V7.Исходная клеточная линия LNCaP не имеет обнаруживаемых уровней AR-V7, а экспрессия индуцируемого Snail в клетках LNCaP недостаточна для индукции экспрессии AR-V7 (фиг. 6B). И наоборот, активация Snail увеличивала экспрессию AR-FL (в 1,4 раза) и ядерную локализацию (рис. 6B, дополнительная фигура S7B). Важно отметить, что индукция Snail привела к увеличению устойчивости к энзалутамиду (рис. 6C). Вместе наши клинические данные и данные in vitro показывают, что Snail не требует AR-V7 для опосредования устойчивости к энзалутамиду.Мы предполагаем, что AR-V7 важен для устойчивости к энзалутамиду только в том случае, если он был предварительно отобран в условиях кастрации.

Наши результаты показывают, что повышенная экспрессия Snail важна не только в контексте метастатического заболевания, но и в условиях КРРПЖ человека, способствуя экспрессии AR в ответ на терапию, направленную на AR, и, таким образом, устойчивость к блокаде AR. Мы идентифицируем новую функцию Snail как ключевой фактор в опосредовании устойчивости к энзалутамиду посредством регуляции экспрессии AR и клеточной локализации в ядре.Действительно, истощение Snail снижает экспрессию AR-FL и AR-V7 и восстанавливает чувствительность к энзалутамиду. Эти результаты подчеркивают потенциальную клиническую полезность совместного воздействия на механизмы, которые способствуют экспрессии и активности AR-FL и AR-V7, для повышения эффективности используемых в настоящее время методов лечения, нацеленных на AR. Мы также демонстрируем, что Snail клинически связана с метастазами по сравнению с локализованным раком простаты, и активации Snail достаточно для повышения агрессивности клеток рака простаты in vitro .

ОБСУЖДЕНИЕ

Улитка – новый регулятор устойчивости к энзалутамиду

Улитка – фактор транскрипции, участвующий в регуляции эпителиальной пластичности посредством контроля экспрессии генов, участвующих в миграции и инвазии. Эти гены содержат элементы E-box, необходимые для распознавания Snail и регуляции транскрипции. Одна гипотеза состоит в том, что Snail может регулировать транскрипцию AR-FL и AR-V7 посредством распознавания двух Е-боксов, расположенных рядом с сайтом начала транскрипции AR .Интересно, что увеличение скорости транскрипции AR напрямую связано с генерацией AR-V7 [7]. Альтернативно, Snail может косвенно регулировать транскрипцию AR . В предыдущем исследовании сообщалось, что Zeb1, известный ген-мишень Snail, может распознавать E-боксы в промоторе AR и управлять транскрипцией AR [42]. Однако мы не наблюдали никакого влияния на экспрессию AR при нокдауне Zeb1 (дополнительная фигура S7C). Кроме того, мы обнаружили, что другие регуляторы пластичности, такие как TWIST, не участвуют в индуцировании ЭМП или в стимулировании экспрессии AR или устойчивости к энзалутамиду, что указывает на специфичность Snail в опосредовании инвазии, а также устойчивости к ингибированию AR.Активность и локализация Snail могут регулироваться различными факторами роста и киназами, любой из которых может быть нацелен на ингибирование опосредованной Snail резистентности к энзалутамиду и/или метастазирования. Например, индукция Snail связана с передачей сигналов ядерного фактора-κB (NF-κB) [43], а путь NF-κB также связан с устойчивостью к энзалутамиду и метастатическим раком предстательной железы [44, 45].

В клинических образцах мы показываем, что экспрессия как Snail, так и AR-V7 повышена в метастатических биопсиях по сравнению с биопсиями первичного рака предстательной железы, при этом активация Snail наблюдается даже в метастатических условиях, не устойчивых к кастрации.Предыдущая работа выявила низкие уровни AR-вариантов при локализованном раке предстательной железы с использованием методов секвенирования РНК [46]. Наши клинические данные свидетельствуют об увеличении экспрессии AR-V7 от локализованного рака предстательной железы до метастатического гормоночувствительного (HSPC) до CRPC, особенно при резистентности к энзалутамиду/абиратерону. Эти данные подтверждаются недавними клиническими данными, связывающими экспрессию циркулирующих опухолевых клеток AR-V7 с первичной резистентностью как к энзалутамиду, так и к абиратерона ацетату у мужчин с мКРРПЖ [19, 20].Кроме того, в нашей модели in vitro устойчивого к энзалутамиду CRPC ингибирование Snail снижало экспрессию AR-FL и AR-V7. Вместе эти результаты клинических образцов и клеточных моделей позволяют предположить, что улитка важна для ранней инвазии и метастазирования при гормоночувствительном заболевании. Однако при дальнейшем прогрессировании заболевания до КРРПЖ Snail дополнительно участвует в регуляции экспрессии AR, тем самым становясь важным для индукции резистентности к терапии, нацеленной на AR, такой как энзалутамид.

Неоднородность наших моделей и пациентов

Недавние исследования выявили неоднородность между каждым пациентом с раком простаты и внутри него [46, 47]. В большинстве случаев АР является клинически значимой терапевтической мишенью; однако давление отбора, вызванное терапией, направленной на андрогены, способствует появлению более гетерогенных клеточных популяций. Например, многочисленные исследования показали, что ингибирование AR с помощью ADT может способствовать ЕМТ. И наоборот, аберрантная передача сигналов AR была показана при управлении EMT при CRPC (рассмотрено в [48]).Подобно этим исследованиям, которые подчеркивают зависимую от клеточного контекста регуляцию EMT с помощью AR, в предыдущем исследовании сообщалось, что сверхэкспрессия Snail индуцирует дифференцировку нейроэндокринного рака простаты (NEPC) в клетках рака простаты [49]. В нашем исследовании мы не наблюдали изменений маркеров NEPC при активации Snail (данные не представлены). Приобретенные случайные или выбранные стохастические мутационные или эпигенетические события могут развиваться при длительном серийном пассировании или отбираться в условиях кастрации.В настоящей работе большая часть работы моделируется как заболевание, которое уже прогрессировало до КРРПЖ, при этом следующей линией терапии является энзалутамид. И наоборот, Snail-индуцированная дифференцировка NEPC была показана в условиях гормоночувствительной модели рака предстательной железы [49].

Другим модельно-зависимым эффектом является взаимосвязь между AR-FL, AR-V7 и устойчивостью к энзалутамиду. Ямамото и др. (2015) наблюдали, что AR-FL вызывает устойчивость к энзалутамиду у LNCaP, несущих агонистическую мутацию F876L, в то время как AR-V7 опосредует устойчивость к энзалутамиду в модели 22Rv1, в которой AR-V7 экспрессируется на более высоких уровнях, чем полноразмерный AR [50].Эти исследования подчеркивают явление, зависящее от клеточного контекста, которое мы наблюдаем в наших модельных системах. Эта изменчивость не должна вызывать удивления, поскольку такая же гетерогенность наблюдается у пациентов в контексте геномных событий, а также различных воздействий и методов лечения, которые могут влиять на экспрессию и регуляцию генов [46].

Препятствование неизбежному развитию агрессии и резистентности

Текущая работа идентифицирует Snail, движущую силу эпителиальной пластичности, как медиатор экспрессии AR и устойчивости к энзалутамиду.Наоборот, как AR-FL, так и AR-V7 также способны индуцировать гены, связанные с эпителиальной пластичностью, включая Snail [21, 51–54]. Учитывая очевидную индукцию Snail с помощью AR и наоборот , можно предположить сценарий, в котором один из этих факторов инициирует генные изменения, которые подпитывают другой, тем самым приводя к агрессивной, устойчивой к лечению опухоли. В этом сценарии результат будет одинаковым, независимо от того, началась ли петля обратной связи с индукции AR или активации Snail (рис. 6D).Таким образом, одновременное ингибирование Snail и AR может предотвратить или отсрочить резистентность только к терапии, направленной на AR, и несколько подходов разрабатываются доклинически для подавления активности Snail [55, 56].

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

Образцы пациентов

Для образцов локализованного рака предстательной железы (n=188), тканевый микрочип (TMA) на случайной подгруппе (n=188) пациентов в базе данных Shared Equal Access Research Center (SEARCH) лечение в Durham VA было разработано, как сообщалось ранее [40].

Для образцов метастатического рака предстательной железы (n = 31) и второй когорты образцов локализованного рака предстательной железы (n = 29) метастатическая ткань, фиксированная формалином, была собрана в отделении патологии Университета Дьюка и в ядре биорепозитория Института рака Дьюка в рамках отдельного IRB Duke. утвержденный протокол. Были собраны клинические данные о предшествующей терапии и месте метастазирования.

Линии клеток

Клетки LNCaP95 были любезно предоставлены доктором Скоттом Дехмом (Университет Миннесоты) и описаны в предыдущих исследованиях [7].LNCaP95 представляют собой андроген-независимую клеточную линию, полученную из родительской LNCaP. И LNCaP, и LNCaP95 экспрессируют мутантный AR (T877A). Клетки культивировали в среде RPMI, содержащей 10% очищенной углем эмбриональной бычьей сыворотки (Sigma) и 1% пенициллина/стрептомицина (Life Technologies). Популяции резистентных клеток культивировали с добавлением 50 мкМ энзалутамида (поставляется Medivation/Astellas). Клетки LNCaP95, устойчивые к энзалутамиду (LNCaP95-EnzaR), получали путем хронического культивирования в энзалутамиде до концентрации 50 мкМ.Клетки были аутентифицированы и повторно аутентифицированы после устойчивости к энзалутамиду посредством секвенирования, включая наличие известной мутации домена, связывающего лиганд LNCaP AR, T877A. Клетки LNCaP95, стабильно экспрессирующие индуцибельную Snail (плазмида Addgene #18798) или указанные мишени shRNA, были получены путем трансдукции клеток LNCaP95, как описано ранее [57]. pWZL Blast Snail ER был подарен Bob Weinberg (плазмида Addgene # 18798) [57]. Клетки LNCaP получали из Центра культивирования клеток Duke и культивировали в среде RPMI, содержащей 10% эмбриональной бычьей сыворотки (Sigma) и 1% пенициллина/стрептомицина (Life Technologies).

Анализы роста клеток

Контрольные клетки LNCaP95 и клетки LNCaP95-Enza-R культивировали в среде, содержащей ДМСО (Sigma) или 50 мкМ энзалутамида, в течение как минимум одной недели. Клетки подсчитывали с использованием Countess II (Life Technologies). Среднее число клеток/мл и стандартная ошибка среднего (SEM) рассчитывались для трех лунок. Для контроля LNCaP95 и клеток Enza-R, стабильно экспрессирующих кшРНК, клетки обрабатывали ДМСО или 50 мкМ энзалутамида и подсчитывали, как указано выше. Для клеток, экспрессирующих LNCaP95 Snail, предварительно обработанные этанолом (EtOH) или 4OHT клетки LNCaP95 обрабатывали ДМСО или 6.25, 12,5, 25 и 50 мкМ энзалутамида. Жизнеспособность клеток измеряли через 10 дней лечения лекарственным средством с использованием реагента для анализа WST-1 (Roche). Для клеток улитки LNCaP95, стабильно экспрессирующих кшРНК, клетки обрабатывали ДМСО или 50 мкМ энзалутамида в течение одной недели. Затем клетки фиксировали в 4% параформальдегиде (PFA, Sigma) и окрашивали красителем Hoechst (Sigma). Затем лунки визуализировали на инвертированном эпифлуоресцентном микроскопе Olympus IX 71. Общая площадь была рассчитана по трем репрезентативным изображениям на лунку с использованием ImageJ (версия 2.0.0-rc-41/1.50d).

Количественная ОТ-ПЦР в реальном времени

Тотальную РНК выделяли с использованием набора Quick-RNA Miniprep (Zymo Research). Тотальную РНК подвергали обратной транскрипции с использованием набора для обратной транскрипции кДНК High-Capacity (Life Technologies). Аликвоты 5-кратно разбавленных реакций обратной транскрипции подвергали количественной (q) ПЦР с мастер-миксом KAPA SYBR FAST с использованием системы обнаружения ПЦР в реальном времени Vii7 (Applied Biosystems). Уровни мРНК GAPDH измеряли для нормализации, и данные представлены как «относительная экспрессия».Полный список последовательностей праймеров приведен в дополнительном тексте.

Иммуноблот-анализ

Для иммуноблот-анализа экстракты клеток смешивали с буфером для образцов SDS и подвергали SDS-PAGE. После электрофоретического переноса на нитроцеллюлозу фильтры блокировали, инкубировали с антителами и проявляли с помощью имидж-сканера Odyssey-FC (LI-COR).

Для фракционирования ядер и цитоплазмы экстракцию ядер и цитоплазмы проводили в соответствии с протоколом производителя с использованием набора NE-PER (ThermoScientific).Полный список первичных антител и их разведений представлен в дополнительном тексте. Все изображения иммуноблотов представляют собой обрезанные пятна, чтобы улучшить четкость и краткость рукописи и сохранить все важные полосы.

Иммунофлуоресцентное окрашивание

Для иммунофлуоресценции (ИФ) клетки фиксировали в 4% PFA, пропитывали 0,2% Triton X-100 и окрашивали Hoechst. Клетки блокировали 5% бычьим сывороточным альбумином (BSA, Sigma) перед инкубацией с первичными антителами.Клетки инкубировали со вторичными антителами Alexa Fluor (Life Technologies), а затем визуализировали на перевернутом эпифлуоресцентном микроскопе Olympus IX 71 или с использованием программного обеспечения Cellomics для количественного определения ядерно-цитоплазматического анализа.

Анализы миграции и инвазии

Культуральную среду добавляли в нижние лунки камер Бойдена (BD Bioscience), а клетки добавляли в верхние камеры. Мигрирующие клетки, прикрепленные к нижней стороне вставок, фиксировали 4% PFA, пермеабилизировали 0.2% Triton X-100 и окрашен фаллоидином (Life Technologies). Вставки промывали 1× PBS (Life Technologies) и визуализировали с использованием 4× объектива на инвертированном эпифлуоресцентном микроскопе Olympus IX 71 и анализировали с помощью ImageJ. Анализы инвазии матригеля выполняли с использованием покрытых матригелем 24-луночных транслуночных планшетов (BD Biosciences), как описано выше.

Иммуногистохимия

Мы провели оптимизацию антител и аналитическую проверку всех антител, как описано ранее [40].Опытный патологоанатом простаты, ослепленный результатами, оценивал окрашивание антител параллельно с гематоксилином и эозином. При оценке каждого биомаркера использовали шкалу от 0 до 3 как для интенсивности, так и по шкале <25%, <50%, <75%, <100% для частоты экспрессии в каждом образце опухоли.

RNA-ISH

Для AR-V7 RNA-ISH фиксированные формалином предметные стекла с метастатическими опухолями, залитые парафином, инкубировали с зондом AR-V7 (401221) с использованием RNAscope 2.0 HD Brown Assay от Advanced Cell Diagnostics в соответствии с протоколом производителя. .Эксперт-патолог оценил экспрессию мРНК AR-V7 по шкале от 0 до 4 в соответствии с рекомендациями, изложенными в протоколе производителя.

Статистический анализ

Данные представлены как среднее ± SEM. Критерий Стьюдента или сравнение нескольких групп выполняли с помощью однофакторного дисперсионного анализа с последующим применением метода Сидака для сравнения средних значений. P≤0,05 считается значимым. Различия в экспрессии Snail и AR-V7 между локализованными и метастатическими образцами анализировали с использованием критерия хи-квадрат.Данные, доступные через TCGA, были проанализированы с использованием теста Крускала-Уоллиса с использованием JMP (версия pro 12). Все остальные анализы проводились с помощью Prism (версия 6.0d).

БЛАГОДАРНОСТЬ

Авторы благодарят д-ра Скотта Дема за его полезные предложения и за предоставление клеточной линии LNCaP95, а также д-ра Джун Луо за обмен зондами AR-V7 и его ценные советы относительно РНК-ИСГ. Мы также хотели бы поблагодарить компанию Medivation/Astellas за предоставленный ингибитор АР энзалутамид.

КОНФЛИКТ ИНТЕРЕСОВ

AJA сообщает, что он консультируется и получает институциональное финансирование исследований от Astellas/Medivation, которая частично поддержала некоторые из доклинических исследований, описанных в этой рукописи.Эти результаты полностью раскрываются Университету Дьюка. Все остальные авторы не сообщают о потенциальных конфликтах интересов.

ПОДДЕРЖКА ГРАНТОВ

Эта работа была поддержана грантами NIH F32 CA192630 (KW Ware), Astellas Scientific and Medical Affairs (AJ Armstrong), Фондом рака простаты (AJ Armstrong) и Janssen Diagnostics (AJ Armstrong и MA Garcia-Blanco). ), постдокторская стипендия Американского онкологического общества № PF-11-036-01-DDC (JA Somarelli) и NIH NRSA F32-CA165482 (D.Шеффер). JAS также выражает признательность за поддержку со стороны Института рака Дьюка, Лаборатории мочеполовой онкологии Университета Дьюка и Департамента ортопедии Университета Дьюка.

ССЫЛКИ

1. Siegel RL, Miller KD, Jemal A. Статистика рака, 2015. CA Cancer J Clin. 2015 г.; 65:5-29.

2. Шер Х.И., Халаби С., Таннок И., Моррис М., Штернберг С.Н., Кардуччи М.А., Айзенбергер М.А., Хигано С., Бабли Г.Дж., Драйсер Р., Петрилак Д., Кантофф П., Баш Э., Келли В.К., Фигг В.Д., Смолл Э.Дж. и др.Дизайн и конечные точки клинических испытаний для пациентов с прогрессирующим раком простаты и кастрационным уровнем тестостерона: рекомендации Рабочей группы по клиническим испытаниям рака простаты. Журнал клинической онкологии. 2008 г.; 26:1148-1159.

3. Чен К.Д., Уэлсби Д.С., Тран С., Бэк С.Х., Чен Р., Весселла Р., Розенфельд М.Г., Сойерс С.Л. Молекулярные детерминанты резистентности к антиандрогенной терапии. Природная медицина. 2004 г.; 10:33-39.

4. Арора В.К., Шенкейн Э., Мурали Р., Субудхи С.К., Вонгвипат Дж., Балбас М.Д., Шах Н., Кай Л., Эфстатиу Э., Логотетис С., Чжэн Д., Сойерс С.Л.Глюкокортикоидные рецепторы обеспечивают устойчивость к антиандрогенам, минуя блокаду рецепторов андрогенов. Клетка. 2013; 155:1309-1322.

5. Li Y, Hwang TH, Oseth LA, Hauge A, Vessella RL, Schmechel SC, Hirsch B, Beckman KB, Silverstein KA, Dehm SM. Внутригенные делеции AR связаны с экспрессией и активностью вариантов сплайсинга андрогенных рецепторов в моделях прогрессирования рака предстательной железы. Онкоген. 2012 г.; 31:4759-4767.

6. Ли Ю., Алсагаби М., Фан Д., Бова Г.С., Тевфик А.Х., Дехм С.М. Внутригенная перестройка и измененный сплайсинг РНК рецептора андрогенов в клеточной модели прогрессирования рака предстательной железы.Исследования рака. 2011 г.; 71:2108-2117.

7. Liu LL, Xie N, Sun S, Plymate S, Mostaghel E, Dong X. Механизмы сплайсинга рецепторов андрогенов в клетках рака предстательной железы. Онкоген. 2014; 33:3140-3150. doi: 10.1038/onc.2013.284.

8. Уэр К.Е., Гарсия-Бланко М.А., Армстронг А.Дж., Дехм С.М. Биологическое и клиническое значение вариантов рецепторов андрогенов при кастрационно-резистентном раке предстательной железы. Эндокринный рак. 2014; 21: Т87-Т103.

9. Дехм С.М., Шмидт Л.Дж., Химерс Х.В., Весселла Р.Л., Тиндалл Д.Дж.Сплайсинг нового экзона рецептора андрогена генерирует конститутивно активный рецептор андрогена, который опосредует резистентность к терапии рака предстательной железы. Исследования рака. 2008 г.; 68:5469-5477.

10. Hu R, Dunn TA, Wei S, Isharwal S, Veltri RW, Humphreys E, Han M, Partin AW, Vessella RL, Isaacs WB, Bova GS, Luo J. Лиганд-независимые варианты рецепторов андрогенов, полученные в результате сплайсинга скрытые экзоны означают гормонорезистентный рак предстательной железы. Исследования рака. 2009 г.; 69:16-22.

11. Guo Z, Yang X, Sun F, Jiang R, Linn DE, Chen H, Kong X, Melamed J, Tepper CG, Kung HJ, Brodie AM, Edwards J, Qiu Y.Новый вариант сплайсинга рецептора андрогена активируется во время прогрессирования рака предстательной железы и способствует росту, устойчивому к истощению андрогенов. Исследования рака. 2009 г.; 69:2305-2313.

12. Уотсон П.А., Чен Ю.Ф., Балбас М.Д., Вонгвипат Дж., Соччи Н.Д., Виале А., Ким К., Сойерс С.Л. Конститутивно активные варианты сплайсинга рецептора андрогена, экспрессируемые при кастрационно-резистентном раке предстательной железы, требуют полноразмерного рецептора андрогена. Труды Национальной академии наук Соединенных Штатов Америки.2010 г.; 107:16759-16765.

13. Сунь С., Шпренгер К.С., Весселла Р.Л., Хаугк К., Сориано К., Мостагель Э.А., Пейдж С.Т., Коулман И.М., Нгуен Х.М., Сунь Х., Нельсон П.С., Плимат С.Р. Устойчивость к кастрации при раке предстательной железы человека обеспечивается часто встречающимся сплайс-вариантом рецептора андрогена. Журнал клинических исследований. 2010 г.; 120:2715-2730.

14. Hu R, Isaacs WB, Luo J. Моментальный снимок сигнатуры экспрессии вариантов сплайсинга андрогенных рецепторов и их отличительной транскрипционной активности.Простата. 2011 г.; 71:1656-1667.

15. Zhang X, Morrissey C, Sun S, Ketchandji M, Nelson PS, True LD, Vakar-Lopez F, Vessella RL, Plymate SR. Варианты рецептора андрогена часто встречаются в метастазах рака предстательной железы, резистентного к кастрации. ПлоС один. 2011 г.; 6:e27970.

16. Ceraline J, Erdmann E, Erbs P, Deslandres-Cruchant M, Jacqmin D, Duclos B, Klein-Soyer C, Dufour P, Bergerat JP. Функциональный анализ на основе дрожжей для обнаружения мутантного андрогенного рецептора при раке предстательной железы.Европейский журнал эндокринологии. 2003 г.; 148:99-110.

17. Qu Y, Dai B, Ye D, Kong Y, Chang K, Jia Z, Yang X, Zhang H, Zhu Y, Shi G. Конститутивно активный AR-V7 играет важную роль в развитии и прогрессировании кастрации. — резистентный рак предстательной железы. Научные отчеты. 2015 г.; 5:7654.

18. Найквист М.Д., Ли И., Хванг Т.Х., Мэнлов Л.С., Весселла Р.Л., Сильверстайн К.А., Войтас Д.Ф., Дехм С.М. Реаранжировка гена AR, сконструированная с помощью TALEN, выявляет эндокринное разобщение рецептора андрогена при раке предстательной железы.Труды Национальной академии наук Соединенных Штатов Америки. 2013; 110:17492-17497.

19. Антонаракис Э.С., Лу С., Ван Х., Любер Б., Наказава М., Розер Дж.К., Чен Ю., Мохаммад Т.А., Чен Ю., Федор Х.Л., Лотан Т.Л., Чжэн К., Де Марзо А.М., Исаакс Дж.Т., Исаакс В.Б., Надаль Р. и др. AR-V7 и устойчивость к энзалутамиду и абиратерону при раке предстательной железы. Медицинский журнал Новой Англии. 2014; 371:1028-1038. дои: 10.1056/NEJMoa1315815.

20. Scher HI, Lu D, Schreiber NA, Louw J, Graf RP, Vargas HA, Johnson A, Jendrisak A, Bambury R, ​​Danila D, McLaughlin B, Wahl J, Greene SB, Heller G, Marrinucci D, Fleisher М и др.Связь AR-V7 с циркулирующими опухолевыми клетками в качестве биомаркера, специфичного для лечения, с исходами и выживаемостью при кастрационно-резистентном раке предстательной железы. ЯМА онкология. 2016; doi: 10.1001/jamaoncol.2016.1828.

21. Cottard F, Asmane I, Erdmann E, Bergerat JP, Kurtz JE, Ceraline J. Конститутивно активные варианты рецепторов андрогенов усиливают экспрессию мезенхимальных маркеров в клетках рака предстательной железы. ПлоС один. 2013; 8:e63466.

22. Лю Г., Спренгер С., Сун С., Эпилепсия К.С., Хаугк К., Чжан Х., Коулман И., Нельсон П.С., Плимат С.Вариант AR AR(v567es) индуцирует канцерогенез в новой модели рака предстательной железы у трансгенных мышей. Неоплазия. 2013; 15:1009-1017.

23. Sun F, Chen HG, Li W, Yang X, Wang X, Jiang R, Guo Z, Chen H, Huang J, Borowsky AD, Qiu Y. Вариант сплайсинга рецептора андрогена AR3 способствует раку предстательной железы посредством модуляции экспрессии аутокринного /паракринные факторы. Журнал биологической химии. 2014; 289:1529-1539. doi: 10.1074/jbc.M113.492140.

24. Kong D, Sethi S, Li Y, Chen W, Sakr WA, Heath E, Sarkar FH.Варианты сплайсинга рецептора андрогена способствуют агрессивности рака предстательной железы за счет индукции ЭМП и экспрессии маркерных генов стволовых клеток. Простата. 2015 г.; 75:161-174. doi: 10.1002/pros.22901.

25. Бич С., Танг Х., Парк С., Диллон А.С., Келлер Э.Т., Колх В., Йенг К.С. Snail является репрессором транскрипции RKIP в клетках метастатического рака предстательной железы. Онкоген. 2008 г.; 27:2243-2248.

26. Heeboll S, Borre M, Ottosen PD, Dyrskjot L, Orntoft TF, Torring N. Snail1 сверхэкспрессируется при раке предстательной железы.APMIS: Acta Pathologica, Microbiologica, et Immunologica Scandinavica. 2009 г.; 117:196-204.

27. Odero-Marah VA, Wang R, Chu G, Zayzafoon M, Xu J, Shi C, Marshall FF, Zhau HE, Chung LW. Активатор рецептора экспрессии лиганда NF-kappaB (RANKL) связан с эпителиально-мезенхимальным переходом в клетках рака предстательной железы человека. Клеточные исследования. 2008 г.; 18:858-870.

28. Биттинг Р.Л., Шеффер Д., Сомарелли Дж.А., Гарсия-Бланко М.А., Армстронг А.Дж. Роль пластичности эпителия в распространении рака предстательной железы и резистентности к лечению.Метастазирование рака, ред. 2014 г.; 33:441-468. doi: 10.1007/s10555-013-9483-z.

29. Sun Y, Campisi J, Higano C, Beer TM, Porter P, Coleman I, True L, Nelson PS. Индуцированное лечением повреждение микроокружения опухоли способствует резистентности к терапии рака предстательной железы через WNT16B. Природная медицина. 2012 г.; 18:1359-1368.

30. Sun Y, Wang BE, Leong KG, Yue P, Li L, Jhunjhunwala S, Chen D, Seo K, Modrusan Z, Gao WQ, Settleman J, Johnson L. Депривация андрогенов вызывает эпителиально-мезенхимальный переход в простате : последствия для андроген-депривационной терапии.Исследования рака. 2012 г.; 72:527-536.

31. Армстронг А.Дж., Маренго М.С., Олтин С., Кемени Г., Биттинг Р.Л., Тернбулл Д.Д., Герольд С.И., Марком П.К., Джордж Д.Дж., Гарсия-Бланко М.А. Циркулирующие опухолевые клетки от пациентов с распространенным раком предстательной железы и молочной железы имеют как эпителиальные, так и мезенхимальные маркеры. Молекулярные исследования рака. 2011 г.; 9:997-1007.

32. Доминго-Доменек Дж., Видаль С.Дж., Родригес-Браво В., Кастильо-Мартин М., Куинн С.А., Родригес-Барруэко Р., Бональ Д.М., Харитонович Э., Гладун Н., де ла Иглесиа-Висенте Дж., Петрилак Д.П., Бенсон МС, Сильва Дж. М., Кордон-Кардо К.Подавление приобретенной устойчивости к доцетакселу при раке предстательной железы за счет истощения клеток, инициирующих опухоль, зависимых от Notch и Hedgehog. Раковая клетка. 2012 г.; 22:373-388.

33. Ю.З., Чен С., Совальский А.Г., Вознесенский О.С., Мостагель Э.А., Нельсон П.С., Цай С., Балк С.П. Быстрая индукция вариантов сплайсинга андрогеновых рецепторов при андрогенной депривации при раке предстательной железы. Клинические исследования рака. 2014; 20:1590-1600.

34. Beer TM, Armstrong AJ, Rathkopf DE, Loriot Y, Sternberg CN, Higano CS, Iversen P, Bhattacharya S, Carles J, Chowdhury S, Davis ID, de Bono JS, Evans CP, Fizazi K, Joshua AM, Ким С.С. и др.Энзалутамид при метастатическом раке предстательной железы до химиотерапии. Медицинский журнал Новой Англии. 2014; 371:424-433.

35. Hu R, Lu C, Mostaghel EA, Yegnasubramanian S, Gurel M, Tannahill C, Edwards J, Isaacs WB, Nelson PS, Bluemn E, Plymate SR, Luo J. Отдельные программы транскрипции, опосредуемые лиганд-зависимой полной Андрогеновый рецептор и его варианты сплайсинга при кастрационно-резистентном раке предстательной железы. Исследования рака. 2012 г.; 72:3457-3462.

36. Хики Т.Е., Ирвин С.М., Двинге Х., Тарулли Г.А., Хэнсон А.Р., Райан Н.К., Пикеринг М.А., Биррелл С.Н., Ху Д.Г., Маккензи П.И., Рассел Р., Калдас С., Радж Г.В., Дехм С.М., Плимат С.Р., Брэдли РК и др.Экспрессия вариантов сплайсинга рецептора андрогена при клиническом раке молочной железы. Онкотаргет. 2015 г.; 6:44728-44744. doi: 10.18632/oncotarget.6296.

37. Медичи Д., Хэй Э.Д., Олсен Б.Р. Snail и Slug способствуют эпителиально-мезенхимальному переходу через бета-катенин-Т-клеточный фактор-4-зависимую экспрессию трансформирующего фактора роста-бета3. Мол Биол Селл. 2008 г.; 19:4875-4887.

38. Морено-Буэно Г., Кубильо Э., Саррио Д., Пейнадо Х., Родригес-Пинилья С.М., Вилла С., Болос В., Хорда М., Фабра А., Портильо Ф., Паласиос Х., Кано А.Генетическое профилирование эпителиальных клеток, экспрессирующих репрессоры E-cadherin, выявило различную роль факторов Snail, Slug и E47 в эпителиально-мезенхимальном переходе. Исследования рака. 2006 г.; 66:9543-9556.

39. Эпштейн Дж.И., Зелефски М.Дж., Сьоберг Д.Д., Нельсон Дж.Б., Эгевад Л., Маги-Галлуцци С., Викерс А.Дж., Парвани А.В., Рейтер В.Е., Файн С.В., Истхэм Дж.А., Виклунд П., Хан М., Редди К.А., Чиезки Д.П. , Найберг Т. и др. Современная система оценки рака простаты: проверенная альтернатива шкале Глисона.Европейская урология. 2016; 69:428-435. doi: 10.1016/j.eururo.2015.06.046.

40. Армстронг А.Дж., Хили П., Халаби С., Фоллмер Р., Ларк А., Кемени Г., Уэр К., Фридланд С.Дж. Оценка панели биомаркеров пластичности эпителия у мужчин с локализованным раком предстательной железы. Рак предстательной железы и заболевания предстательной железы. 2016; 19:40-45. doi: 10.1038/pcan.2015.46.

41. Scher HI, Beer TM, Higano CS, Anand A, Taplin ME, Efstathiou E, Rathkopf D, Shelkey ​​J, Yu EY, Alumkal J, Hung D, Hirmand M, Seely L, Morris MJ, Danila DC, Humm Дж. и др.Противоопухолевая активность MDV3100 при кастрационно-резистентном раке предстательной железы: исследование фазы 1-2. Ланцет. 2010 г.; 375:1437-1446.

42. Грэм Т.Р., Якуб Р., Талиаферро-Смит Л., Осункойя А.О., Одеро-Марах В.А., Лю Т., Кимбро К.С., Шарма Д., О’Реган Р.М. Реципрокная регуляция ZEB1 и AR в клетках тройного негативного рака молочной железы. Исследования и лечение рака молочной железы. 2010 г.; 123:139-147.

43. Жюльен С., Пуч И., Каретти Э., Бонавентура Дж., Неллес Л., ван Рой Ф., Дарджемонт С., де Эррерос А.Г., Беллакоса А., Ларю Л.Активация NF-kappaB с помощью Akt активирует экспрессию Snail и индуцирует переход эпителиальной мезенхимы. Онкоген. 2007 г.; 26:7445-7456.

44. Надиминти Н., Туммала Р., Лю С., Ян Дж., Лу В., Эванс С.П., Гао А.С. NF-kappaB2/p52 индуцирует устойчивость к энзалутамиду при раке предстательной железы: роль рецептора андрогена и его вариантов. Молекулярная терапия рака. 2013; 12:1629-1637.

45. Jin R, Yi Y, Yull FE, Blackwell TS, Clark PE, Koyama T, Smith JA, Jr., Matusik RJ. Сигнатура гена NF-kappaB предсказывает прогрессирование рака предстательной железы.Исследования рака. 2014; 74:2763-2772.

46. Атлас исследований генома рака N. Молекулярная таксономия первичного рака предстательной железы. Клетка. 2015 г.; 163:1011-1025.

47. Гундем Г., Ван Лоо П., Кремейер Б., Александров Л.Б., Тубио Дж.М., Папэммануил Э., Брюэр Д.С., Каллио Х.М., Хогнас Г., Аннала М., Кивинумми К., Гуди В., Латимер К., О’Мира С., Доусон К.Дж., Исаакс В. и др. Эволюционная история летального метастатического рака предстательной железы. Природа. 2015 г.; 520:353-357.

48. Бишоп Дж.Л., Дэвис А., Кетола К., Зубейди А.Регуляция пластичности опухолевых клеток андрогенным рецептором при раке предстательной железы. Эндокринный рак. 2015 г.; 22: Р165-182.

49. McKeithen D, Graham T, Chung LW, Odero-Marah V. Транскрипционный фактор улитки регулирует нейроэндокринную дифференцировку в клетках рака предстательной железы LNCaP. Простата. 2010 г.; 70:982-992.

50. Ямамото Ю., Лорио Ю., Беральди Э., Чжан Ф., Вятт А.В., Накоузи Н.А., Мо Ф., Чжоу Т., Ким Ю., Мониа Б.П., Маклауд А.Р., Фазли Л., Ван Ю., Коллинз К.С., Зубейди А., Глив М. Поколение 2.5 антисмысловых олигонуклеотидов, нацеленных на рецептор андрогена и его варианты сплайсинга, подавляют рост устойчивых к энзалутамиду клеток рака предстательной железы. Клинические исследования рака. 2015 г.; 21:1675-1687.

51. Sun F, Chen HG, Li W, Yang X, Wang X, Jiang R, Guo Z, Chen H, Huang J, Borowsky AD, Qiu Y. Вариант сплайсинга рецептора андрогена AR3 способствует раку предстательной железы посредством модуляции экспрессии аутокринного /паракринные факторы. Журнал биологической химии. 2014; 289:1529-1539.

52. Цзин Ю, Цуй Д, Го В, Цзян Дж, Цзян Б, Лу И, Чжао В, Ван С, Цзян Ц, Хань Б, Ся С.Активированный рецептор андрогена способствует метастазированию рака мочевого пузыря через эпителиально-мезенхимальный переход, опосредованный слизью. Письма Рак. 2014; 348:135-145.

53. Zhu ML, Kyprianou N. Роль андрогенов и рецепторов андрогенов в эпителиально-мезенхимальном переходе и инвазии клеток рака предстательной железы. журнал ФАСЭБ. 2010 г.; 24:769-777.

54. Лю Ю.Н., Лю Ю., Ли Х.Дж., Хсу Ю.Х., Чен Д.Х. Активированный рецептор андрогена подавляет экспрессию гена Е-кадгерина и способствует метастазированию опухоли.Молекулярная и клеточная биология. 2008 г.; 28:7096-7108.

55. Lee SH, Shen GN, Jung YS, Lee SJ, Chung JY, Kim HS, Xu Y, Choi Y, Lee JW, Ha NC, Song GY, Park BJ. Противоопухолевый эффект новых небольших химических ингибиторов связывания Snail-p53 в раковых клетках с мутацией K-Ras. Онкоген. 2010 г.; 29:4576-4587.

56. Харни А.С., Ли Дж., Манус Л.М., Ван П., Балвег Д.М., ЛаБонн С., Мид Т.Дж. Направленное ингибирование факторов транскрипции цинковых пальцев семейства улиток с помощью конъюгата олигонуклеотид-Co (III) основания Шиффа.

Author:

Добавить комментарий

Ваш адрес email не будет опубликован.